家兔颈动脉内支架置入后细胞凋亡的动态观察

目的　观察兔颈动脉内支架置入后细胞凋亡的动态变化 ,探讨细胞凋亡在再狭窄形成中的作用。方法　采用末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记法 (TUNEL)及透射电镜 ,检测兔颈动脉内支架置入后 7、1 4、30、90d的细胞凋亡。结果　支架术后 7、1 4d未观察到平滑肌细胞凋亡 ,术后 30d在新生内膜中观察到明显的细胞凋亡 ,90d时单位面积内凋亡细胞数显著高于 30d〔(4 .5 0± 1 .2 9)vs (1 3.5 0± 1 .91 )个 /0 .1mm2 ,P <0 .0 0 1〕。透射电镜下凋亡细胞表现为胞浆浓缩 ,染色质浓缩成团 ,边聚于核膜形成新月体。结论　细胞凋亡是支架置入后再狭窄形成中一个重要的病理学特征 ,在后期明显增多 ,调节着新生内膜中平滑肌细胞的数量。     

不同设计的两代国产铂铱合金支架对兔颈动脉血管反应的影响

目的　评估不同金属丝直径、不同结构设计的国产铂 铱合金支架对血管反应的影响。方法　将家兔分为三组 ,第一组置入直径 0 .1 3mm单丝缠绕成螺旋形结构的第一代支架 (n =5) ,第二组置入直径 0 .1 75mm单丝缠绕成“之”字形结构的第二代支架 (n =5) ,第三组置入第二代明胶蛋白涂层支架 (n =7)。术后 7d行病理形态分析及扫描电镜观察。结果　所有动物均成功置入支架 ,组织病理学检查显示 :一代和二代支架组各有 1例不完全性血栓形成 ;涂层支架组无血栓形成。支架置入血管无明显炎症反应和异物巨细胞聚集。涂层支架组平均新生内膜厚度与新生内膜面积最小 ,而管腔面积最大 (P均 <0 .0 5)。扫描电镜显示支架表面几乎完全内皮化。结论　支架金属丝直径与结构设计的不同对新生内膜增殖及管腔面积有影响 ;明胶蛋白涂层具有良好的组织相容性。     

脂质体介导c-myc反义寡核苷酸对人肝癌裸鼠移植瘤生长的影响

目的　观察脂质体 (LR)介导c myc反义寡核苷酸 (ASODN)对高表达基因c myc的人肝癌细胞SMMC 772 1裸鼠移植瘤生长的影响。方法　人肝癌细胞株SMMC 772 1以 1.5× 10 6 分别接种于裸鼠背部皮下 ,第 14天均生长出瘤结节 [大小为 (4± 1)mm]后 ,分为实验组、空白对照组和错配链寡核苷酸对照组三组。实验组用脂质体包裹的10 μmol·L- 1 浓度ASODN每天一次直接瘤体注射 ,连用 5d ,观察 2 8d。结果　测量裸鼠瘤体外表 ,发现第 5天ASODN组瘤体明显小于对照组 (P <0 .0 5 ) ,瘤质量在第 2 8天后ASODN组明显轻于对照组 (P <0 .0 5 )。组织学HE染色显示瘤体组织在实验组较对照组坏死明显 ,免疫组化结果显示C myc蛋白表达在实验组较对照组降低。 结论　推测应用脂质体包裹ASODN可能对人肝癌细胞SMMC 772 1成瘤的组织细胞生长有一定的抑制作用     

c-myc反义寡核苷酸对肾癌细胞的生长抑制作用及对细胞周期的影响

目的　观察修饰的c myc反义寡核苷酸 (ASODN)对肾癌细胞的生长和细胞周期的影响。 方法　用人工合成的c mycASODN转染于培养的人肾癌细胞 ,观察其对瘤细胞的作用。结果　①MTT法测定发现 ,与正义和错配链相比较 ,c mycASODN有明显抑制肾癌细胞生长的作用 ,12 μmol·L-1c mycASODN组作用 4 8h ,对瘤细胞的生长抑制率为 4 7% ;该生长抑制作用随反义药物剂量的增加而增强 ,同时随作用时间的变化而变化。②流式细胞仪检测证明 ,c mycASODN对肾癌细胞周期的抑制作用在G1期到S期。结论　c mycASODN具有序列特异性和细胞周期特异性地抑制肾癌细胞生长作用     

