| 多房棘球绦虫重组Bb-Em14-3-3疫苗的构建及其表达效率 |
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| 引用本文： | 杨梅,李文桂,朱佑明.多房棘球绦虫重组Bb-Em14-3-3疫苗的构建及其表达效率[J].西安交通大学学报(医学版),2008,29(2):148-152. |
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| 作者姓名： | 杨梅 李文桂 朱佑明 |
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| 作者单位： | 重庆医科大学附属第一医院传染病寄生虫病研究所,重庆,400016 |
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| 摘 要： | 目的构建多房棘球绦虫(Em)重组双歧杆菌(Bb)-Em14-3-3疫苗,并研究Em14-3-3分子在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达效率。方法通过PCR扩增Em14-3-3抗原编码基因;将该基因定向克隆于含有谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因的大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-Em14-3-3;用电穿孔法将该质粒导入Bb,构建多房棘球绦虫重组Bb-Em14-3-3疫苗。经PCR和酶切鉴定后以IPTG诱导表达Em14-3-3/GST融合蛋白;SDS-PAGE及Western blot对表达产物进行鉴定。结果PCR成功扩增出530 bp的Em14-3-3基因;双酶切证实Em14-3-3基因插入pGEX-1λT中;PCR证实重组Bb-Em14-3-3疫苗构建成功;SDS-PAGE及Western blot分析显示重组质粒转化宿主菌在IPTG诱导下高效表达了Em14-3-3/GST融合蛋白,表达效率为23%。结论成功构建了多房棘球绦虫重组Bb-Em14-3-3疫苗,重组质粒pGEX-Em14-3-3在大肠杆菌中获得了高效表达,Western blot结果提示表达出的Em14-3-3重组蛋白具有特异抗原性。
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| 关 键 词： | 多房棘球绦虫 重组Bb-Em14-3-3疫苗 构建 表达 |
| 文章编号： | 1671-8259(2008)02-0148-04 |
| 修稿时间： | 2007年8月23日 |
Construction and expression efficiency of recombinant Bb-Em14-3-3 vaccine of Echinococcus multilocularis |
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| Yang Mei,Li Wengui,Zhu Youming.Construction and expression efficiency of recombinant Bb-Em14-3-3 vaccine of Echinococcus multilocularis[J].Journal of Xi‘an Jiaotong University:Medical Sciences,2008,29(2):148-152. |
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| Authors: | Yang Mei Li Wengui Zhu Youming |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | echinococcus multilocularis recombinant Bb-Em14-3-3 vaccine construction expression |
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