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| 甲胎蛋白对人肝癌Bel 7402细胞caspase信号传递及耐受TRAIL的影响 | |
| 引用本文： | 李孟森,詹志农,周升,刘新华,李刚. 甲胎蛋白对人肝癌Bel 7402细胞caspase信号传递及耐受TRAIL的影响[J]. 西安交通大学学报(医学版), 2009, 30(2) |
| 作者姓名： | 李孟森 詹志农 周升 刘新华 李刚 |
| 作者单位： | 1. 海南医学院分子生物学重点实验室,海南海口,571101;北京大学医学部生物化学与分子生物学系,北京,100083 2. 海南医学院检验医学系,海南海口,571101 3. 海南医学院分子生物学重点实验室,海南海口,571101 4. 北京大学医学部生物化学与分子生物学系,北京,100083 |
| 基金项目： | 国家自然科学基金，教育部博士点资金资助项目 |
| 摘 要： | 目的 研究甲胎蛋白(AFP)对人肝癌Bel 7402细胞内caspase信息通路信号传递的影响,以及对肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体(TRAIL)诱导肝癌细胞凋亡的对抗作用.方法 激光共聚焦显微镜观察AFP与caspase-3、caspase-8 在Bel 7402细胞内的共定位;免疫共沉淀(Co-IP)技术研究AFP与caspase-3、caspase-8的相互作用;RNA干扰(RNAi)技术封阻AFP表达,并用Western blotting检测RNAi干扰肝癌Bel 7402细胞内AFP表达的效果;用蛋白酶活性比色法检测AFP对肝癌细胞 caspase-3、caspase-8活性的影响;MTT法分析干扰AFP表达30 h后再给予TRAIL(2nmol/L)处理24 h,Bel 7402细胞的生长情况,并用荧光显微镜观察经TRAIL处理后肝癌细胞的凋亡状况.结果 共聚焦显微镜观察发现AFP、caspase-3、caspase-8主要表达于Bel 7402细胞的细胞质,发现AFP能与 caspase-3共定位于细胞质,但与caspase-8在细胞质的共定位可能性很小;Co IP技术研究发现AFP能与caspase-3结合,但不能与caspase-8结合;2nmol/L 剂量的TRAIL单独处理Bel 7402细胞并不能显著改变caspase-3活性,但能提升caspase-8活性,而用全反式维甲酸(ATRA)40 μmol/L加TRAIL(2nmol/L)处理时,则能提高Bel 7402细胞caspase-3活性;干扰AFP表达后,单独用TRAIL(2nmol/L)也能激活caspase-3,而干扰AFP表达前后对caspasE-8活性没有显著性改变;MTT分析发现, 2nmol/L剂量的TRAIL对Bel 7402细胞的生长并没有显著性抑制作用,但是干扰AFP表达后TRAIL(2nmol/L)能明显抑制Bel 7402细胞生长(抑制率为48.4%);荧光显微镜观察表明,干扰AFP表达后TRAIL(2nmol/L)能诱导Bel 7402细胞凋亡.结论 AFP选择性抑制caspasE-3活性是阻断人肝癌Bel 7402细胞内凋亡信息传递的重要机制,也是AFP抵抗TRAIL诱导肝癌细胞凋亡的关键环节. |
| 关 键 词： | 甲胎蛋白 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 肿瘤耐药 肝癌细胞 caspase信息通路 |
Inhibition of alpha-fetoprotein on caspase mediated signal transduction and its effect on TRAIL resistance of human hepatoma Bel 7402 cells |
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| LI Meng-sen,ZHAN Zhi-nong,ZHOU Sheng,LIU Xin-hua,LI Gang. Inhibition of alpha-fetoprotein on caspase mediated signal transduction and its effect on TRAIL resistance of human hepatoma Bel 7402 cells[J]. Journal of Xi‘an Jiaotong University:Medical Sciences, 2009, 30(2) | |
| Authors: | LI Meng-sen ZHAN Zhi-nong ZHOU Sheng LIU Xin-hua LI Gang |
| Abstract: | |
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