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重组质粒pEGFP-N1-Twist的构建、表达及其对SKOV3细胞克隆形成能力的影响
作者单位:;1.西安交通大学医学院第二附属医院妇产科;2.西安交通大学医学院第二附属医院神经外科;3.西安交通大学医学院第一附属医院普外科
摘    要:目的构建含有Twist基因的重组质粒pEGFP-N1-Twist,为进一步研究上皮性卵巢癌的发生及转移机制奠定基础。方法生物合成Twist cDNA基因序列,定向克隆至pEGFP-N1表达载体内,将pEGFP-N1-Twist转染入SKOV3细胞系,用Real-time PCR和Western blot检测Twist基因的表达情况;通过克隆形成实验检测pEGFP-N1-Twist对SKOV3细胞的作用。结果 Twist基因的cDNA已克隆到真核细胞表达载体pEGFP-N1中,将pEGFP-N1-Twist转染入SKOV3细胞后,Twist基因/蛋白的表达明显上调,转染组较对照组克隆形成明显增加(P<0.05)。结论成功构建了Twist基因的真核表达载体并能在细胞内稳定表达,Twist基因能增强SKOV3细胞的克隆形成能力。

关 键 词:重组质粒  Twist基因  卵巢癌  真核表达载体pEGFP-N1  基因克隆

Construction of recombinant pEGFP-N1-Twist plasmid and its stable expression in SKOV3 cells
Abstract:
Keywords:
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