丹皮药材指纹图谱定性和有效成分定量分析方法研究

目的　建立丹皮药材的反相高效液相色谱定性和定量分析方法。方法　RP HPLCPlanetsilC18分析柱 (15 0mm× 4 .6mm ,5 μm) ,流动相为甲醇 水 冰醋酸 (44∶5 6∶0 .1) ,流速为 1.0mL·min-1,检测波长为 2 4 0nm ,柱温为室温 ,对丹皮药材进行指纹图谱定性分析 ,并对丹皮中的有效成分丹皮酚进行定量测定。结果　在此色谱条件下 ,13份不同丹皮药材的RP HPLC指纹图谱中可检出 11个相对位置稳定的色谱峰 ,通过色谱峰间峰面积的相关性分析 ,可以确定 10个峰可作为定性鉴别的指标峰 ;丹皮药材中丹皮酚含量为 1.32 %～ 2 .78%。结论　丹皮RP HPLC指纹图谱定性和有效成分定量分析方法具有较好的针对性和准确性 ,可用于丹皮药材的质量控制。     

川芎药材活性部位的高效液相色谱指纹图谱定性分析方法

目的　建立川芎药材活性部位的指纹图谱 ,为其定性鉴别提供依据。方法　川芎药材经乙醇超声提取后 ,用醋酸乙酯萃取 ,采用ODS柱为分析柱 ,以甲醇 水 冰醋酸 (30∶70∶0 .5 )为流动相 ,在 2 76nm条件下进行分析 ,建立其指纹图谱。并对 7种不同来源的川芎药材进行高效液相色谱指纹图谱定性分析比较。结果　本研究建立的分析方法的精密度、重现性较好 ,以阿魏酸峰计 ,RSD分别为 1.6 8%和 1.0 4 % ;不同川芎药材指纹图谱中主要峰群的整体图貌基本一致 ,但各成分含量的相对比值有所不同 ,不同来源的川芎药材共有峰面积的比值及共有峰面积和均有一定的差异。结论　HPLC指纹图谱分析法可简便、快速地鉴别区分不同来源的川芎药材     

基于故障树的城市轨道交通运营可靠性分析

以预防和减少城市轨道交通运营故障的发生为目的,利用故障树的分析方法,建立了城市轨道交通运营故障树模型,对导致城市轨道交通运营失效的故障进行了定性以及定量分析。定性分析获得了导致城市轨道交通运营失效的所有故障组合,定量分析获得了导致城市轨道交通运营失效的主要故障类型,利用定性定量分析得到的结果,提出了提高城市轨道交通运营可靠性的相关建议,为运营故障的检测以及维修提供方法和依据。     

地铁项目建设过程后评估研究

针对地铁项目建设过程后评估问题,在考虑地铁项目建设过程多种因素影响的基础上,结合地铁的特点,分别构建综合测度一级评估指标体系和二级评估指标体系,并用强弱准则对评估指标进行有效性检验。利用定量分析为主、定性分析和定量分析相结合的方法,建立地铁项目建设后评价的模糊物元模型。基于生命周期视角,结合实例进行计算。     

~(99m)Tc-MIBI甲状腺癌阳性显像

目的　研究99mTc -MIBI三相显像对甲状腺癌的定性诊断价值。方法　将 1 5 0例受检者分甲状腺癌 ( 5 8例 )和甲状腺良性结节 ( 92例 )两组 ,以患侧 /健侧摄取比值 (UR)为定量指标 ,观察其 5min和 60min摄取比值变化。结果　甲状腺癌组动脉血流灌注异常增高占 74 1 3% ,而良性结节组仅为 31 .5 2 % ;甲状腺癌组 5min和 60minUR值分别为 1 86± 0 65和 1 63±0 49,而良性结节组分别为 0 81 3± 0 1 8和 0 82 7± 0 1 6,两组两时相UR值比较均有显著性差异 (P <0 0 1 )。结论　99mTc MIBI三相显像对甲状癌的定性诊断具有较高价值。     