IS导管血管壁内局部导入c-myc反义寡核苷酸预防PTCA术后再狭窄的实验研究

目的　探讨IS导管局部导入c myc反义寡核苷酸及c myc反义寡核苷酸对血管平滑肌细胞的抑制作用。方法　 2 1只家兔 ,对照组 6只 ,反义寡核苷酸治疗组 15只。用IS导管导入c myc反义寡核苷酸 (1mg)于球囊损伤的髂动脉后 ,动脉血管造影。病理切片 ,图象分析测定新生内膜、中膜、面积和厚度 ,c myc蛋白免疫组化染色。 结果　动脉造影对照组 5 0 %～ 80 %局限狭窄 ,给药组 10 %～ 30 %局限狭窄。光镜观察结果显示 :血管内膜增生面积给药组为 (4.0 4± 1.0 2 )× 10 5μm2 ,对照组为 (7.6 6± 3.7)× 10 5μm ,(P <0 .0 5 ) ;对照组c myc免疫组织化学染色阳性 ,给药组血管c myc免疫组织化学染色显示弱阳性或阴性。结论　IS导管可在体局部导入反义寡核苷酸于动脉损伤靶点 ;c myc反义寡核苷酸可抑制SMCs迁移、增生及新生内膜的形成     

A GROWTH INHIBITOR SECRETED FROM CULTURED RABBIT SMOOTH MUSCLE CELLS IS DISTINCT FROM TGF-β

Smoothmusclecellproliferationiskeyeventinthepathogenesisofatherosclerosis(l).Growthfactorsreleasedbyarterialsmoothmusc1ecel1smainlyareplate1et-derivedgrowthfactor(PDGF)andfibroblastgrowthfactor(FGF)t'i.ArterialsmoothmusclecellsmaystimuIatesmoothmusclecellproliferationviaautocrineandparacrinethegrowthfactors,vasoconstrictorssuchasendothe-lial-l,thromboxane,prostag1adinH,andan-giotensin1.Incontrast,transformationgrowthfactor8(TGF-6),heparin,nitricoxide(No)andprostacyclin(PGI,)releasedbyart…     

Reducing intimal hyperplasia in vein grafts harvested by a no-touch harvesting technique

Objective To investigate the effect of no-tonch harvesting technique in reducing vein graft intimal hyperplasin. A4othods This longitudinal trial compared graft ungiestenosis of two groups undergoing jugular vein to carotid artery interposition grafting in rabbit model. Conventional group: 12 rabbits had their veins stripped, distended, and stored in heparinized saline solution. No-touch group: 12 rabbits had veins removed with surrounding tissues, but were not distended, and stored in heparinized blood. The grafts were removed 4 weeks following grafting, and morphometry and immunohistochemistry assessment were performed. Results The intimal thickness, degree of anginstennsis and proliferation index of vascular smooth muscle cells of no-touch group were significantly reduced (P< 0.01) compared with those of the conventional group. The proliferating cell nuclear antigen pnsitive-staining cells were significantly increased (P<0.01) in the conventional group compared with whose in the no-touch group. Conclusion Harvesting the vein graft with no-touch harvesting technique could significantly reduce intimul hyperpinsin of the vein graft.     

