用PCR-SSCP方法研究子宫颈癌组织中人乳头瘤病毒E_7基因的变异

运用核酸杂交和聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对临床确诊的６１份子宫颈癌Ⅱ～Ⅲ期标本进行了人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）１６型Ｅ７基因的检测。非同位素地高辛标记探针斑点杂交阳性检出率为４５．９％，ＰＣＲ检测阳性率为５４．１％，两种检测结果证实ＨＰＶ－１６型感染与子宫颈癌的发生密切相关。进一步用灵敏的单链构象多态性分析法（ＳＳＣＰ）对３３例阳性标本进行分析，发现有２７例单链ＤＮＡ迁移率与正常对照有不同，推测均发生了ＤＮＡ序列的改变，提示ＨＰＶ－１６Ｅ７基因的变异在子宫颈癌组织中是较常见的现象，其与子宫颈癌的发生有一定的关系。     

DIG－DNA探针检测宫颈癌组织中人乳头瘤病毒6、11、16、18型DNA

用地高辛配基（Ｄｉｇｏｘｉｎｇｅｎｉｎ）分别标记，制备ＨＰＶ－６、ＨＰＶ－１１、ＨＰＶ－１６及ＨＰＶ－１８的ＤＮＡ探针，应用核酸杂交技术，对３７例宫颈癌活检组织ＤＮＡ作了检测，各型ＨＰＶＤＮＡ的检出率为：ＨＰＶ－６０％（０／３７）、ＨＰＶ－１１２．７（１／３７）、ＨＰＶ－１６６７．５％（２５／３７）、ＨＰＶ－１８１３．５％（５／３７），联合应用ＨＰＶ－１６和ＨＰＶ－１８探针共同检测结果为８１％（３０／３７）。结果显示：我国宫颈癌的发生与ＨＰＶ感染密切相关，联合应用高危型ＨＰＶ探针可提高检出率并可省时、简便。ＤＩＧ标记探针因具特异、敏感、安全和简便诸特点，宜推广应用。     

从西安地区正常儿童尿中检测人巨细胞病毒DNA

为了研究人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）感染的流行病学及鉴定ＨＣＭＶ核酸在尿中分布，我们用ＨＣＭＶＡＤ１６９株ＨｉｎｄⅢ－ＥＤＮＡ片段制备探针，采用核酸杂交技术对取自西安地区１８０例３岁～５岁正常儿童的尿标本进行了ＨＣＭＶ相关序列的检测。结果显示出西安地区ＨＣＭＶＤＮＡ阳性者３例（５０份尿标本）占６％；咸阳地区ＨＣＭＶＤＮＡ阳性者７例（５０份尿标本）占１４％；兴平地区ＨＣＭＶＤＮＡ阳性者１９例（８０份尿标本）占２５％。在不同的地区之间，阳性检出率有较明显地差异。     

T-2毒素对胎儿软骨细胞凋亡、Bcl-2和Bax表达的影响及硒的保护作用

目的　探讨T 2毒素对软骨细胞凋亡的作用,和对凋亡调控蛋白Bcl 2 与Bax表达的影响,以及微量元素硒对软骨细胞的保护作用。方法　采用电镜,Annexin V/PI法检测T 2 毒素致人软骨细胞凋亡的情况,采用流式细胞仪检测凋亡相关蛋白Bcl 2和Bax的表达。结果　T 2 毒素可引起软骨细胞发生凋亡的典型电镜形态改变;不同浓度(1~20μg/L)的T 2毒素均可以引起软骨细胞早期凋亡率和晚期凋亡率明显增加,且在一定范围内呈浓度依赖性,T 2毒素浓度为20μg/L时早期凋亡率最高达5.60%,晚期凋亡率最高达8.61%。生理浓度的微量元素硒可部分减弱T 2毒素引起的凋亡;不同浓度(1~20μg/L)的T 2毒素都能引起Bcl 2和Bax表达水平提高,浓度为10~20μg/L时,Bax/Bcl 2比值升高;硒能部分对抗T 2 毒素引起的Bcl 2 和Bax 表达的提高,使Bax/Bcl 2 比值下降,以降低凋亡率。结论　T 2毒素在浓度为1 ~ 20μg/L 时,可以引起软骨细胞凋亡; T 2 毒素引起的软骨细胞凋亡与软骨细胞内Bax/Bcl 2比值升高有关,硒对T 2毒素引起的软骨细胞凋亡有一定保护作用。     

