重组人铜锌超氧化物歧化酶对电离辐射损伤小鼠免疫细胞的…

目的：探讨电离辐射对免疫细胞的影响及重组人铜锌超氧化物歧化酶（ｒｈＣｕＺｎＳＯ）的抗辐射作用。方法：观察＾６０Ｃｏγ射线５￣７Ｇｙ照射前后不同给予ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ对小鼠免疫细胞的影响。结果：电离辐射对小鼠免疫细胞有明显的损伤作用。与照射对照组比较，ｒｈＣｕＺｎＳＯＤ可减轻电离辐射对小鼠免疫细胞的影响，其作用包括增强脾Ｔ淋巴细胞对刀豆蛋白Ａ诱导的增殖反应，提高脾自然杀伤细胞的活性，升高全脾淋巴细胞     

炎性疼痛对小鼠外周组织炎症反应及TNF-α和MCP-1表达的影响

目的通过甲醛制备小鼠炎性疼痛模型研究炎性疼痛对机体局部组织形态结构、炎症反应以及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)等炎症因子表达水平的影响。方法 64只健康雄性小鼠随机分为4组,分别给予右前肢腕部注射生理盐水40μL(NS组)、50mL/L甲醛40μL(FCOH组)、5μg/mL利多卡因0.3mL(L组)、5μg/mL利多卡因0.3mL+50mL/L甲醛40μL(FCOH+L组)处理;48h后分离局部组织,HE染色观察炎细胞浸润情况;Western blot检测TNF-α和MCP-1表达水平。结果与NS组相比,FCOH组于处理24h后出现炎症反应高峰,右前肢腕部厚度增加(1.73mmvs.4.02mm,P<0.05),体温升高(37℃vs.38.3℃,P<0.05);FCOH+L组于处理48h后出现炎症反应高峰,右前肢腕部厚度显著增加(1.68mmvs.5.10mm,P<0.05),体温升高(37℃vs.38.5℃,P<0.05)。此外,处理48h后,同FCOH组相比FCOH+L组小鼠右前肢局部组织中炎性细胞浸润程度增高,而TNF-α和MCP-1表达水平降低(P<0.05)。结论炎性疼痛参与调控局部炎症反应的进程,在修复损伤组织中发挥重要作用。炎症反应发生起始阶段阻断疼痛传递可以增加中性粒细胞浸润,减少局部组织中TNF-α、MCP-1的表达,进而影响炎症反应进程的持续时间。     

顶盖前区前核痛觉调制作用的形态学探讨──HRP束路追踪和免疫细胞化学研究

应用ＨＲＰ束路追踪和免疫细胞化学技术研究了顶盖前区前核（ＡＰｔＮ）和中脑深部网状核（ＤｐＭｅ）之间的纤维联系以及ＡＰｔＮ内几种神经活性物质的分布。将ＨＲＰ注入ＤｐＭｅ后，发现在ＡＰｔＮ内有ＨＲＰ标记的神经元胞体和纤维终末，表明ＡＰｔＶ和ＤｐＭｅ之间存在着双向纤维联系。ＡＰｔＮ内的ＨＲＰ标记细胞呈背、腹两群的极性分布模式。背侧群标记细胞偏向ＡＰｔＮ吻段分布，其中有相当一部分ＨＲＰ标记细胞也是谷氨酸（Ｇｌｕ）阳性细胞，提示ＡＰｔＮ内的这群细胞向ＤｐＭｅ的投射纤维终末以释放Ｇｌｕ为主。ＡＰｔＮ内的ＨＲＰ标记纤维主要位于ＡＰｔＮ尾段的背外侧和腹侧，提示由ＤｐＭｅ到ＡＰｔＮ的传入纤维可能通过ＡＰｔＮ的背外侧和腹侧两条通路进入ＡＰｔＮ。免疫细胞化学染色显示，ＡＰｔＮ含有Ｇｌｕ、亮－脑啡肽（Ｌ－ＥＮＫ）、Ｐ物质（ＳＰ）、酪氨酸羟化酶（ＴＨ）和５－羟色胺（５－ＨＴ）免疫反应阳性胞体和／或纤维，但没有发现加压素（ＶＰ）和β－内啡肽（β－ＥＮＤ）阳性反应结构。上述阳性反应物质在ＡＰｔＮ内各有自己的分布模式，但并不以哪种活性物质为主，提示ＡＰｔＮ功能的多样性和复杂性。     

肺癌患者外周血T细胞亚群及免疫细胞活性的研究

采用 APAAP法和流式细胞仪研究 32例肺癌患者及 30例健康人外周血T细胞亚群及免疫细胞活性 ( NK- A)的变化。结果表明 :肺癌患者外周血 CD+3 、CD+4、CD+4/CD+8及 NK- A与正常人比较呈显著性降低 ( P <0 .0 5 ,P <0 .0 1 ) ;且肺癌伴癌转移者与未转移者上述各项指标亦有显著性差异 ( P <0 .0 5 )。说明肺癌患者存在细胞免疫功能降低 ;伴有癌转移的肺癌患者细胞免疫功能更低。提出积极调节肺癌患者细胞免疫功能 ,增强机体抗肿瘤能力十分重要。     