胰岛素抵抗对大鼠血管平滑肌细胞BKCa功能的影响

目的探讨高脂、高糖饮食诱导的大鼠胰岛素抵抗对血管平滑肌细胞大电导钙激活钾通道(BKCa)功能的影响及其机制。方法采用膜片钳技术检测胸主动脉和肠系膜动脉平滑肌细胞BKCa的功能;分别用免疫印记法和实时定量PCR法测定BKCa亚单位(α和β1亚单位)的蛋白和mRNA表达水平。结果与对照组比较,胰岛素抵抗组大鼠胸主动脉和肠系膜动脉平滑肌细胞宏观电流密度均减低,100 nmol/Liberiotoxin使胰岛素抵抗组细胞在+60 mV时的最大电流幅度较对照组显著降低(P<0.01)。β1亚单位蛋白和mRNA表达在胰岛素抵抗组较对照组明显减低(P<0.05)。结论胰岛素抵抗时无论大血管还是微血管BKCa功能的下降与β1亚单位表达下调有关。     

假型逆转录病毒载体高效介导兔平滑肌细胞基因转染

目的 构建假型逆转录病毒载体MuLV/VSV-G,并用于转染兔平滑肌细胞,为兔平滑肌细胞基因转染寻找一种高效的载体.方法 构建含有报道基因lacZ的假型逆转录病毒载体MuLV/VSV-G,测定滴度,并转染兔平滑肌细胞,观察其转导效率.并与MuLV的转导效率进行比较.结果 构建的MuLV/VSV-G载体,病毒滴度为6～7.8×10~6CFU,转染兔平滑肌细胞的效率是(92±12)%.而MuLV的转导效率为(24±5)%.结论 成功构建了假型逆转录病毒载体MuLV/VSV-G载体,该载体作为一种高效的载体可用于兔平滑肌细胞基因转染.     

硒对大鼠骨骼肌线粒体单胺氧化酶活性的影响

本文动态观察了克山病病区低硒粮喂养大鼠骨骼肌线粒体单胺氧化酶(MAO)活性的变化。于饲养后第30d、第60d及第90d分批处死大鼠,取肌肉分离线粒体,用荧光法测定MAO活性。其结果在实验的初期和中期(第30d和第60d)低硒组大鼠与补硒组或常备饲料组之间MAO活性均无显著差异,到第90d才出现显著差异。可能骨骼肌线粒体对低硒的损害敏感性低,耐受力强。     

β-IRRADIATION WITH A LIQUID~(188)Re-FILLED BALLOON PREVENTS NEOINTIMAL PROLIFERATION IN THE CAROTID OF RABBIT

Ｐｅｒｃｕｔａｎｅｏｕｓｔｒａｎｓｌｕｍｉｎａｌｃｏｒｏｎａｒｙａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ(ＰＴＣＡ )ｉｓｏｎｅｏｆｔｈｅｍｏｓｔｃｕｒｒｅｎｔｔｈｅｒａｐｉｅｓｆｏｒｃｏｒｏｎａｒｙａｒｔｅｒｙｄｉｓｅａｓｅ ,ｂｕｔｉｔｒｅｍａｉｎｓｌｉｍｉｔｅｄｂｙａ30 %ｔｏ 6 0 %ｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓｒａｔｅ .Ｉｎｔｒａｖａｓｃｕｌａｒｂｒａｃｈｙｔｈｅｒａｐｙ (ＩＶＢ)ｉｓａｎｅｆｆｅｃｔｉｖｅｍｅｔｈｏｄｔｏｉｎｈｉｂｉｔｃｏｒｏｎａｒｙｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓａｆｔｅｒＰＴＣＡ .Ａｎｅｗｃｏｎｃｅｐｔｏｆｐｒｅ…     