用分子杂交法检测妇女宫颈疾患中的HPVDNA

为了探讨人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）与宫颈癌之间的相关性，我们收集了全国宫颈癌高发县之一的略阳县１２例宫颈癌，１２例宫颈间变，３６例宫颈Ⅱ～Ⅲ度糜烂患者的组织标本，经抽提ＤＮＡ以后，以［ａ－３２Ｐ］ｄＡＴＰ标记ＨＰＶ１６、１８型ＤＮＡ进行打点杂交。结果为宫颈癌ＨＰＶ１６阳性６例，ＨＰＶ１８阳性１例。宫颈间变ＨＰＶ１６阳性４例，ＨＰＶ１８阳性１例。ＨＰＶ１６阳性率分别为５０％和３３．３％，ＨＰＶ１８阳性率为８．３％。宫颈糜烂Ⅱ～Ⅲ度的患者组织ＤＮＡ与ＨＰＶ１６、ＨＰＶ１８混合杂交阳性１７例，阳性率为４７．２％。     

大骨节病4种病因学说的同步研究

目的　研究大骨节病的始动病因。方法　对大骨节病既往的生物地球化学说(低硒说)、水中有机物中毒说、粮食真菌毒素中毒说3种病因说及我们发现的病毒病因说进行同步研究,探讨该病的始动病因。结果　生物地球化学说(低硒说)、水中有机物中毒说、粮食真菌毒素中毒说均不是大骨节病的始动病因。大骨节病的病因模式应该是与环境条件下的生物毒素中毒(低硒条件下的人类微小病毒B19感染)有较大关联性。结论　大骨节病的始动病因可能是低硒条件下的人类微小病毒B19感染引起的。     

构建由胸腺嘧啶激酶基因—小Mu噬菌体DNA插入到HSV BamHI C片段的重组质粒

为了使单纯疱疹病毒1型(HSV-1)的BamHI C片段发生突变,利用DNA重组技术将胸腺嘧啶激酶基因-小Mu噬菌体DNA系统(TK—mM)随机插入到质粒pRB 132中的HSV-1 BamHI C片段内,用DNA斑点杂交法得到6个在BamHI C片段上有TK-mM插入的重组质粒。限制性核酸内切酶的分析结果表明,由于TK—mM的插入,BamHI C片段发生突变,而TK—mM在6个重组质粒中的插入位点也是各不相同的。     

镓盐对骨质疏松骨细胞超微结构的影响

目的探讨镓盐对骨质疏松骨细胞超微结构的影响。方法用8月龄雌性SD大鼠造模,骨质疏松组开腹切除双侧卵巢后缝合,对照组开腹切一小块脂肪后缝合。12周后,取胫骨上段骨组织,观察模型复制情况。嗣后随机分为3组:对照组与骨质疏松组正常饲养12周;硝酸镓治疗组给予硝酸镓治疗(1 mg/kg),3次/周,腹腔注射。应用脱钙骨切片观察光镜下骨形态;制作透射电镜样本,在透射电镜下观察骨细胞形态及骨细胞内部结构情况。结果对照组及硝酸镓治疗组骨细胞结构正常,细胞核染色质分布均匀,核为卵圆形;骨质疏松组部分骨细胞核呈固缩状,形态变长。对照组成骨细胞中细胞器较少,有胶原分泌;骨质疏松组成骨细胞中有大量内质网存在,有大量胶原分泌,硝酸镓治疗组成骨细胞可见有较多胶原分泌,细胞中存在大量内质网及线粒体。结论镓盐对骨质疏松引起的骨细胞超微结构的损伤有改善作用。     

涎腺肿瘤组织中人乳头瘤病毒DNA的检测

为探讨腺上皮起源的涎腺良、恶性肿瘤与人乳头瘤病毒（Ｈｕｍ ａｎ ｐａｐｉｌｌｏ ｍ ａｖｉｒｕｓ, ＨＰＶ）感染的关系,应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）,采用共有引物检测４４例涎腺肿瘤组织中的ＨＰＶ ＤＮＡ的存在状况。１０ 例正常涎腺组织作为对照。结果显示：肿瘤组织中ＨＰＶ ＤＮＡ 阳性检出率达７０．４５％ （３１／４４）,其中恶性肿瘤 ＨＰＶＤＮＡ 阳性率为７７２７％ （３１／４４）;良性肿瘤ＨＰＶＤＮＡ阳性率为６３６３％ （１４／２２）;而正常对照组织中ＨＰＶ ＤＮＡ阳性率仅为１０％ （１／１０）。提示：涎腺肿瘤的发生可能与ＨＰＶ感染有关     

ANTIVIRAL TESTS OF METHYLENE BLUE INJECTION ON VZV IN VITRO

Ｍｅｔｈｙｌｅｎｅｂｌｕｅｉｎｊｅｃｔｉｏｎｉｓａｎａｎｔｉ－ｄｏｔｅ．Ｔｈｅｄｏｃｔｏｒｓｏｆｄｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆｄｅｒｍａ－ｔｏｌｏｇｙ,ｃｅｎｔｒａｌｈｏｓｐｉｔａｌ,ＡｎｓｈａｎｃｉｔｙｏｆＬｉａｏｎｉｎｇＰｒｏｖｉｎｃｅａｐｐｌｉｅｄｔ...