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酵母双杂交技术筛选人PIF1解螺旋酶相互作用蛋白
引用本文:王攀,王建校,李珊珊,刘晓丹,王豫,周平坤,顾永清.酵母双杂交技术筛选人PIF1解螺旋酶相互作用蛋白[J].西安交通大学学报(医学版),2013,34(5):595-598.
作者姓名:王攀  王建校  李珊珊  刘晓丹  王豫  周平坤  顾永清
作者单位:王攀 (军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850;石河子大学医学院,新疆石河子,832003); 王建校 (石河子大学医学院,新疆石河子,832003); 李珊珊 (石河子大学医学院,新疆石河子,832003); 刘晓丹 (军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850); 王豫 (军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850); 周平坤 (军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850); 顾永清 (军事医学科学院放射与辐射医学研究所,北京,100850石河子大学医学院,新疆石河子,832003);
基金项目:国家自然科学基金资助项目(项目编号:30960093,31160183,31270894)
摘    要:目的应用酵母双杂交技术研究筛选与人类PIF1解螺旋酶相互作用的蛋白。方法应用酵母双杂交技术,以人PIF1蛋白PINT功能域(1180氨基酸)和解螺旋酶模序(167180氨基酸)和解螺旋酶模序(167926氨基酸)为诱饵,与HeLa细胞cDNA文库杂交,筛选能与人PIF1蛋白不同功能域相互作用的蛋白。结合生物信息学分析,一对一酵母回复性杂交及β-galactosidase实验等确定阳性克隆。结果 PIF1蛋白PINT功能域杂交共获得17个阳性克隆,生物信息学分析有3个阳性基因,它们分别是CCNDBP1、OTUD5、CAP1。而PIF1蛋白解螺旋酶模序未获得阳性克隆。结论 PIF1蛋白的PINT功能域对调控PIF1的生理功能具有非常重要的作用。

关 键 词:人PIF1解螺旋酶  PINT功能域  酵母双杂交  蛋白质相互作用

Screening interaction proteins of human PIF1helicase by yeast-two-hybridization
Abstract:
Keywords:
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