EFFECTS OF ANTISENSE OLIGODEOXYNUCLEOTIDES ON EXPRESSION OF CASPASE-3 IN Γ-RADIATION INDUCED APOPTOTIC HL-60 CELLS

Objective To study the inhibitory effects of caspase-3 mRNA antisense oligodeoxynucleotides (ASODN) on expressions of caspase-3 and it's mRNA in γ-radiation induced apoptotic HL-60 cells, and screen the effective ASODN. Methods ASODN-1 and ASODN-2 targeting 5′-noncoding region and initial translation region of caspase-3 mRNA were respectively designed, synthesized and introduced into HL-60 cells by means of liposome-mediated transfection followed by 10Gy γ-radiation exposures. TUNEL assay was conducted to investigate the morphologic change and apoptotic percentage of HL-60 cells 18 h later. Immunocytochemical staining and one step RT-PCR were respectively performed to detect the expressions of caspase-3 and it's mRNA. Mismatched oligodeoxynucleotide (MODN) transfected and un-transfected HL-60 cells were taken as control. Results TUNEL assay found that the apoptotic percentages in ASODN-1 and ASODN-2 groups were significantly reduced compared with the control groups (P<0.01) when the final concentration of both ASODNs was ≥3μmol/L. Immunocytochemistry showed that caspase-3 positive cell percentages were reduced but the average gray values increased significantly compared with the control groups (P<0.01). RT-PCR showed expressions of caspase-3 mRNA was decreased after ASODN transfection. Furthermore, ASODN-1 proved more effective in inhibiting HL-60 cell apoptosis than ASODN-2 (P<0.01). Conclusion Caspase-3 mRNA ASODNs can prevent HL-60 cells from apoptosis induced by γ-radiation and reduce expression of caspase-3 and its mRNA. These effects are dose dependent in a certain range.     

Ki-Ras反义寡核苷酸对人胃癌细胞及血管内皮细胞的作用

:目的　用Ki Ras的反义寡核苷酸 (ASODN)作用于人胃癌细胞和血管内皮细胞 ,为其抑制胃癌生长及其内血管生成进行前期基础研究。方法　MTT法观察Ki RasASODN对两种细胞增殖的影响 ,电镜下观察细胞的超微结构变化及有无凋亡发生。结果　Ki RasASODN可明显抑制人胃癌细胞和血管内皮细胞的增殖。在一定剂量下还可诱发细胞凋亡。结论　Ki RasP2 1在人胃癌细胞和血管内皮细胞的增殖与凋亡调控中具有重要作用。     

EXPRESSION OF ANDROGEN RECEPTOR IN THE DEVELOPING RAT EPIDIDYMIS AND ITS REGULATION BY ANDROGENS

Epididymis depends upon androgens for itsprenatal and postnatal differentiation,absorptionof testicular fluid,transport of sperm,and secre-tion of proteins thatbring aboutfunctional changesin sperm[1] .Because of the significance of andro-gens in epididymis- mediated sperm maturation,weassessed the localization,developmental patterns,and hormonal control of androgen receptors(AR)in the developing and ethane dimethane sulfonate(EDS) treated SD rat epididymis(caput,corpusand cauda) .The immuno…     

兔髂动脉内膜受损后增生和c-myc基因的表达

研究兔髂动脉内皮剥脱时血管壁细胞的反应特点和 c- myc基因的表达规律。用标准血管成形导管髂动脉球囊损伤 1 2只家兔的右髂总动脉后 ,分别于 3、7、40 d处死动物 ,用透射电镜观察术后 3d平滑肌细胞 ( SMC)超微结构的变化 ,光镜观察术后血管壁细胞的反应特点和 c- myc蛋白表达规律 ,同时对术后 40 d动物行血管造影。结果发现 :术后 3d兔髂总动脉中层 SMC由收缩型转变为分泌型 ,并向内膜下迁移 ,可见管腔内有血栓形成 ,1周时弹力板不完整 ,中膜 SMC排列紊乱 ,术后 40 d增生的 SMC和细胞外基质形成新生内膜 ,血管造影显示管腔狭窄 5 0 %～ 80 % ;球囊损伤段髂总动脉新生内膜 c- myc蛋白免疫组化染色为阳性 ,而对照组为阴性。结论 :球囊损伤髂动脉后可引起 SMC迁移、增生 ,其和细胞外基质一起形成新生内膜 ,管腔狭窄 ;SMC增生和 c- myc基因表达密切相关。     

PROTECTIVE EFFECTS OF CALCIUM ANTAGONIST ON VASCULARSYSTEM AGAINST TOXICITY INDUCED BY MERCURIC CHLORIDE

Asametalelementinnature ,mercuryhastox iceffects .Recentresearchhasshownthatmercuryandmercurycompounds ,iftakenexcessively ,canproducebadeffectsofdifferentdegreesonthebody ,suchastheinfluenceontheanabolismofneurotransmittersaswellasitscombinationwiththereceptor ,andevensignalingamongthenervecells.Studiesonthecardiovasculareffectofmercuryarelimited .Someresearchesdemonstratedthatmercuryaffectheartrateandatrioventricularconduction ,leadingtothedecreaseinheartrateandthelength eningofPR interval …     