小剂量顺铂增加人宫颈癌Hela和Siha细胞对光动力治疗敏感性的研究

目的 探讨小剂量顺铂增加入宫颈癌Hela和Siha细胞系对光动力治疗的敏感性及细胞凋亡的机理.方法 将Hela和Siha细胞分为空白对照组、单纯光动力治疗组、单纯顺铂治疗组和光动力加顺铂治疗组,MTT法检测各组入宫颈癌细胞株Hela和Siha的增殖情况.采用免疫细胞化学法检测各组Hela和Siha细胞受作用后P185c-erbB-2蛋白的表达情况.结果 顺铂和光动力治疗联合应用导致细胞凋亡的程度均明显强于单一顺铂作用或光动力作用,细胞中P185c-exbB-2蛋白的表达下降程度也与之相一致.但是先顺铂后光动力治疗和先光动力治疗后顺铂相比,作用效果差异不明显.结论 顺铂和光动力联合治疗在体外对人宫颈癌Hela和Siha细胞有明显增殖抑制作用,强于单独一种方法治疗,其机理可能与抑制P185c-erbB-2表达有关.     

大鼠脉络丛上皮细胞的原代培养与鉴定

目的建立一种简便、实用的大鼠脉络丛上皮细胞的原代培养方法,以便进一步对其进行体外实验研究。方法无菌条件下取1～9d的Sprague-Dawley大鼠脉络丛组织,经机械分离后将细胞种植于含100mL/L胎牛血清的DMEM培养基中进行培养,定期进行形态学观察并摄片。在培养第9天左右,采用电子显微镜及Hematoxylin&Eosin(HE)染色进行形态学观察,免疫细胞化学染色法鉴定并计算脉络丛上皮细胞的纯度。结果培养的脉络丛上皮细胞呈梭形或多角形,电子显微镜下有微绒毛,细胞纯度在95%以上。结论利用机械分散法分离新生大鼠脉络丛上皮细胞,进行原代培养可获得高纯度的脉络丛上皮细胞,该方法简便实用。     

小鼠免疫细胞流式染色过程中细胞丢失量的影响因素

目的观察和探讨小鼠免疫细胞多色流式染色过程中细胞丢失的影响因素。方法取C57BL/6J鼠制备脾细胞悬液,分别用不同种类、不同成分和不同pH值缓冲液洗涤和重悬细胞2次,并计数活细胞数量,观察对染色过程中的细胞丢失量有明显影响的因素。结果在小鼠免疫细胞的流式染色标记过程中,缓冲液种类对细胞丢失量有显著影响,含有钾离子的PBS缓冲液洗涤后会造成明显的细胞丢失;离心机转速过高或过低均会导致显著的细胞丢失;而缓冲液pH值的微量偏移和是否加入FBS/BSA对细胞的丢失影响不明显。结论小鼠免疫细胞的流式染色过程中使用含有钾离子的PBS缓冲液会造成明显的细胞丢失,应推荐使用不含钾离子的PBS缓冲液,同时保持离心转速适中。     

乙型肝炎病毒对T细胞亚群的侵犯及对其功能的影响

以单克隆抗体补作溶解法分离T4、T8细胞亚群，PCR检测65例各型乙肝患者T细胞亚群和PBMCs中的HBVDNA，结合细胞免疫功能改变探讨HBV侵犯免疫细胞对其功能的影响。结果表明：PBMCs中HBVDNA阳性24例（24／65，36．92％），不同类型乙肝患者阳性率差异较大；T4、T8、细胞亚群中HBVDNA阳性分别为16例和21例，HBVDNA阳性组IL2R表达明显降低，抑制细胞功能有不同程度的下降；提示HBV对T8细胞可能更具亲嗜性，HBV对免疫细胞的侵犯是乙肝患者细胞免疫功能紊乱的原因之一。     

血管内皮细胞表面Ⅳ型胶原酶表达研究

血管内皮细胞在血管构筑、基底膜更新修复以及肿瘤组织内的血管生长调控中起重要作用。为进一步了解Ⅳ型胶原酶与内皮细胞、血管外间质之间的相互关系。本文用体外培养的内皮细胞作免疫组织化学染色，观察内皮细胞表面Ⅳ型胶原酶分布与表达。研究结果表明，人血管内皮细胞具有合成和表达Ⅳ型胶原酶的功能，并对此作了进一步的讨论。     

炎症试验

草药被用于治疗已经有很多个年代。当开始使用现代化学疗法时，草药疗法就不常用了，但近年来这种疗法又开始盛行。他们用于保养和小病小恙的治疗和预防，像普通的感冒或心烦气躁，但有时也用于治疗比较严重的疾病，特别是像类风湿性关节炎、慢性神经紊乱或抑郁症等慢性疾病。有迹象表明：草药的部分功能与能够改善或使免疫细胞功能正常化活动有关。