组织工程修复软骨基质蛋白聚糖代谢的初步探讨

目的 检测软骨修复组织中蛋白聚糖相关代谢指标,初步探讨在软骨修复过程中基质蛋白聚糖的代谢变化以及基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases, MMPs)和蛋白聚糖酶(aggrcanases)的作用.方法 松质骨骨基质明胶(bone matrix gelatin, BMG)复合同种异体软骨细胞构建组织工程化软骨,体内植入修复兔膝关节骨软骨缺损.术后6个月取材检测蛋白聚糖合成表位3-B-3(-)、MMPs、MMPs裂解表位BC-4 以及aggrcanases裂解表位BC-13的表达情况.结果 在修复组织中,蛋白聚糖合成表位3-B-3(-)表达增加,MMPs及其裂解表位BC-4表达减低,而aggrcanases裂解表位BC-13表达阴性.结论 利用蛋白聚糖合成表位3-B-3(-)、MMPs、BC-4、BC-13的表达情况可以初步了解修复软骨组织中蛋白聚糖的代谢变化,修复软骨组织蛋白聚糖的合成大于分解,MMPs在兔关节修复软骨基质蛋白聚糖的基础代谢和重塑中具有重要作用.     

蛋白聚糖与软骨结构、功能及骨关节病的关系

蛋白聚糖是一类由核心蛋白与1条或多条共价连接的氨基聚糖所组成的糖复合物,是细胞膜、基底膜、特别是细胞外基质的重要组成成份,与组织细胞的结构和功能息息相关。随着科学研究的发展,人们逐渐认识到蛋白聚糖代谢与骨软骨发育和退变、神经组织的发育和退变、心血管疾病和肿瘤的发生发展关系密切。本文仅对蛋白聚糖代谢与软骨结构和功能及骨关节病发病机制的研究进行探讨。     

Legg-Perthes病关节软骨功能状态改变及其影响

目的　评价Legg Perthes病早期关节软骨功能状态及其对该病发展的影响。 方法　选择健康杂种幼犬 2 0只 ,雌雄不限 ,采用自身对照方法 ,任选一侧髋为实验侧 ,另一侧作为对照。应用TH胶股骨颈内注射法制作Legg Perthes病动物模型 ,于注胶后 8周、1 2周时幼犬分批处死取材 ,观察组织学变化 ,行软骨基质及软骨下骨蛋白多糖 (Proteoglycan ,PG)和碱性磷酸酶 (Al kalinephosphatase ,AKP)测定。 结果　随着实验时间延长 ,关节软骨病变与骨骺坏死病变逐渐加重 ,实验侧关节软骨增厚 ,早期即可观察到软骨细胞分布较稀散 ,软骨深层空缺软骨陷窝明显增多 ,软骨基质及软骨下骨PG含量显著下降 ,软骨下骨AKP活性明显降低。结论　Legg Perthes病时关节软骨功能早期已有明显障碍 ,其与股骨头骨骺坏死病变可相互促进 ,互相影响     

成年大鼠脑组织蛋白聚糖的提取与分离

本文以成年大鼠脑组织为实验对象，应用层析、酶解及电泳技术对３种提取方法２种提取剂提取蛋白聚糖的效果进行分析比较。结果表明：①用４ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍提取脑蛋白聚糖的量均显著高于用ＰＢＳ，其蛋白质与蛋白聚糖之比却均低于ＰＢＳ．②ＰＢＳ能提取脑组织中的可溶性蛋白聚糖，４ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍既能提取脑组织中的可溶性蛋白聚糖也能提取难溶性蛋白聚糖。③脱脂处理能降低脑蛋白聚糖的提取率，④脑蛋白聚糖经ＰＢＳ提取后，再经４ｍｏｌ／Ｌ盐酸胍提取，沉淀物中其含量甚微。     

EXTRACTION AND ISOLATION OF PROTEOGLYCANS FROM RAT BRAIN

ＺｈａｎｇＬｉｐｉｎｇ（张立萍）；ＴｉａｎＭｅｎｇｙｕ（田梦玉）；ＪｉａＸｉ＇ａｎ（贾锡安）ＥＸＴＲＡＣＴＩＯＮＡＮＤＩＳＯＬＡＴＩＯＮＯＦＰＲＯＴＥＯＧＬＹＣＡＮＳＦＲＯＭＲＡＴＢＲＡＩＮ￥ＺｈａｎｇＬｉｐｉｎｇ；ＴｉａｎＭｅｎｇｙｕ；ＪｉａＸｉ＇...     

