转化生长因子-β1基因RNAi质粒载体的构建与鉴定

目的 构建人转化生长因子-β1(TGFβ1)基因RNAi质粒载体.方法 根据人TGFβ1 mRNA序列选择3个靶序列并设计合成相应3对寡核苷酸序列,同时合成1对阴性对照寡核苷酸序列;将以上4对寡核苷酸序列退火后连入pRNA-U6.2/Lenti质粒并分别命名为pRNA-U6.2/Lenti-1、pRNA-U6.2/Lenti-2、pRNA-U6.2/Lenti-3、pRNA-U6.2/Lenti-4.酶切和测序鉴定后,将以上重组质粒转染Hela细胞,运用RT-PCR和ELISA检测TGFβ1 mRNA和蛋白的表达水平.结果 酶切和测序证实目的 寡核苷酸片段已被准确克隆到pRNA-U6.2/Lenti质粒;与对照组相比,pRNA-U6.2/Lenti-1、pRNA-U6.2/Lenti-2转染Hela细胞后,TGFβ1 mRNA水平及蛋白水平的表达量均受到明显抑制;其中TGFβ1蛋白水平在pRNA-U6.2/Lenti-1组下降79.2%,在pRNA-U6.2/Lenti-2组下降53.7%,统计有显著性差异(P＜0.01).结论 成功构建了人TGFβ1基因RNAi质粒载体,对于TGFβ1高表达疾病的基因治疗奠定了基础.     

硝酸亚铈对小鼠睾丸细胞能量代谢相关酶活性、细胞周期及凋亡的影响

目的 探讨硝酸亚铈对于小鼠睾丸细胞能量代谢相关酶类活性、细胞周期以及凋亡的影响.方法 100只雄性小鼠随机分为阴性对照组、环磷酰胺组及硝酸亚铈15、30、60mg/kg组,各组动物用相应受试物连续灌胃60d.采用酶化学方法检测乳酸脱氢酶(LDH)、山梨醇脱氢酶(SODH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、葡萄糖-6磷酸脱氢酶(G-6PD)的活性;采用流式细胞仪检测睾丸细胞的细胞周期及细胞凋亡.结果 与环磷酰胺组比较,15mg/kg硝酸亚铈能促进LDH、SODH、SDH及G-6PD活性(P<0.05),30mg/kg硝酸亚铈有促进SDH活性的作用(P<0.05);15mg/kg和30mg/kg硝酸亚铈均能延长睾丸细胞G0/G1期,缩短S期和G2+M期,抑制细胞凋亡(P<0.05).与阴性对照组比较,60mg/kg硝酸亚铈对LDH、SDH、G-6PD均有显著性抑制作用(P<0.05),且能缩短睾丸细胞G0/G1期,延长S期和G2+M期,细胞凋亡明显增加(P<0.05).结论 低剂量的硝酸亚铈对小鼠睾丸细胞能量代谢相关酶活性和细胞增殖有促进作用,而高剂量硝酸亚铈则表现出明显的抑制作用.     

PCC-PMCC复合式路面的结构设计与经济性分析

根据聚合物改性水泥混凝土(PM CC)的实测力学参数和试验路铺筑使用情况,讨论了PCC-PM CC复合式路面这种新型路面结构的经济性,并提出了面层厚度设计方法。结果表明:PCC-PM CC复合式路面可承受的累计轴载作用次数比普通水泥混凝土路面提高了55%以上,性价比增大幅度可以达到12%以上;结合式PCC-PM CC复合式路面面层总厚度应按照下面层PCC的模量和弯拉强度拟定,上下面层厚度的比值可按照上下面层模量反比、聚合物掺量和经济性确定。     

粉喷桩加固软基的应用体会

本文结合海南某高速公路第一、四合同段及云南某高速公路第八合同段软基处理中使用粉喷桩加固软土路基的工程实践,简介粉喷桩的施工工艺、施工中的注意事项、检验方法及应用体会.     

深海水下保温管汇传热特性分析

以一个典型500 m深水保温管汇为对象,研究其在深水中的温度分布和传热特性规律。利用CFD软件模拟计算了管汇整体在正常运行时和发生事故停输后的温度分布。模拟结果显示,该管汇稳定运行时,生产管路温度较高,各条停输支管温度相对较低,并且停输支管长度越长,支管端部温度越低。支管端部是管汇的危险点,在保温时需要特别注意。在整个管汇事故停输后,管径较小的支管中心温度下降较快,更容易发生凝管事故。该结论对于深水管汇保温层的设计有一定的借鉴意义。     

舰船艉轴架模态分析

采用有限元数值计算方法,以某舰为代表,建立舰船艉轴架模态分析的数学模型,计算并分析军规中所要求的艉轴架的一阶频率。在此过程中,利用模态质量对艉轴系统的频率进行筛选,从而得到P字架的横向和A字架的横、纵、垂向的一阶频率,并与军规中的要求相比较,校核艉轴架的模态特性。     

关于泵站改造施工质量保证体系的实践与思考

加强施工质量保证体系建设是泵站更新改造发挥效益的根本保证,文中针对宝塔镇26座泵站改造的具体特点,结合工程施工实际体会,分析了影响施工质量的主要因素,构建了"三控一督"施工质量保证体系,确保了泵站工程施工质量,同时对其他地区同类工程施工质量控制也具有较好的参考价值。     

植物油再生剂老化时间对再生沥青与集料黏附性的影响研究

废弃植物油再生沥青成本低、绿色环保、性能较好，具有广阔发展前景。为探究植物油再生剂最佳老化时间及对再生沥青与集料黏附性的影响，将大豆油分别老化2、4、6、8、10、12、14、16、18、20 h,制备了11种不同老化程度的植物油再生剂，对短期老化后的50号基质沥青进行再生，并进行了布洛克菲尔黏度、红外光谱、改进型的水煮法以及接触角测试等试验。结果表明：(1)随植物油再生剂老化时间增加，再生沥青黏度增加；(2)植物油老化后羰基、亚砜基含量增加使再生沥青亲水基团含量增加，疏水性降低；(3)沥青再生后，再生剂含有的轻质组分使沥青与集料黏附性增加，随再生剂老化时间增加，剥落面积百分率降低，抗水损害能力增加；(4)Z11再生沥青部分指标接近或超出基质沥青，再生效果最佳，再生剂最佳老化时间为20 h。     

大连港403集装箱堆场工程软基处理措施

介绍大连港403集装箱堆场工程软基的地层结构特性，以及地基处理所采取的措施。