高表达FGFR4细胞株的建立及其生物活性分析 |
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引用本文: | 黄 静,安红丽,张 涛.高表达FGFR4细胞株的建立及其生物活性分析[J].西安交通大学学报(医学版),2014(2):271-275. |
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作者姓名: | 黄 静 安红丽 张 涛 |
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作者单位: | ;1.西安交通大学医学院药物研究所;2.西安交通大学医学院第一附属医院转化医学中心 |
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摘 要: | 目的构建FGFR4高表达细胞,研究FGFR4对细胞增殖能力的影响及相关蛋白活化机制,为研究以FGFR4为靶点的药物提供细胞模型。方法构建FGFR4真核表达载体并转染HEK293细胞,筛选稳定表达FGFR4细胞株,免疫印迹和免疫荧光分析FGFR4表达水平,细胞计数检测FGFR4高表达细胞的增殖情况,流式细胞仪检测FGFR4对细胞周期的影响,同时对ERK1/2磷酸化水平进行免疫印迹分析。结果在相同培养环境下,HEK293-FGFR4细胞同HEK293-pcDNA细胞相比,其增殖能力提高。周期分析表明,FGFR4使G0/G1期降低,促进细胞的增殖。同时,对MAPK信号通路进行了初步分析,发现FGFR4蛋白可以引起ERK1/2的磷酸化,从而导致MAPK/ERK1/2通路的激活,说明FGFR4可激活MAPK信号通路。结论成功构建了FGFR4高表达细胞株,为筛选以FGFR4为靶标的抗肿瘤药物奠定了前期实验基础。
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关 键 词: | 成纤维细胞生长因子受体4(FGFR4) HEK293 高表达 细胞增殖 |
Establishment of FGFR4 over-expression cell line and analysis of its biological activity |
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Abstract: | |
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