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携带NT4-AcSDKP融合基因重组腺相关病毒载体的构建
引用本文:何娟娟,马列婷,王亚文,惠凌云,杨广笑,王全颖.携带NT4-AcSDKP融合基因重组腺相关病毒载体的构建[J].西安交通大学学报(医学版),2012,33(6):786-789.
作者姓名:何娟娟  马列婷  王亚文  惠凌云  杨广笑  王全颖
作者单位:1. 西安交通大学医学院第一附属医院检验科,陕西西安,710061
2. 西安华广生物工程有限公司,陕西西安,710025
摘    要:目的构建携带NT4-AcSDKP融合基因的重组腺相关病毒,为探讨AcSDKP(乙酰化-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸)的多样化功能提供基础。方法以质粒载体pGEM-T Easy/NT4为模板,PCR技术获得NT4-AcSDKP基因片段,插入腺相关病毒载体穿梭质粒pSSHG-CMV,构建重组质粒pSSCMV-NT4-AcSDKP。用腺病毒全基因组质粒pFG140、辅助质粒pAAV/Ad和已构建的重组质粒,三质粒磷酸钙共沉淀法转染80%融合的293细胞,包装rAAV-NT4-AcSDKP,RT-PCR方法测定重组腺相关病毒滴度。结果成功合成NT4-AcSDKP基因,构建重组质粒pSSCMV-NT4-AcSDKP,包装获得滴度为3.40×1010 copies/mL的重组腺相关病毒。结论成功获得表达AcSDKP重组腺相关病毒,为抗炎、抗纤维化、器官修复等方面的进一步研究奠定了基础。

关 键 词:NT4-AcSDKP  PCR技术  重组腺相关病毒

Construction of NT4-AcSDKP recombinant adeno-associated virus
HE Juan-juan , MA Lie-ting , WANG Ya-wen , HUI Ling-yun , YANG Guang-xiao , WANG Quan-ying.Construction of NT4-AcSDKP recombinant adeno-associated virus[J].Journal of Xi‘an Jiaotong University:Medical Sciences,2012,33(6):786-789.
Authors:HE Juan-juan  MA Lie-ting  WANG Ya-wen  HUI Ling-yun  YANG Guang-xiao  WANG Quan-ying
Institution:1.Department of Clinical Laboratory,the First Affiliated Hospital, Medical School of Xi’an Jiaotong University,Xi’an 710061; 2.Xi’an Huaguang Biological Engineering Co.Ltd.,Xi’ an 710025,China)
Abstract:
Keywords:
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