紫杉醇诱导人肺腺癌多药耐药细胞系的建立及DNA polβ、mdrl、mrpl、GST-π、lrp和topo Ⅱ基因的表达

目的体外建立人肺腺癌细胞多药耐药细胞系，观察其生物学特性并探讨其细胞内DNA polβ和多药耐药基因mdrl、mrpl、GST-π、lrp和topo Ⅱ的表达及意义。方法以紫杉醇为诱导药，采用间歇逐步增加剂量法建立人肺腺癌多药耐药细胞系A549／TXL20；MTT法检测A549／TXL20对紫杉醇、顺铂、长春新碱、5-氟尿嘧啶和丝裂霉素的耐药指数（RF）；细胞克隆形成法测定A549／TXL20对紫杉醇的敏感性；高效液相色谱测定细胞内紫杉醇的浓度；RT-PCR法测定人肺腺癌多药耐药细胞系A549／TXL20中DNA polβ、mdrl、GST-π、mrpl、lrp和topoⅡ的基因表达。站杲①A549／TXL20形态不规则，较亲本细胞略小，核／浆比增加，倍增时间没有明显变化；②A549／TXL20对紫杉醇的RF为19．3，对顺铂的RF为67．4，对长春新碱、5-氟尿嘧啶、丝裂霉素和顺铂等抗癌药物有不同程度的耐药性；③A549／TXL20对紫杉醇的敏感性降低，其紫杉醇的含量较亲本细胞下降；④A549／TXL20细胞中 DNA polβ、mdrl、GST-π、mrpl、lrp的基因表达量分别较A549细胞中的表达量明显增加，差异具有统计学意义（P〈0．05）。站论建立了相对稳定的人肺腺癌多药耐药细胞系A549／TXL20，其耐药机制可能与mdrl、GST-π、mrpl、lrp和DNA polβ基因的高表达有关。     

免疫抑制鼠肾包膜下法检测口腔颌面部恶性肿瘤联合化疗敏感性的实验研究

将18例口腔颌面部恶性肿瘤做原代移植物，移植到CTX免疫抑制鼠SRC，检测了联合化疗敏感性，结合病理学观察，结果：①以对照组△TS≥－0．5omu标准，获可评价率88％（16／18）；SRC移植瘤阳性生长81．2％（69／85），零生长7％（6／85），负性生长11．8％（10／85）。②以对照组与实验组△TS（P＜0．05），移植瘤消退率≥15％为标准，68．8％（11／16）可评价药物敏感性，对PM、PVF、CVP敏感率分别为54．5％（6／11）、60％（6／10）、63.6％（7／11）。病理学证实，对照组移植瘤名存良好，实验组移植瘤有不同程度的退行性改变。③Ag－NOR计数和DNA含量测定结果，化疗敏感组与对照组之间存在显著差异。证实CTX免疫抑制既SRCA对口腔颌面部部分恶性肿瘤实现个体化疗是一简便快速方法。     

蒜氨酸、蒜酶及二者联用对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抗菌作用

目的了解蒜氨酸、蒜酶及蒜氨酸+蒜酶对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的体外抗菌活性。方法采用液体稀释法、平板计数法检测蒜氨酸、蒜酶及蒜氨酸+蒜酶对10株临床分离的MRSA体外抗菌活性,并采用菌落法绘制时间-杀伤曲线。结果蒜氨酸和蒜氨酸+蒜酶均对MRSA有抗菌活性,而蒜酶无作用。结论蒜氨酸和蒜氨酸+蒜酶均为对MRSA敏感的抗菌药物,有望用于治疗由MRSA引起的感染性疾病。     

维甲酸、活性D_3和康力龙联合治疗难治性贫血疗效观察

为探讨骨髓增生异常综合征（Myelodysnlasticsvndromes，MDS）难治性贫M（Refractoryanemia，RA）的最佳治疗方法，应用全反式用甲酸、活性维生素Da及康力龙三种药物联合治疗22例RA患者，结果有效率达95．4％，完全缓解率45．5％；表明此三种药物联用有提高疗效作用，值得推广。     

COR、GH与慢性吗啡依赖者IL-2相关性的研究

采用生物学检测法测定不同浓度皮质激素（COR）及生长激素（GH）对慢性吗啡依赖者外周血单个核细胞（PBMC）产生白细胞介素-2（IL－2）水平的影响，同样方法测定它们对正常人PBMC产生IL-2水平的影响作为对照。结果表明：慢性吗啡依赖老PBMC在体外受不同浓度的COR、GH作用，免疫细胞产生IL－2的能力随着COR、GH难度增加而增强，说明激素COR和GH在体外可通过免疫细胞上相应的激素受体对免疫产生调节作用。     

