一种改良式质粒DNA提取方法的建立与应用

目的建立一种稳定、可靠的质粒DNA提取改良方法,探讨其在分子生物学实验研究中的应用价值。方法将含有目的质粒的菌株扩增后,运用改良后的碱裂解法进行质粒DNA小量提取,微量核酸仪测定提取质粒DNA的产量及纯度;采用琼脂糖凝胶电泳、内切酶酶切及质粒转染真核细胞鉴定提取质粒DNA的质量及转染效率。结果改良式质粒提取方法获得质粒DNA产量为3.2 mg/L菌液,A260/280=1.91;内切酶酶切完全;质粒DNA以超螺旋结构为主;真核细胞转染效率为20%左右。结论改良式质粒DNA抽提方法操作简单、实用,获得质粒DNA产量多、质量高,能达到分子生物学常规实验的要求。     

REAL-TIME DETECTION OF SURVIVIN mRNA EXPRESSION IN CERVICAL CANCER CELL LINES USING MOLECULAR BEACON IMAGING

Objective To detect the expression of survivin mRNA in cervical cancer cell lines using molecular beacon imaging technology. Methods Human cervical cancer cells （HeLa and SiHa） and human fetal lung fibroblast HFL-I were cultured in vitro. After adding 100 nmol/L survivin mRNA molecular beacon, the fluorescent signals were observed under fluorescent microscope. The expressions of survivin in cervical cancer cells and HFL-I cell were examined by immunocytochemical streptravidin-biothin peroxidase （SP） assay at the same time. Results Two kinds of survivin mRNA molecular beacon, with different color fluorescence, had strong fluorescent signal in cervical cancer cell lines, and the signal in SiHa cell line was stronger, but these signals were not found in HFL-I ; Immunocytochemical staining of positive survivin was located in the cytoplasm of cervical cancer cell lines HeLa and SiHa, whereas, no expression of survivin was detected in HFL-I cell line. Conclusion The technology of molecular beacon imaging can be used to detect the expression of survivin mRNA in viable cells successfully, and may provide a new approach to the diagnosis of early stage cervical cancer and the following-up in the clinic.     

城市轻轨车辆转向架方案的选择

本文根据城市轻轨车辆用转向架的运用条件和技术要求,结合我国的技术水平和传统特点,对城市轻轨车辆转向架结构设计中应考虑的问题进行了分析,认为在进行轻轨车辆转向架设计时,应采用空气弹簧、盘形制动,弹性车轮、磨耗形踏面、焊接构架等先进技术.     

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指出了一体化交通系统是与智能交通系统并行的世界性的发展趋势，论述了交通系统一体化的必要性。提出了从三个方面理解一体化交通系统的内涵:交通系统的一体化是对交通系统资源的整体优化，交通系统的一体化是对交通需求的统一管理，交通系统的一体化体现在交通运输的全过程。指出了交通系统一体化的外延。重点讨论了两个问题:一体化交通系统与智能交通系统的关系问题，ITS与交通工程的关系问题。提出了把非技术范畴的因素从ITS中分离开来的观点。     

尘埃落定:B型引力探测器50年探索总结——B型引力探测器作为一个概念简单的实验,验证了广义相对论的两个预言,但是精度未达到预期目标

1962年,Francis Everitt来到斯坦福大学,受命成为B型引力探测器( GP- B)的首位全职雇员.历经半个世纪,耗资7.6亿美元之后,Everitt在GP-B发射升空7年之后宣布,GP-B完成了数据分析,分析结果表明,爱因斯坦的巨著又一次顺利地经受住了考验.按照实验设定的参数,GP-B将以前所未有的精度来测量爱因斯坦广义相对论的两个预言:所谓的短程线效应和坐标系拖曳效应,这两个效应会令毫无外力矩作用的绕轨飞行的陀螺仪发生进动.Everitt和他的同事最终给出了短程线效应的测量精度为0.3%,而更小的坐标系拖曳效应测量精度为20%.在GP-B历时半个世纪的实验过程中,他们制造了荣膺最完美球体吉尼斯世界记录的乒乓球大小的陀螺转子,并用5年的时间坚持不懈地对陀螺仪干扰力矩进行建模和数据处理等,堪称是一个不同凡响的艰难历程.     

一种100％低地板有轨电车转向架构架的焊接工艺

介绍了一种100%低地板有轨电车转向架构架,描述了该构架的主要结构特点,分析了其工艺难点,提出了合理的焊接工艺措施。     

在建隧道排水系统结晶堵塞试验

为了探究在建公路隧道排水系统结晶堵塞机理，分析隧道排水系统结晶堵塞的发展过程，自主研制了可模拟隧道初支混凝土、地下水渗流过程、隧道排水系统的试验装置系统。通过该系统模拟了富水隧道排水系统渗流结晶过程；通过检测隧道排水管排出溶液的pH值、总碱度、Ca²⁺浓度以及排水管内的结晶量等，研究了速凝剂掺量、地下水水质对生成结晶体的影响。结果表明：结晶体的主要成分为CaCO₃，结晶体中的钙元素主要来源于水泥；地下水的渗流过程会致使混凝土中的Ca²⁺析出，最终流出排水管或以CaCO₃结晶体形式沉积在排水管内；排水管流出溶液的pH值和总碱度变化曲线基本呈现先快速下降，后缓慢下降趋于稳定的趋势，结晶体生成的溶液环境pH值和碱性较高。对于一般水质：4种速凝剂掺量条件下排水管流出溶液pH值变化范围在11.4~12.6之间，初始总碱度最高达12 650 CaCO₃ mg·L^-1，稳定后溶液碱度均大于500 CaCO₃ mg·L^-1；对于碳酸氢钠型水质：4种速凝剂掺量条件下pH变化幅度在9.62~12.25之间；初始总碱度最高达1 252 CaCO₃ mg·L^-1，稳定后溶液总碱度均大于550 CaCO₃ mg·L^-1；0%和6%速凝剂掺量下结晶体生成量明显大于10%和20%掺量，10%掺量下结晶体生成量最小；碳酸氢钠型水质条件下，水泥水化产物Ca （OH）₂会直接和HCO₃^-发生化学反应，生成CaCO₃结晶体，较一般水质结晶体的生成速率更快，生成量更多。     

AWD四驱时代 从特性认识AWD

很多人被汽车的分类给搞得不知所措，有按车型分的，有按车身尺寸分的，还有按照驱动形式来分的。在这里，我们着重对汽车驱动形式中的四轮驱动技术进行一些介绍，尤其是AWD全时四驱。     

特困大学生心理障碍分析

本文论述了特困大学生中常见的心理障碍及其危害，分析了造成特困大学生心理障碍的主要原因，提出了引导特困大学生克服心理障碍的主要对策。     

基于Offload和FPGA的网络传输设计与实现

offload主要指将原本在软件协议栈中进行的IP分片、TCP分段、重组、checksum检验等操作转移到网卡硬件中进行,以降低系统CPU负荷、提高处理性能。文章提出了基于offload的机制,用FPGA实现网卡功能以高速传输网络数据,并通过FPGA编码在网络数据中加入时间戳用于流量控制。