谷胱甘肽对Cu~(2+)-H_2O_2导致关节软骨蛋白聚糖降解的影响

应用小牛关节软骨短期器官温育的方法,研究了谷胱甘肽(GSH)对Cu~(2+)-H_2O_2导致关节软骨蛋白聚糖(PG)降解的影响。结果表明:GSH能非常显著地抑制Cu(2+)-H_2O_2对软骨PG的降解作用,并呈剂量依赖型。用Sepharosc 6B柱层析分析软骨PG降解产物,发现GSH还能消除Cu~(2+)-H_2O_2导致的PG链的断裂,保护PG结构的完整。GSH对Cu~(2+)-H_2O_2的作用机理可能一方面与Cu~(2+)形成了复合物,另一方面使H_2O_2还原为H_2O,而消除了两者对软骨PG的降解作用。     

雌激素对骨关节炎模型软骨基质蛋白多糖变化的影响

目的　观察雌激素对骨关节炎 (OA)模型软骨基质蛋白多糖变化的影响 ,探讨外源性雌激素治疗OA的作用机理。方法　以家兔制作OA动物模型 ,在雌激素干预治疗的基础上 ,获取病变早、中、晚期关节软骨 ,提取葡糖氨基聚糖 (GAG) ,用生化和放射免疫技术测定其中不同种类GAG及其功能基团的含量。结果　在病变的不同时期 ,对照组GAG的总量、透明质酸的含量均减少 ,硫酸软骨素与硫酸角质素的含量和比例增高 ;而雌激素干预组GAG的总量、透明质酸的含量、硫酸软骨素与硫酸角质素的含量和比例与正常组接近。结论　外源性雌激素通过抑制糖蛋白降解对OA提供保护作用。     

牛关节软骨培养稳态模型的实验研究方法

参照Ｈａｓｃａｌｌ实验方法建立了牛关节软骨体外培养，并通过组织学观察，３５Ｓ掺入率测定及已糖醛酸测定的方法证明在加入２０％小牛血清的ＤＭＥＭ培养液中，培养７ｄ后，软骨蛋白多糖的代谢达到了稳态，这为研究关节软骨蛋白多糖代谢及其影响因素提供了一个较好的实验模型。     

不同年龄大鼠颗粒性脑蛋白聚糖的比较研究

目的　探讨颗粒性脑蛋白聚糖 (PG)与脑发育和老化的关系。方法　纯种SD大鼠随机分为 3组 :初生组、青年组和近老年组。脑组织经脱脂处理后 ,4mol·L-1盐酸胍提取各组大鼠颗粒性脑PG ,DEAE Sephacel柱层析分离纯化 ,Sepharose 4B柱层析分析其分子大小 ,双向电泳法分析其糖胺多糖 (GAG)的组成。 结果　颗粒性脑PG的提取率随增龄而降低 ;大分子硫酸软骨素蛋白聚糖 (CSPG)主要存在于初生组和青年组 ;小分子硫酸皮肤素蛋白聚糖 (DSPG)的比例随增龄而增高 ,而小分子CSPG的比例则随增龄而降低。结论　颗粒性脑PG随动物年龄的增长发生一定的变化 ,与脑的发育和老化密切相关。     

不同年龄大鼠可溶性脑蛋白聚糖的比较分析

目的　探讨可溶性脑蛋白聚糖 (proteoglycan ,PG)与脑发育的关系。 方法　纯种SD大鼠分为 3组 :初生组、青年组和近老年组。用盐酸胍分别提取各组大鼠的可溶性脑PG ,提取后的脑PG经DEAE sephacel柱层析分离纯化 ,再用Sepharose 4B柱层析分析其分子大小 ,用双向电泳法分析其糖胺多糖 (glycosaminoglycan ,GAG)的组成。 结果　可溶性脑PG的提取量随增龄而降低 ;可溶性脑PG按分子大小分为 4个部分 ,大分子集聚型硫酸软骨素蛋白聚糖(CSPG)的比例随增龄而增高 ,但其中所含透明质酸 (HA)的比例随增龄而显著降低 ;含硫酸皮肤素蛋白聚糖 (DSPG)的小分子部分也随增龄呈下降趋势。结论　可溶性脑PG随动物年龄而发生一定的变化 ,与脑的发育有密切关系