| 表达HCV core-Ant的重组慢病毒的构建 |
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| 引用本文： | 马列婷,李砚,王亚文.表达HCV core-Ant的重组慢病毒的构建[J].西安交通大学学报(医学版),2009,30(4). |
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| 作者姓名： | 马列婷 李砚 王亚文 |
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| 作者单位： | 西安交通大学医学院第一附属医院检验科,陕西西安,710061 |
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| 基金项目： | 国家自然科学基金资助项目 |
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| 摘 要： | 目的 构建表达HCV 核心区的重组慢病毒,以探讨HCV感染后该病毒核心蛋白对肝脏干细胞转分化的影响.方法 利用PCR体系延伸互为模板的引物,通过T载体克隆法获得HCV core-Ant基因克隆,酶切后连入pLenti6/V5-D-TOPO质粒,得到pLenti6/V5-D-HCV core-Ant,连同pLP/VSVG、pLP1和pLP2四质粒共转染293ET细胞,获得了表达HCV core-Ant重组慢病毒.收集病毒上清,大量扩增,用免疫组化法检测目的 基因在Hela细胞的表达.用类似的方法构建了表达EGFP的重组慢病毒并测定其滴度.结果 克隆出HCV core-Ant基因,经酶切及测序证实结果正确;使用表达HCV core-Ant重组慢病毒感染Hela细胞,免疫组化实验证实胞浆有HCV core表达.使用表达EGFP的重组慢病毒感染3T3细胞见到绿色荧光,说明构建慢病毒载体有效.结论 通过分子克隆体外重组技术成功制备了表达HCV core的重组慢病毒,为进一步研究丙肝病毒致癌机制奠定了基础.
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| 关 键 词： | 丙型肝炎病毒核心蛋白 重组慢病毒 分子克隆 |
Construction of recombinant lentiviral vector expressing HCV core-Ant |
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| MA Lie-ting,LI Yan,WANG Ya-wen.Construction of recombinant lentiviral vector expressing HCV core-Ant[J].Journal of Xi‘an Jiaotong University:Medical Sciences,2009,30(4). |
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| Authors: | MA Lie-ting LI Yan WANG Ya-wen |
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