Cav1.3 L-型钙通道K228E突变体的构建及功能研究

目的 通过构建Cav1.3基因K228E突变,观察K228E突变对L-型钙通道电生理特性及蛋白表达和转运的影响.确定钙通道α1亚基结构域ⅠS4段上N-端带正电荷的氨基酸对该通道电生理学特性的作用,从而为创建钙通道起搏器奠定基础.方法 ①一步法快速定点诱变构建Cav1.3基因K228E突变体的真核表达载体;②膜片钳观察突变钙通道电流,激光共聚焦技术观察突变钙通道蛋白在细胞内的表达和定位.结果 ①检测表达于HEK293细胞上的L-型钙电流:转染野生型Cav1.3质粒和相关亚基质粒,可检出L-型钙电流,其半激活电压V1/2=(-36.56±2.08)mV、半失活电压V1/2 =(-42.93±0.14)mV(5mmol Ba2+);而转染K228E-Cav1.3质粒和相关亚基质粒的HEK293T细胞上未检测到钙电流;②检测K228E突变通道蛋白在细胞内的表达和定位:转染野生型和突变型Cav1.3质粒及相关亚基质粒,48h后观察到野生型与突变型钙通道蛋白在细胞膜上都有表达.结论 Cav1.3基因K228E突变虽不影响L-型钙通道蛋白质的表达与转运,但却不表达钙通道电流,是一种功能丧失性突变.     

工程概预算系统的关键技术研究

工程概预算采用计算机来编制,可在很大程度上提高概预算的编制速度,大大减少了编制周期。本文论述了工程概预算的基本理论,指出了工程概预算软件的优点,对工程概预算软件系统中的关键技术,保护定额数据库、工程数据保存和工程数据文件的密码保护进行了详细的论述。     

微机化汽车变速器总成同步器性能与寿命通用试验台

本文介绍了微机控制的汽车变速器总成同步器性能与寿命通用试验台的组成及功能，并着重介绍试验台测量控制系统的硬件设计和计算机管理系统的软件设计。     

血管支架筋宽误差分析及激光加工工艺优化

为解决血管支架激光切割中普遍存在筋宽不均匀的问题，通过激光切割工艺试验及对管材的运动分析，得出影响筋宽的主要因素包括系统误差造成的管材切割点切向速度变化和激光离焦量．根据研究结果，优化了激光切割参数．限制管材回转偏心在0．030mm以下，并设置激光离焦量为-0．05mm（设备显示值），筋宽变化幅度控制在0．010mm以内，满足设计要求．     

公交车辆主要总成零部件终身质保模式的探索

正北京公交集团本着保证车用总成零部件质量、延长配件使用寿命、降低车辆维修成本的原则,自2013年创新性地提出了车辆主要总成零部件全承修、全保修技术服务保障方式,开始探索实施车辆主要总成零部件终身质量保障模式。1传统总成零部件质保模式及存在问题以往传统的质保期模式,由总成零部件供应商提出质保期,质保期内车辆维修单位负责正常保养,总成零部件供应商负责所有故障的处置,并对产品质量负全责。质保期到期后,由北京公交集团     

运营车辆保养新结算方式的试点推行调研

正2016年3月26日,北京公共交通控股(集团)有限公司在其保修分公司第四保修厂所辖保养作业区域开始试点推行运营车辆保养新的结算方式,即依据保养作业实施内容,据实结算级别保养材料费用,试点涉及四个客运分公司的3708辆车。1此前保养费用结算方式情况北京公交集团自2011年开始执行的运营车辆保养费用结算方式,即工费、料费、管理费用分开,客运单位与保修分公司以百公里保养材料费、轮胎