| β-分泌酶底物肽反转录病毒载体及其包装细胞株的构建 |
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| 引用本文： | 崔媛媛,胡海涛,董炜疆,王兰,郑慧媛,赵璇,石明娟,吴志新. β-分泌酶底物肽反转录病毒载体及其包装细胞株的构建[J]. 西安交通大学学报(医学版), 2007, 28(6): 624-626 |
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| 作者姓名： | 崔媛媛 胡海涛 董炜疆 王兰 郑慧媛 赵璇 石明娟 吴志新 |
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| 作者单位： | 1. 西安医学院组织学与胚胎学教研室,陕西,西安,710021
2. 西安交通大学医学院人体解剖与组织胚胎学系,陕西,西安,710061 |
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| 摘 要： | 目的用pLXSN反转录病毒载体构建介导β-分泌酶底物肽(BACEsp)基因表达的pLXSN-BACEsp反转录病毒载体,并建立高效、稳定表达BACEsp的包装细胞株。方法根据BACEsp基因序列设计引物,PCR合成的BAC-Esp片段和pLXSN载体用EcoRⅠ、BamHⅠ双酶切后连接,构建成表达BACEsp的pLXSN-BACEsp反转录病毒载体。用脂质体介导转染PT67包装细胞,经抗性筛选后,挑单克隆扩大培养,用NIH3T3细胞测定病毒滴度,筛选出高效产毒细胞株。结果经酶切、连接后构建成的质粒称为pLXSN-BACEsp,经测序证实构建成功,无任何碱基突变。经脂质体介导转染包装细胞、抗性筛选和测定病毒滴度,筛选出具有高病毒滴度的细胞集落,扩大培养后建立BAC-Esp高效表达的包装细胞株。结论成功构建了能表达BACEsp的pLXSN-BACEsp反转录病毒载体,并建立了稳定、高效地产生有活性的BACEsp产毒包装细胞株。
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| 关 键 词： | 阿尔茨海默病 β-分泌酶底物肽 反转录病毒载体 包装细胞株 转染 |
| 文章编号： | 1617-8259（2007）06-0624-03 |
| 收稿时间： | 2007-05-22 |
| 修稿时间： | 2007-08-26 |
Construction of retrovirus expressing β-scretase substrate-base peptide and its steady packaging cell line mediated by pLXSN retrovirus vector |
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| Cui Yuanyuan,Hu Haitao,Dong Weijiang,Wang Lan,Zheng Huiyuan,Zhao Xuan,Shi Mingjuan,Wu Zhixin. Construction of retrovirus expressing β-scretase substrate-base peptide and its steady packaging cell line mediated by pLXSN retrovirus vector[J]. Journal of Xi‘an Jiaotong University:Medical Sciences, 2007, 28(6): 624-626 |
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| Authors: | Cui Yuanyuan Hu Haitao Dong Weijiang Wang Lan Zheng Huiyuan Zhao Xuan Shi Mingjuan Wu Zhixin |
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