| 霜天蛾cDNA表达文库的构建和初步鉴定 |
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| 引用本文： | 孙秀珍,刘昀.霜天蛾cDNA表达文库的构建和初步鉴定[J].西安交通大学学报(医学版),2005,26(3):244-246,279. |
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| 作者姓名： | 孙秀珍 刘昀 |
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| 作者单位： | 西安交通大学第二医院呼吸内科,陕西西安,710061 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目(No.30271160) |
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| 摘 要： | 目的构建霜天蛾cDNA表达文库,为进一步筛选霜天蛾主要变应原、制备重组变应原奠定基础。方法利用Trizol法抽提霜天蛾RNA,经过Oligo(dT)纤维素柱纯化后得到mRNA,反转录合成dscDNA,连接EcoRⅠ接头,末端磷酸化,XhoⅠ消化,将双末端黏性化的双链dscDNA经过凝胶柱层析,收集大于400bp的cDNA片段,加工后与UniZAPXRVector连接,经过体外包装,感染宿主菌,构建cDNA文库,检测文库容量和重组效率,并采用PCR方法对插入的cDNA片段大小进行分析。结果成功构建了一个含有5×105重组子的霜天蛾表达文库,重组率为67%,平均插入片段长度约为1.49kb。结论所建文库容量及插入片段大小合适,适用于筛选目的cDNA克隆。
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| 关 键 词： | 霜天蛾 cDNA表达文库 鉴定 |
| 文章编号： | 1671-8259(2005)03-0244-03 |
Construction and primary characterization of cDNA expression library of psilgramma menephorn |
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| SUN Xiuzhen,Liu Yun.Construction and primary characterization of cDNA expression library of psilgramma menephorn[J].Journal of Xi‘an Jiaotong University:Medical Sciences,2005,26(3):244-246,279. |
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| Authors: | SUN Xiuzhen Liu Yun |
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| Abstract: | |
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| Keywords: | psilgramma menephorn cDNA expression library characterization |
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