| pcDNA3.1(+)/caveolin-1真核表达质粒的构建及其在MCF-7乳腺癌细胞株中的表达 |
| |
| 引用本文： | 马小斌,康华峰,包兴,代志军,刁岩,闵卫利,王西京.pcDNA3.1(+)/caveolin-1真核表达质粒的构建及其在MCF-7乳腺癌细胞株中的表达[J].西安交通大学学报(医学版),2013,34(1):16-19. |
| |
| 作者姓名： | 马小斌 康华峰 包兴 代志军 刁岩 闵卫利 王西京 |
| |
| 作者单位： | 西安交通大学医学院第二附属医院肿瘤科,陕西西安,710004 |
| |
| 基金项目： | 中央高校基础研究基金项目，陕西省科技攻关项目 |
| |
| 摘 要： | 目的明确正常组织和人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1的表达情况,构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1表达质粒,并鉴定其表达。方法 RT-PCR法检测9种正常人体组织及人乳腺癌细胞株MCF-7中caveolin-1基因的扩增情况;Western blotting法检测MCF-7细胞中caveolin-1蛋白的表达情况。设计克隆引物和表达引物,RT-PCR法扩增caveolin-1基因,用EcoRⅠ+XbaⅠ内切酶消化回收PCR产物和质粒pcDNA3.1(+),连接后构建pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒。挑选pcDNA3.1(+)/caveolin-1转染感受态细菌后的单菌落进行PCR鉴定,阳性菌落培养后提取质粒行酶切鉴定及测序鉴定。瞬时转染MCF-7细胞后Western blotting检测caveolin-1蛋白的表达情况。结果①9种正常组织中均有caveolin-1基因扩增,MCF-7细胞中无caveolin-1基因扩增且无蛋白表达;②pcD-NA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒转染MCF-7细胞后caveolin-1蛋白表达良好。结论成功构建了pcDNA3.1(+)/caveolin-1重组表达质粒,瞬时转染乳腺癌MCF-7细胞后caveolin-1表达稳定。
|
| 关 键 词： | caveolin-1 真核表达质粒 真核细胞转染 乳腺癌细胞株 |
Construction of pcDNA3.1 (+)/caveolin-1 eukaryotic expression plasmid and its expression in MCF-7 breast cancer cell lines |
| |
| MA Xiao-bin
,
KANG Hua feng
,
BAO Xing
,
DAI Zhi-jun
,
DIAO Yan
,
MIN Wei-li
,
WANG Xi-jing.Construction of pcDNA3.1 (+)/caveolin-1 eukaryotic expression plasmid and its expression in MCF-7 breast cancer cell lines[J].Journal of Xi‘an Jiaotong University:Medical Sciences,2013,34(1):16-19. |
| |
| Authors: | MA Xiao-bin KANG Hua feng BAO Xing DAI Zhi-jun DIAO Yan MIN Wei-li WANG Xi-jing |
| |
| Institution: | (Department of Oncology,the Second Affiliated Hospital, Medical School of Xi’an Jiaotong University,Xi’an 710004,China) |
| |
| Abstract: | |
| |
| Keywords: | |
| 本文献已被 CNKI 万方数据 等数据库收录！ |
|