大型物流企业运营质量的综合评价方法研究

针对大型物流企业运营质量评价问题,讨论了评价指标的选取原则,提出了评价运营质量的10项关键指标和模糊综合评判方法。结合在大型物流企业获得的调研数据,详细说明了对其运营质量进行模糊综合评判的方法和步骤。该方法能将定性分析和定量分析统一起来,使评价结果更为客观可信。     

基于液体芯片-飞行时间质谱分析的肺结核患者血清差异表达蛋白

目的应用液体芯片-飞行时间质谱技术分析肺结核患者和正常对照人群的血清蛋白多肽图谱,找出组间具有统计学意义的差异表达蛋白多肽,从而筛选出肺结核的标志蛋白多肽峰图(m/z)。方法应用2种液体蛋白芯片技术(MB-WCX和MB-IMAC-CU)结合飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对14例病理确诊的肺结核患者和32例正常对照人群进行血清蛋白多肽图谱分析;采用ClinProTools软件分析肺结核患者和正常对照组的组间差异表达蛋白。结果 MB-WCX型液体蛋白芯片处理后共获得74个蛋白多肽峰图,其中42个蛋白多肽峰图呈组间极显著差异(P<0.001)表达。MB-IMAC-CU型液体蛋白芯片处理后共获得68个蛋白多肽峰图,有11个蛋白多肽呈组间极显著差异(P<0.001)表达,且其中的8个峰图与MB-WCX型液体芯片检出的组间极显著差异峰图完全相同。经MB-WCX处理所获的42个差异蛋白多肽峰图中有17个蛋白多肽在肺结核患者组中表达上调,其余25个蛋白多肽在肺结核患者组中表达下调。结论利用液体芯片-飞行时间质谱技术可以从肺结核患者的血清中获得稳定丰富的蛋白多肽图谱,并且能够筛选出潜在的疾病标志物。     

人唾液蛋白的高效疏水色谱分离纯化

目的　探讨高效疏水色谱分离、纯化人全唾液蛋白、腮腺液蛋白及颌 /舌下腺液蛋白的最佳分离条件和临床意义。方法　将收集的唾液样品经低温离心 ,过滤 ,冻干 ,低温保存备用。以不同浓度的 (NH4 ) 2 SO4 、KH2 PO4 溶液分别为A、B流动相 ,梯度分离 ,收集各个组分峰 ,通过生化方法对蛋白进行定性。结果　全唾液蛋白被分离为 12个峰组分 ,腮腺液被分离为 6个峰组分 ,颌 /舌下腺液被分为 8个峰组分。经统计学处理 ,平均出峰时间标准差小 ,个体间重复性好。目前能初步定性的唾液蛋白为富含脯氨酸蛋白、半胱氨酸蛋白、富酪蛋白和富组蛋白及α 淀粉酶。结论　疏水色谱可用于人全唾液蛋白、腮腺液蛋白及颌 /舌下腺液蛋白的分离     

黄芩苷对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的抑制作用及其机制

目的观察黄芩苷对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的作用及其相应机制。方法利用MTT法检测黄芩苷对HeLa细胞增殖的影响;Transwell小室法检测黄芩苷对HeLa细胞侵袭能力的影响;Real-time PCR法检测黄芩苷对MMP-2、MMP-9RNA表达水平的影响;Western blot法检测黄芩苷对MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响;Western blot法检测黄芩苷对P38和p-P38蛋白表达的影响;Real-time PCR法检测黄芩苷和sb203580联合应用对MMP-2和MMP-9RNA表达水平的影响。结果黄芩苷能够有效抑制HeLa细胞的增值,当质量浓度超过60μg/mL时,与对照组相比(0μg/mL)差异出现统计学意义。在低于细胞增殖抑制浓度时,黄芩苷也能够有效抑制HeLa细胞的侵袭,10、20、40μg/mL组穿过基质胶到达小室底端的细胞数目分别为对照组的(97.58±17.78)%、(67.95±49.75)%和(32.35±20.41)%。黄芩苷能够有效抑制HeLa细胞中MMP-2和MMP-9的表达及有效抑制HeLa细胞中P38的磷酸化水平;P38信号通路抑制剂预处理,能够增强黄芩苷对MMP-2和MMP-9表达的抑制作用。结论黄芩苷能够有效抑制HeLa细胞的侵袭转移,这种作用可能与其通过调节P38信号通路的活性进一步调节MMP-2和MMP-9的表达有关。     

