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1.
传统的RT-PCR方法,要对模板RNA进行提取和纯化,以除去RNA酶和其它杂质,而且要对可能存在的RNA酶进行抑制,防止模板RNA被降解[1]。而在PCR扩增时,用一对引物反转录和扩增的特异性并不高,因此大都采用套式PCR,以获得特异性好的PCR产物。这就使得实验成本增高,耗费时间,同时也给SSCP分析带来很大不便。因为在进行PCR产物的SSCP分析时,产物的特异性要高,即电泳条带要窄、要亮,这样SSCP分析结果才可靠”’。我们采用改良的SIOZ吸附法从血清中提取HCVRNA,并用一对引物对HCVRNAC区进行RT-PCR扩增,获得了…  相似文献   
2.
微量PCR法快速鉴定重组质粒郭晏海,赵君庸,苏成芝,闫小君,肖乐义(西安生物化学教研室西安710061)在分子生物学技术中,应用菌落原位杂交筛选目的基因的重组DNA,由于它敏感而且特异性较高,已逐渐成为一种较为普遍的方法。但是该方法费时而且步骤繁琐,...  相似文献   
3.
传统的RT-PCR方法,要对模板RNA进行提取和纯化,以除去RNA酶和其它杂质,而且要对可能存在的RNA酶进行抑制,防止模板RNA被降解[1]。而在PCR扩增时,用一对引物反转录和扩增的特异性并不高,因此大都采用套式PCR,以获得特异性好的PCR产物。这就使得实验成本增高,耗费时间,同时也给SSCP分析带来很大不便。因为在进行PCR产物的SSCP分析时,产物的特异性要高,即电泳条带要窄、要亮,这样SSCP分析结果才可靠”’。我们采用改良的SIOZ吸附法从血清中提取HCVRNA,并用一对引物对HCVRNAC区进行RT-PCR扩增,获得了…  相似文献   
4.
为了研究西安地区丙型肝炎病毒(HCV)基因组中C区基因的变异性,采用单链构象多态性(Single-StrandConformationPolrmorphism,SSCP)分析万法,对36份HCVRNA阳性血清的PCR产物进行分析,结果有31份样品的SSCP图谱相同,对其中二份样品进行测序,证明序列是相同的;另外5价样品SSCP图谱不相同,其序列与前者也有差异。说明本地区HCV基因组中C区基因存在一个主要的基因类型。该实验为本地区HCV诊断试剂和疫苗的研究确定了研究材料。  相似文献   
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