流式细胞仪测定血小板胞浆游离钙浓度

目的建立流式细胞仪测定血小板胞浆游离钙离子浓度[Ca2+]i的方法。方法用Fluo 3-AM作为钙指示剂,在有或无细胞外钙[Ca2+]o存在的条件下,测定静息和凝血酶激活状态下人血小板胞浆游离钙离子浓度[Ca2+]i的变化。结果Fluo 3-AM标记的血小板的平均荧光强度明显增加。凝血酶使负载Fluo 3-AM标记的血小板胞浆[Ca2+]i明显增加,且显示剂量依赖和对[Ca2+]o的依赖。结论凝血酶引起血小板胞浆[Ca2+]i增加的来源主要是[Ca2+]o,可能也有部分是内钙释放的参与。