脑源性神经营养因子融合蛋白真核表达质粒的构建及表达

目的 构建以增强型绿色荧光蛋白(EGFP)为报告基因的脑源性神经营养因子(BDNF)融合蛋白真核表达质粒,并对其表达和定位进行研究.方法 以人血白细胞DNA为模板,利用一对删除终止密码子的引物进行PCR获得BDNF基因片段,并将其与pEGFP-N1质粒载体连接,构建BDNF-EGFP融合蛋白真核表达质粒.以脂质体Lipofectamine2000 转染Hela细胞,提取总RNA,通过RT-PCR方法检测BDNF-EGFP在转录水平的表达,Western blot 及荧光显微镜进一步观察融合蛋白的表达定位.结果 酶切和PCR鉴定证实BDNF基因片段正确克隆入载体质粒中,转染Hela细胞后,RT PCR证实BDNF EGFP融合蛋白在转录水平有表达,荧光显微镜观察显示BDNF EGFP融合蛋白主要分布于细胞质中,Western blot结果显示Hela细胞培养液中有BDNF EGFP融合蛋白存在. 结论成功构建了BDNF EGFP融合蛋白真核细胞表达质粒,BDNF EGFP融合蛋白能够在Hela细胞中表达,主要位于细胞质中并可以分泌到细胞外.     

隧道围岩结构面数字识别及完整性评价方法

针对当前隧道围岩结构面信息获取方法难以满足隧道快速施工需求的问题,进行基于数字摄影测量系统--CAE Sirovision获取岩体结构面几何信息的研究,详细介绍了双目立体摄影测量的基本原理及结构面产状提取方法。针对具体工程,采用全站仪空间前方交会法进行控制测量,以尼康D7000数码摄像机为摄影工具,采用CAE Sirovision系统进行物像关系模型构建; 通过交互式操作方式实现结构面识别及提取,以测线法RQD指标获取方法为基础,针对传统RQD指标仅能反映隧道轴向结构特性的局限,构建隧道径向RQD评价体系; 针对岩体结构空间差异性,提出隧道径向RQD玫瑰花图,实现了结构面获取、RQD分析、RQD直观显示的集成化处理,为隧道数字化施工提供理论和技术支撑。     

玻璃纤维土工格栅在沥青路面上的应用

主要阐述了玻璃纤维土工格栅的特性,及其在沥青路面中的作用与施工方法。     

港口工程施工中海上作业安全评价方法及应用

港口工程的海上作业是风险较大的工作，确保海洋作业的安全问题日益突出，海上作业的安全性更加引起人们的关注。本文应用安全作业评价的LEC方法对几种具有代表性的港口工程海上施工作业进行安全性评价，对危险源进行分级，指出重大风险因素，并提出了改进措施与管理办法，可以为设置安全设施、建立海上作业安全管理制度提供科学依据。     

船舶辅机学组学术会议在西安召开

中国造船工程学会船舶轮机学术委员会辅机学组于1982年10月11至14日在陕西省西安市召开了学术会议,出席会议的有80个单位共55名代表。会议共收到学术论文32篇,其中大会宣读的有八篇,分舱室设备和甲板机械(含液压)二个小组宣读讨论的论文有22篇,其余两篇作为书面交流。通过到会代表互相交流,特别是对船舶辅机设备的节能和空调制冷技术进行了热烈而深入的