大豆多肽对糖尿病模型大鼠的血糖控制及对胰岛细胞的保护作用

目的研究大豆多肽对四氧嘧啶(AXN)糖尿病(DM)模型大鼠的降血糖作用及对AXN损伤大鼠胰岛细胞的保护作用。方法用AXN建立大鼠DM模型,分别用500、250mg/kg体质量大豆多肽连续灌胃2周后,观察其对空腹血糖、糖耐量的影响。观察胰腺超微结构变化,分离并培养大鼠胰岛细胞并观察大豆多肽对AXN损伤的大鼠胰岛细胞的超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)和一氧化氮(NO)含量的影响。结果大豆多肽高、低剂量均能降低DM模型大鼠血糖,其血糖绝对降低值(mmol/L)分别为10.65±5.33、8.84±4.66,显著高于DM模型组的4.16±4.48(P<0.05);改善DM大鼠的糖耐量,降低餐后血糖水平,与DM模型对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05);但对餐后血糖的控制能力低于膳食纤维(P<0.05)。胰腺超微结构观察显示,大豆多肽组胰岛β细胞分泌颗粒内电子密度较高,颗粒外有较大的空隙,细胞质内线粒体、高尔基体水肿明显缓解。在培养的AXN损伤大鼠胰岛细胞中,大豆多肽的SOD水平(U/mL)较对照组显著升高(7.44±3.59、29.48±2.40),MDA和NO水平(μmol/L)降低,分别为5.59±0.88、2.39±0.15和81.38±3.79、61.85±1.84(P<0.05);且随着大豆多肽浓度的增加,其对AXN损伤的大鼠胰岛细胞的保护作用明显增强(P<0.05)。结论大豆多肽可明显降低AXN DM大鼠血糖,改善糖耐量,并对AXN损伤的大鼠胰岛细胞有保护作用。     

Response surface optimization of microwave-assisted extraction for HPLC-fluorescence determination of puerarin and daidz

Microwave-assisted extraction was optimized with response surface methodology for HPLC-fluorescence determination of puerarin and daidzein in Radix Puerariae thomsonii.The optimized extraction procedure was achieved by soaking the sample with 70% methanol     

Study on chromatographic fingerprint of sarcandra glabra （Thunb.） by microwave-assisted extraction coupled to HPLC/DAD

Microwave-assisted extraction (MAE) was used for extraction of effective components of sarcandra glabra (Thunb.), and then chromatographic fingerprint of sarcandra glabra (Thunb.) was studied by high performance liquid chromatography/diode array detector (HPLC/DAD). The conditions of MAE were optimized by an orthogonal experiment, and then the authentication and validation of the chromatographic fingerprint were conducted. Nine peaks were identified as common peaks in the fingerprint chromatograms, and isofraxidin was considered as a reference compound and quantified. Relative standard deviations of retention time and peak area of each component were less than 3% and 8%, respectively. Similarity and difference analysis were conducted by use of PCA and relation coefficient. Twenty batches of sarcandra glabra (Thunb.) samples from two different producing areas could be classified into two different groups in the PCA model. The results showed that MAE-HPLC/DAD method was simple, efficient and stable for the study of complex chromatographic fingerprint of sarcandra glabra (Thunb.), which could provide more reliable and precise information for quality evaluation.     

Fingerprint Analysis of PolygonumavculareL. Using High-Performance Liquid Chromatography

An HPLC method was established to control the quality of PolygonumavculareL. The active ingredients in PolygonumavculareL. samples were extracted with methanol, and then analyzed by high-performance liquid chromatography (HPLC). The fingerprint of PolygonumavculareL. as well as its 11 typical peaks were established. The HPLC method demonstrated good precision, reproducibility, and stability, with the relative standard deviations of retention time and peak area less than 3%.     