青藤碱对家兔血管平滑肌细胞增殖的影响

目的　研究青藤碱对血管平滑肌细胞增殖作用及 DNA合成的影响。方法　采用内皮素刺激的离体家兔血管平滑肌细胞增殖模型 ,细胞计数 ,氚 -胸腺嘧啶核苷掺入方法。结果　青藤碱明显抑制血管平滑肌细胞增殖反应及 DNA合成 ,呈剂量依赖关系。结论　表明青藤碱具有抗血管平滑肌细胞增殖作用     

反义寡核苷酸抑制人恶性黑素瘤A375细胞survivin mRNA及其蛋白的表达

目的研究survivin反义寡核苷酸(ASODN)对人恶性黑素瘤A375细胞survivin mRNA及蛋白表达的影响。方法人工合成survivin ASODN,脂质体介导转染人恶性黑素瘤细胞株A375,采用原位杂交、免疫组化SP法检测survivin mRNA及其蛋白表达的变化。结果转染24 h后,ASODN组A375细胞survivin mRNA表达较对照组显著下调(P<0.01);转染48 h后,与对照组相比,ASODN组细胞的survivin蛋白水平显著下降(P<0.01)。结论Survivin ASODN可下调A375细胞survivin mRNA的表达和survivin蛋白水平。     

姜黄素对沙土鼠脑缺血再灌注后海马CA1区及CA3区Bcl-2、Bax表达的影响及意义

目的探讨姜黄素对沙土鼠脑缺血再灌注后凋亡相关基因Bcl-2、Bax在海马CA1区、CA3区表达的影响及意义。方法制作沙土鼠双侧颈总动脉阻断缺血再灌注损伤模型。随机分为假手术组(SH)、脑缺血再灌注组(IR)、姜黄素组(CU)、对照组(SC),每组据再灌注时间点不同又分为1、3、57、d 4个亚组,每组6只动物。在预定时间点行开阔法行为学检查,TUNEL法检测海马CA1区、CA3区细胞凋亡,免疫组织化学染色测定Bcl-2、Bax蛋白在海马CA1区、CA3区的表达变化。结果姜黄素可显著减少沙土鼠探索活动及海马CA1、CA3区凋亡锥体细胞数量(与IR组相比,P<0.01),诱导Bcl-2蛋白及抑制Bax蛋白表达(与IR组相比,P<0.01)。结论姜黄素有脑保护作用,调控凋亡相关基因Bcl-2、Bax蛋白的表达可能是其作用机制之一。     

机械性脑白质损伤后皮层神经元凋亡的证据及其分布特征

目的　探讨细胞凋亡在机械性脑白质损伤后皮层神经细胞病理变化中的作用及其分布特征。方法　雄性健康SD大鼠 3 6只随机分为假手术组 (1 2只 )和模型组 (2 4只 ) ,用模型组动物制作大脑皮层下横切模型。于致伤后不同时间处死动物 ,用TUNEL原位末端标记和常规病理组织学方法观察损伤区及相应皮层神经细胞变化的性质和规律。结果　致伤后横切处出血 ,损伤组织内神经元出现坏死改变 ,胶质细胞增多。大脑皮层Ⅱ Ⅴ层神经细胞多出现萎缩改变。伤后 1 2d时 ,相应皮层内即出现散在早期凋亡神经元 ,随后逐渐增多 ,7d后又趋减少 ,伤后 1 9d皮层内仍可检出凋亡神经元。在损伤区凋亡神经元少见 ,可见部分胶质细胞凋亡。结论　脑白质损害时 ,损伤相应部位皮层神经元主要表现为凋亡。在损伤区 ,神经元和胶质细胞主要表现为坏死。皮层内凋亡神经元主要分布于第Ⅱ Ⅴ层 ,其时间分布呈一单峰状曲线 ,凋亡峰出现在伤后第 7d前后 ,至少持续 1 9d。