芳香硫酸酯酶定点饱和突变方案的比较

目的比较随机引物与精确引物PCR扩增实施绿脓杆菌芳香硫酸酯酶(Pseudomonas aeruginosa arylsulfatase, PAAS)定点饱和突变的整体效率及成本,以建立高效实用的定点饱和突变方案。方法以大肠杆菌碱性磷酸酶(Escherichia coli alkaline phosphatase, ECAP)与PAAS融合表达质粒为模板,分别用针对PAAS目的位点的随机引物、精确引物等量混合物及单个精确引物,进行全质粒PCR扩增构建定点饱和突变体库;碱裂解细胞后高通量测定PAAS突变体与ECAP活性比值进行筛选,比较3种定点饱和突变建库方案需筛选的单克隆数量、所获突变体种类、整体耗时、整体成本及影响因素。结果用随机引物PCR对M72位定点饱和突变有明显密码子偏好性,筛选超600个单克隆仅获得10种预期突变体,但对G138位定点饱和突变未见明显的密码子偏好性且筛选不到150个单克隆获得18种预期突变体;精确引物等量混合物对M72位实施定点饱和突变,筛选不超过190个克隆成功获得19种预期突变体;单个精确引物对M72位逐个PCR实施定点饱和突变,仅各筛选2个单克隆就获得19种预期突变体。单个精确引物逐个PCR实施定点突变所获饱和突变体库完整,需筛选的单克隆数最少,总耗时和总成本最低;相比之下,用随机引物和精确引物等量混合物实施定点饱和突变时,所需筛选的单克隆数、整体耗时及成本均显著增加。结论解析序列-活性关系时,用单个精确引物逐个PCR实施定点饱和突变有显著整体成本和效率优势;仅筛选阳性突变体时,用精确引物等量混合物进行PCR建库在成本和效率上更有优势。     

一种船舶吃水差的精确计算方法

此文通过分析纵倾状态下船舶吃水差传统计算方法中的误差，提出了一种适合于纵倾，特别是在较大纵倾状态下船舶吃水差的精确计算方法，该方法通常可以在具备一定船舶资料的条件下采用，也可以在船舶装载软件的设计中采用。     

毫米波雷达及其对抗

介绍毫米波雷达的工作原理及其在海战场上的用途和特点,对毫米波雷达在海战场上的发展现状和发展趋势进行了分析,并就海战场毫米波制导雷达的对抗方法进行了概述。     

欧洲的几种自动制导炮弹

欧洲的几种自动制导炮弹所谓自动制导炮弹（亦称灵巧炮弹），系指在没有任何外部干预的条件下，能完全自动地发现、鉴别并命中目标的炮弹。严格说来，那些必须靠制导才能命中目标的炮弹只能称之为半灵巧炮弹。是否属于灵巧炮弹的关键在于能否对目标进行识别，能否分析大量...     

二维非连续边界元分析积分计算的精确表达式

以二维弹性力学问题为研究对象,采用线性非连续元离散边界积分方程,给出了系数矩阵计算的精确表达式,对二维弹性力学问题进行了数值计算,对非连续边界元配位点对计算结果精度的影响进行了讨论,结果表明准奇异积分计算是配位点影响计算结构精度的主要因素。     

装备信息化对水面战斗舰艇的影响

给出了装备信息化的概念和内涵以及装备信息化与机械化的关系.根据水面战斗舰艇在信息化作战中的作用和地位,从战场信息化、舰艇平台信息化、作战系统信息化和弹药信息化等方面,针对武器装备信息化对水面战斗舰艇发展的影响进行了分析,概括了装备信息化背景下水面战斗舰艇的特点和发展趋势.最后结合我国水面战斗舰艇的发展现状,提出了建议.