温里健脾外敷药袋对家兔血液流变学的影响

将３０只健康家兔随机分为３组：模型组，以高脂饲料喂养；用药组，以相似高脂饲料喂养，同时神阙穴敷以温里健脾药袋；正常组，以常规饲料喂养。３０ｄ后，用旋转筒式粘度计，体外血栓形成仪及酶法测定以上实验动物血液的高切变率（２００ｓ－１）粘度，低切变率（４０ｓ－１）粘度，体外血栓及血清血脂等血液流变学指标。结果表明，温里健脾药袋能降低血液粘度（Ｐ＜０．０５）；减低体外血栓指数（Ｐ＜０．０１）；降低血清总胆固醇量（Ｐ＜０．０１）．提示温里健脾药袋具有活血化瘀功能。     

扑热息痛多腔体贮库式植入剂的制备及体外释放性能检测

目的以聚乳酸-羟基乙酸共聚物（PLGA）为载体,制备扑热息痛贮库式缓释体系,研究其体外释药性能。方法用微机电技术制备扑热息痛多腔体贮库式植入剂,采用高效液相色谱法检测药物的释放性能。本实验采用C18色谱柱,以甲醇-水（15：85）为流动相,检测波长为215nm,流速为0．8mL／min。结果载体形状不同,体外药物释放速率具有明显差异,外方内六边形扑热息痛植入剂缓释曲线符合Higuchi方程。结论扑热息痛多腔体贮库式植入剂制备工艺可行,载体的腔体形状对体外药物释放速度有较大影响。     

抗微管类、铂类药物对人淋巴瘤细胞系体外敏感性实验及TUBB3、ERCC1表达的相关性分析

目的探讨4种淋巴瘤细胞系(SNK-6、HUT-78、DoHH2、YTS)对8种抗微管类、铂类药物的敏感性与3型β-微管蛋白基因(TUBB3)、切除修复交叉互补基因1(ERCC1)表达水平的关系,为淋巴瘤个体化治疗的靶标检测提供理论依据。方法采用CCK-8实验检测4种细胞系对多西他赛(TXT)、长春瑞滨(NVB)、长春新碱(VCR)、紫杉醇(TAX)以及洛铂(LB)、顺铂(DDP)、奥沙利铂(OXA)、卡铂(CBP)的体外敏感性;采用半定量PCR(RT-PCR)及实时荧光定量PCR(RQ-PCR)检测TUBB3、ERCC1基础表达水平以及长春新碱、卡铂作用后mRNA的表达水平。结果不同细胞系TUBB3、ERCC1基础表达水平存在较大变异。相关性分析表明,4种细胞系对长春新碱的敏感性与TUBB3表达呈正相关(r=0.598,P=0.039),对卡铂的敏感性与ERCC1表达呈负相关(r=-0.789,P=0.002),对其余药物的敏感性与所检基因表达水平无关(P>0.05)。经长春新碱作用后TUBB3表达显著下调(P<0.05),经卡铂作用后ERCC1表达无明显变化(P>0.05)。结论 TUBB3高水平表达的细胞系对长春新碱相对敏感;ERCC1低水平表达的细胞系对卡铂相对敏感。TUBB3、ERCC1的表达可能与淋巴瘤的疗效相关而应用于淋巴瘤个体化治疗的靶标检测。     

大骨节病关节软骨细胞形态及工、Ⅱ、Ⅲ、X型胶原表型和MMP-13表达的体外研究

目的体外培养大骨节病（Kashin-Beckdisease,KBD）患者和正常对照的关节软骨细胞并对比观察细胞形态、I、Ⅱ、Ⅲ和X型胶原表型及基质金属蛋白酶13（MMP-13）的表达变化,以明确KBD软骨细胞的生长特性。方法依据我国“大骨节病临床诊断标准”和病理学变化特征,选择KBD患者为KBD组（n=8）,并设立正常对照组（n=8）。在无菌手术条件下采集关节软骨,胶原酶等消化、分离后进行软骨细胞培养,光镜及透射电子显微镜观察形态,免疫组织化学及流式细胞术观察细胞I、Ⅱ、Ⅲ、X型胶原和MMP-13的体外表达变化,对比研究KBD软骨细胞表型表达的特点。结果KBD软骨细胞内空泡及核变形现象较正常增多,并有绒毛及胶原纤维不规则排列等超微结构变化。两组间I、Ⅱ、Ⅲ、X型胶原表型表达差异显著,其中KBD组II型胶原表型表达显著低于对照组（t=-5．54,P〈O．001）,而MMP-13表达显著增高（t=3．70,P〈O．01）。结论KBD软骨细胞I、Ⅱ、Ⅱ、X型胶原表型和MMP-13的表达不同于正常对照组,以软骨细胞的退行性和增生性变化为著。     

