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针对汉坦病毒(Hantanvirus,HV)中国代表株(A9、R22)M基因片段设计分型引物(Ⅰ、Ⅱ型),采用改进的异硫氰酸胍酚一步法(胍酚法)提取汉坦病毒RNA,套式RT-PCR检测稀释病毒上清,模拟病人血清和20例急性期(1~7d)血清样本。结果:能检测到模拟血清中少至几个PFU病毒RNA,敏感性5~10fg。检测过程可在5h内完成。20例急性期患者血清检测阳性率为100%,并能进行临床分型。扩增产物经打点杂交证实其特异性。而正常及非HFRS患者血清结果均为阴性。提示:套式RT-PCR基因诊断技术优于传统的MacELISA、IFAT和RPHI诊断法。 相似文献
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