| 含人谷胱苷肽过氧化物酶基因重组腺病毒的构建 |
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| 引用本文： | 宁启兰,许楠,王慧莲.含人谷胱苷肽过氧化物酶基因重组腺病毒的构建[J].西安交通大学学报(医学版),2013,34(1):7-10. |
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| 作者姓名： | 宁启兰 许楠 王慧莲 |
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| 作者单位： | 西安交通大学医学院遗传与分子生物学系,陕西西安,710061 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的构建含人谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)基因的重组腺病毒载体,为基因治疗提供一种新的方法。方法从人血中分离出白细胞,提取总RNA,采用RT-PCR法获得人GPx-1和人GPx-2的全长cDNA,克隆到pcD-NA3.1+中,构建pcDNA3.1+GPx-1和pcDNA3.1+GPx-2载体,酶切和基因测序鉴定阳性克隆;采用酶切法把GPx-1和GPx-2基因克隆至入门载体pENTR1A中,构建pENTR1A-GPx-1和pENTR1A-GPx-2载体。采用LR反应,体外重组pENTR1A-GPx-1或pENTR1A-GPx-2和pAd/CMV/V5-DEST,得重组腺病毒表达载体pAd/CMV/V5-DEST-GPx-1和pAd/CMV/V5-DEST-GPx-2。PCR和序列测定鉴定重组腺病毒载体。293A细胞中包装和扩增GSH-Px-1和GSH-Px-2的重组腺病毒。结果获得GSH-Px-1和GSH-Px-2的重组腺病毒载体和重组腺病毒。结论成功构建了pAd/CMV/V5-DEST-GPx-1和pAd/CMV/V5-DEST-GPx-2重组腺病毒载体,并在293A中获得该重组腺病毒,为进一步研究人GSH-Px基因在基因治疗中的作用奠定了基础。
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| 关 键 词： | 重组腺病毒 谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px) 活性氧 基因治疗 |
Construction of the recombinant adenovirus vectors containing human glutathione peroxidase gene |
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| NING Qi-lan
,
XU Nan
,
WANG Hui-lian.Construction of the recombinant adenovirus vectors containing human glutathione peroxidase gene[J].Journal of Xi‘an Jiaotong University:Medical Sciences,2013,34(1):7-10. |
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| Authors: | NING Qi-lan XU Nan WANG Hui-lian |
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| Institution: | (Department of Genetics and Molecular Biology,Medical School of Xi’an Jiaotong University,Xi’an 710061,China) |
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| Abstract: | |
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