用薄层色谱法测定骨康片中士的宁和马钱子碱含量

目的 建立骨康片中士的宁和马钱子碱的含量测定方法。方法 采用双波长薄层扫描法，硅胶GF２５４薄层板，展开剂为甲苯丙酮乙醇浓氨试液(4∶3∶1∶2)，检测波长，士的宁λＳ＝２５８nｍ，λＲ＝３１０ｎｍ；马钱子碱λＳ＝３０１ｎｍ，λＲ＝３３５ｎｍ。结果 士的宁和马钱子碱的相关系数分别为0..9996和0..9999，方法的回收率分别为99..83%(RSD=1.03%)和96..09%(RSD=2.01%)。结论 方法准确、简便、重现性好，同时可以定量测定骨康片中士的宁和马钱子碱含量，可作为该药的质量控制方法。     

Rapid analysis of components in Rhizoma Anemarrhenae by HPLC-DAD-MS and HPLC-DAD-TOFMS

A global quality control method based on high performance liquid chromatography (HPLC) coupled with diode array detection (DAD), single quadrupole mass spectrometry (MS) and time-of-flight mass spectrometry (TOFMS) was developed for simultaneous determination of seven major components (mangiferin, neomangiferin, timosaponin E1, timosaponin E, timosaponin BⅡ, timosaponin BⅢ, and timosaponin AⅢ) and identification of most components in extracts of Rhizoma Anemarrhenae (RA). HPLC analysis was performed on an Agilent SB-C18 column (4.6 mm×150 mm, 5 μm) by gradient elution using acetonitrile and water-acetic acid(100∶0.05, v/v) as the mobile phase. Seven major components in RA were successfully separated. This quantitative method was fully validated in respect of the following performance criteria: linearity, precision, repeatability, stability, accuracy, limits of detection (LOD) and quantification (LOQ). A formula database of known compounds in RA was established, against which, most of the reported components in this herbal extract were identified effectively based on the extract masses acquired by TOFMS. This qualitative and quantitative method was successfully used to analyze the components in 10 batches of RA samples collected from different regions in China. This global quality control method, which consisted of HPLC-DAD-MS assay of seven major components and unambiguous identification of nineteen components, is suitable for routine quantification and comprehensive quality control of RA.     

RP-HPLC method for the quantitation of β-Sitosterol in Elaeagnus Gon yanthes Benth

Objective To establish an RP-HPLC method for the determination of β-Sitosterol in Elaeagnus Gonyanthes Benth. Methods The separation was performed on a luna C8 (2) (150 mm×4.6 mm, 5μm) column with the mobile phase of methanol-water (88∶12, v/v) at a flow rate of 1.0 mL/min, the detection wavelength was set at 210 nm, and the temperature of the column was maintained at 35 ℃. Results The calibration curve of β-Sitosterol was linear over the concentration range of 0.075-0.375 mg/mL (r=0.9999) and the average recovery of β-Sitosterol was 96.30% with RSD of 3.60%(n=3). Conclusion The method is simple, rapid, and accurate, and can be used for the quality control of Elaeagnus Gonyanthes Benth.     

HPLC法测定健宝胶囊中淫羊藿苷含量

目的　建立健宝胶囊中淫羊藿苷的含量测定方法。方法　采用高效液相色谱法 ,色谱柱为C18(15 0mm×4.6mm) ,流动相为乙腈 0 .0 75mol·L-1磷酸溶液 (2 5∶75 ) ,流速 1.0mL·min-1,检测波长为 2 70nm。结果　淫羊藿苷进样量在 0 .0 6～ 0 .30 μm范围内 ,线性关系良好 (r=0 .9991) ,方法回收率为 98.5 0 %(n =5 ,RSD =1.2 0 %)。结论　本方法准确、简便、快速 ,适合于该药的质量分析检验。     

后张预应力钢束有效预应力分布模式判别与模拟方法

在大、中跨径混凝土桥梁预应力状况检测及评价的实施过程中,为了获知预应力束筋当前预应力有效值及其分布状态,提出了有效预应力沿程分布的统一模拟方法。基于预应力损失理论,建立了具有普遍意义的拟摩阻损失函数简化解析算法。以单束可控测点处的应力测值为已知条件,结合钢束沿程有效预应力分布状况的隶属模式判别,完成了名义损失参数识别,实现了复杂几何型式钢束实际有效预应力沿程分布规律的统一模拟。模拟结果表明:有效预应力相对误差阈值为5%,满足工程精度要求,因此,统一模拟方法可行。