| 定向基因传递载体pET15b-Z-VP1的构建 |
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| 引用本文： | 折潇,屈秋民,翟海燕.定向基因传递载体pET15b-Z-VP1的构建[J].西安交通大学学报(医学版),2010,31(3). |
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| 作者姓名： | 折潇 屈秋民 翟海燕 |
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| 作者单位： | 西安交通大学医学院第一附属医院神经内科,陕西西安,710061 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 在JCV VP1氨基末端插入SPA的IgG结合区(Z区),构建原核表达质粒pET15b-Z-VP1.方法 PCR扩增JCV基因组VP1和SPA基因的Z片段;重组PCR连接Z片段和VP1;BamHⅠ和NcoⅠ双酶切将Z-VP1片段插入原核表达质粒pET15b.结果经PCR扩增和琼脂糖凝胶电泳纯化,分别得到VP1和Z片段;再用重组PCR将Z片段和VP1连接成Z-VP1重组基因;双酶切将Z-VP1插入pET15b的BamHⅠ和NcoⅠ两个酶切位点之间,并经酶切鉴定和DNA测序证实.Western blotting证明pET15b-Z-VP1在体外表达重组蛋白VP1-Z.结论成功在VP1氨基末端插入Z区,构建了原核表达质粒pET15b-Z-VP1,并体外表达重组蛋白VP1-Z.
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| 关 键 词： | 基因治疗 定向基因传递 JC病毒 |
Construction of pET15b-Z-VP1 vector for targeting gene delivery |
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