同一膀胱癌的三个亚细胞株和BIU-87膀胱癌细胞株的化疗药物敏感性研究

用未经化疗的同一膀胱癌手术标本建立的三株膀胱癌细胞株 (BL Z2 11、BL S2 11、BL X2 11)和人膀胱移行细胞癌细胞株 BIU- 87进行了氟尿啶啶 (5- Fu)、顺氯氨铂 (CDDP)、和长春新碱 (VCR)的敏感性试验。结果表明 :四株膀胱癌细胞株对这三种化疗药物的敏感性存在差异。当药物浓度分别为其临床用量的计算值时 ,BL Z2 11细胞株对 5- Fu高度敏感 ,与其它三株细胞的敏感性存在显著差异(P <0 .0 5) ;四株细胞对 CDDP均敏感 ;对 VCR四株细胞均耐药。提示 :对化疗敏感性的差异不仅存在于不同的肿瘤病人 ,而且也存在同一肿瘤标本的不同细胞群体中。因此 ,化疗前进行药敏试验 ,实行用药个体化对提高疗效有重要作用。     

人卵巢癌多药耐药细胞系COC_1/DDP的耐药机制探讨

用体外药物连续选择法建立了一株人卵巢癌多药耐药细胞系。发现耐药细胞内谷胱甘肽含量、谷胱甘肽过氧化物酶活性、谷胱甘肽转硫酶活性均增加，从而使细胞内药物失活增加；细胞内药物作用靶减少，拓扑异构酶活性降低；细胞内药物积聚量减少，但未见P-糖蛋白过度表达。提示卵巢癌耐药性的产生与药物失活增加、药物作用靶减少及细胞内药物积聚量减少有关。     

用RP-HPLC法分析地尔硫在兔体内的药动学及组织分布

以尼群地平为内标，用反相高效液相色谱法（ＲＰ－ＨＰＬＣ）测定兔口服地尔硫后血浆和组织器官的药物浓度。药动学符合二房室模型。主要参数∶Ｔ１／２（α）＝０．５１ｈ，Ｔ１／２（β）＝６．１１ｈ，Ｔ１／２（ｋａ）＝０．２５ｈ，Ｔ（ｐ）＝０．５２ｈ，口服２ｈ后在胆汁、血、脾、心、肾、肝、大脑和小脑药物浓度分别为∶０．５５９ｍｇ／Ｌ、０．３７５ｍｇ／Ｌ、４．５６２μｇ／ｇ、０．７７１μｇ／ｇ、１．０９３μｇ／ｇ、１．４３９μｇ／ｇ、０．３５９μｇ／ｇ和０．７４１μｇ／ｇ。     

大型建筑周围路网交通影响度的敏感性分析

按大型建筑的使用功能对其分类．用层次分析法建立了大型建筑对周围路网交通影响度敏感性分析的指标体系，并根据交通工程和系统工程学原理构建了各指标的计算模型．确定了路网交通影响度敏感性分析指标的不确定性因素．建立了路网交通负荷影响度与不确定性因素的关系模型．提出了大型建筑对周围路网交通影响度敏感性分析方法．以重庆南岸体育中心为实例，分析结果表明出席观众数变化率为南岸体育中心周围路网交通影响的主要敏感性因素．     

碳纤维增强水泥压敏效应和温敏效应的解耦

碳纤维增强水泥(CFRC)既具有很好的变形一电阻敏感性(压敏效应)，又具有很好的温度一电阻敏感性(温敏效应)，这两种效应耦合在一起，给精确测试带来很大的困难．文中根据构件各部位的应力应变状况及CFRC的功能特性，有选择地敷设CFRC，采用直流探针压降法测试，成功地实现了压敏性和温敏性两种效应的解耦．     

肝移植术后重症监护病房细菌感染的临床研究

目的分析肝移植术后重症监护病房(ICU)细菌感染的流行病学资料及抗菌药物敏感性,为临床有效预防和控制感染,减少耐药菌株提供依据。方法回顾性分析2000年11月至2004年6月我院肝移植术后ICU患者病原学资料及其对抗菌药物的敏感性。结果肝移植ICU细菌感染率高,病原菌多为多重耐药菌,其中革兰阴性菌(G-菌)占47.2%,革兰阳性菌(G+菌)占33.6%,真菌占19.2%。G-菌中以产酸克雷伯菌、不动杆菌、弗氏柠檬酸杆菌以及大肠埃希氏菌为主,对亚胺培南、左旋氧氟沙星最为敏感;G+菌以葡萄球菌属和肠球菌属为主,尤其是肠球菌属明显增多,对万古霉素、丁胺卡那霉素最为敏感。结论加强肝移植术后ICU的细菌分离及耐药性监测非常重要。依据病原学及抗菌药物敏感性资料合理选择抗菌药物控制感染,有助于减少新的耐药菌株的出现。     

