| 大鼠激活转录因子3单克隆抗体的制备和鉴定 |
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| 引用本文： | 夏梅,任琎,蒋青桃,李妍,唐小军,邱文,赵聃,王迎伟.大鼠激活转录因子3单克隆抗体的制备和鉴定[J].西安交通大学学报(医学版),2011,32(3):379-384. |
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| 作者姓名： | 夏梅 任琎 蒋青桃 李妍 唐小军 邱文 赵聃 王迎伟 |
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| 作者单位： | 南京医科大学微生物与免疫学系,江苏南京,210029 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目，江苏省基础研究计划(自然科学基金)资助项目，江苏省教育厅自然科学基金，南京医科大学校级重点项目，南京医科大学基础医学院新教师基金 |
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| 摘 要： | 目的制备特异性识别大鼠激活转录因子3(ATF3)的单克隆抗体(mAb)。方法根据软件预测的结果合成偶联有匙孔绒血蓝蛋白(key holeli mpet hemocyanin,KLH)的大鼠ATF3第168-181位氨基酸多肽。随后免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗大鼠ATF3的mAb。采用快速定性试纸法鉴定该单克隆抗体的亚型和亚类;通过ELISA、Western blot和免疫组织化学法鉴定单克隆抗体的特性。结果获得一株可稳定分泌抗大鼠ATF3 mAb的杂交瘤细胞,其分泌的ATF3单抗的亚型是IgG1,轻链为κ链。Western blot结果显示,该单抗能够特异性识别大鼠细胞内表达的ATF3蛋白。免疫组织化学检测结果表明,在Thy-1肾炎(Thy-1N)大鼠肾细胞胞质及细胞核内均有ATF3表达,但细胞核内的表达量较为显著。结论成功制备了一株抗大鼠ATF3的mAb,为进一步研究ATF3的生物学功能提供了可用的实验材料。
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| 关 键 词： | 激活转录因子3 单克隆抗体 杂交瘤细胞 Western blot Thy-1肾炎 匙孔绒血蓝蛋白 |
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