多抗甲素对同种移植物的保护作用

多抗甲素是从甲型链球菌培养物中提取的一种生物反应调节剂（ＢＲＭ），在体外同种混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）中能抑制特异性ＣＴＬ的产生（对照组：ｌ０２±７６溶解单位，实验组：３４±３４溶解单位，Ｐ＝０．００５），而对ＮＫ活性并无显著影响。滴定实验测定，１０ｍｇ／Ｌ时抑制作用尤为明显。同时用ＢＡＬＢ／Ｃ和Ｃ５７Ｂ／Ｌ小鼠间行皮肤移植，结果表明多抗甲素能明显延长移植物存活时间，可望用于临床移植，其作用机理需进一步研究。     

bFGF、bFGFR在血管瘤中的表达及其临床意义

为了解碱性纤维母细胞生长因子（basicfibroblastgrowthfactor，bFGF）及其受体（basicfibroblastgrowthfactorreceptor，bFGFR）与血管瘤的关系，用免疫组织化学方法，对89例血管瘤和30例血管畸形组织切片进行bFGF、bFGFR表达的测定。发现：①bFGF和bFGFR在血管瘤中高表达，血管畸形中低表达或不表达（P＜0．01）。②在血管瘤中bFGF、bFGFR的表达均有随内皮细胞增生程度的加强而增高的趋势（P＜0．01）。bFGF与bFGFR呈正相关性（P＜0．01）。提示bFGF、bFGFR与血管瘤的增生及退化有关。     

急性阑尾炎患者血清CRP测定及临床意义

对106例阑尾炎患者术的血清C反应蛋白（CRP）进行测定，以期找到一种有助于急性阑尾炎诊断的血清学指标，减少临床误诊．临床资料106例患者均为我院手术病例，其中急性阑尾炎82例，病程4～38h．慢性阑尾炎24例，病程12个月以上。男性77例，女性29例；年龄15～68岁．以20N健康人为对照．82例急性阑尾炎以病史、症状、体征及化验检查作出诊断．24例慢性阑尾炎以病史及XM结肠造影诊断．于术前抽取患者静脉血3ml，采用免疫散射比浊法测定血清CRP．结果24例慢性阑尾炎CRP为（9．3±2．4）mg／L．82例急性阑尾炎10例误诊其CRP为（10.3±2.8…     

关于纸片法药物敏感试验的制备改进

<正> 临床细菌室的检验工作,除协助临床找到病原体达到确诊的目的外,其另一方面至药物敏感试验中提示出某一种药物的敏感性给与治疗上提供治疗方案也是重要的一环,再者所购来之药敏纸片售出价较高,而且有些不经常应用之药物纸片亦无出售,本室有时是根据临床的要求选用一些新药,为此完全由本室自制药物敏感纸片已应用十八年之久,本人在多次的制备药物纸片中的点滴体会与改进略述于下:     

紫杉醇诱导人肺腺癌多药耐药细胞系的建立及DNA polβ、mdr1、mrp1、GST-πl、rp和topo Ⅱ基因的表达

目的体外建立人肺腺癌细胞多药耐药细胞系,观察其生物学特性并探讨其细胞内DNA polβ和多药耐药基因mdr1、mrp1、GST-πl、rp和topo Ⅱ的表达及意义。方法以紫杉醇为诱导药,采用间歇逐步增加剂量法建立人肺腺癌多药耐药细胞系A549/TXL20;MTT法检测A549/TXL20对紫杉醇、顺铂、长春新碱、5-氟尿嘧啶和丝裂霉素的耐药指数(RF);细胞克隆形成法测定A549/TXL20对紫杉醇的敏感性;高效液相色谱测定细胞内紫杉醇的浓度;RT-PCR法测定人肺腺癌多药耐药细胞系A549/TXL20中DNA polβ、mdr1、GST-π、mrp1l、rp和topo Ⅱ的基因表达。结果①A549/TXL20形态不规则,较亲本细胞略小,核/浆比增加,倍增时间没有明显变化;②A549/TXL20对紫杉醇的RF为19.3,对顺铂的RF为67.4,对长春新碱、5-氟尿嘧啶、丝裂霉素和顺铂等抗癌药物有不同程度的耐药性;③A549/TXL20对紫杉醇的敏感性降低,其紫杉醇的含量较亲本细胞下降;④A549/TXL20细胞中DNA polβ、mdr1、GST-π、mrp1l、rp的基因表达量分别较A549细胞中的表达量明显增加,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论建立了相对稳定的人肺腺癌多药耐药细胞系A549/TXL20,其耐药机制可能与mdr1、GST-π、mrp1l、rp和DNA polβ基因的高表达有关。