胎肝无细胞悬液对脐血CD34~(+)细胞体外扩增的研究

采用两步法分离出脐血CD34＋细胞，比较研究了胎肝无细胞悬液及IL3＋IL6＋GM－CSF＋EPO两种情况下脐血CD34＋细胞的体外扩增。结果表明胎肝无细胞悬液对粒系-单极系祖细胞（Granulocyte－macrophagecolony－formingunit，CFU－GM），红系暴式集落形成单位（Burst－formingunitoferythroid，BFU－E），多向祖细胞（Mixedcolony-formingunit，CFU－MIX）3种集落的扩增效果明显优于4种造血因子联合组，差异具有统计学意义（P＜0.01）。脐血造血细胞扩增对于成人脐血移植有重要意义。胎肝无细胞悬液的扩增成功表明其可代替多种造血生长因子联合应用，并可作为一种效果优良、价廉的扩增剂。     

成纤维母细胞造血支持作用的研究

比较了成纤维母细胞 ( Fibroblast)在成人外周血、骨髓和脐带血的不同情况及成纤维母细胞的造血支持作用。结果显示 :1氢化可的松明显促进成纤维母细胞的生长。 2成人外周血中无成纤维母细胞集落形成单位 ( Colony forming unit-fibroblast,CFU- F)。 3骨髓中 CFU- F的数量多于脐带血 ( P <0 .0 1 )。 4骨髓和脐带血中的 CFU- F促进粒系 -单核系祖细胞 ( Granulocyte macrophage colony- formingunit,CFU- GM)集落形成 ,两者比较无明显差异。表明成纤维母细胞的存在很可能有助于粒单系祖细胞的分化和成熟。     

恶性血液病患者自体骨髓移植的临床研究

采用VCAD±DE／F－TBI方案预处理，移植经微波高温42℃1h净化的自体骨髓1.6×108MNC／kg，含GM－CFU5.7×104/kg，全环境保护，治疗急性白血病（AL）8例，非何杰金淋巴瘤（NHL）2例。结果：9例植活，3年无病生存率9／10例，无重要并发症及复发，移植半年后恢复工作。     

自体外周血纯化CD34+细胞移植对系统性红斑狼疮患者外周血CD4+CD25+T细胞表达的影响

目的研究自体外周血纯化造血干细胞移植对系统性红斑狼疮(SLE)患者CD4 CD25 T细胞表达的影响。方法15例接受自体外周血纯化造血干细胞移植的SLE患者列入研究,应用流式细胞技术动态监测移植前及移植后3、6、12、24个月的CD4 CD25 T细胞表达水平。结果自体外周血造血干细胞移植治疗前SLE患者外周血的CD4 CD25 T细胞表达明显低下,移植后3个月出现增高,移植6、12、24个月后达正常水平。复发者外周血CD4 CD25 T细胞的表达水平明显低于非复发者,差异有统计学意义(P<0.01)。结论自体外周血纯化CD34 细胞移植可通过促进CD4 CD25 T细胞的表达发挥治疗作用。     

胎盘、脐血和骨髓来源的贴壁细胞的生物学特性的比较

目的探讨人胎盘、脐血和骨髓来源的贴壁细胞的分离培养和生物学特性,为间充质干细胞(MSC)的选择和应用提供依据。方法采用酶消化法分离人胎盘组织,60 g/L羟乙基淀粉和密度梯度离心两步法分离脐血单个核细胞,密度梯度离心法分离骨髓单个核细胞,分别进行贴壁培养,观察不同来源MSC的生长、增殖和表面标志的表达并做比较。结果胎盘来源的贴壁细胞为一种混合性细胞,脐血单个核细胞体外培养可以获得形态不均一的贴壁细胞,二者在生长规律和形态学特征上与骨髓基质相比有一定差异性,CD106、CD44在三种细胞均有表达。结论胎盘和脐血来源的贴壁细胞具备间充质干细胞的基本特征。     

叶酸对白血病细胞周期分布的影响

目的：研究叶酸（ＦＡ）影响白血病细胞增殖和细胞周期分布，以探讨ＦＡ抑制白血病细胞增殖的机理。方法：体外培养白血病细胞株ＨＬ－６０、Ｋ５６２。利用台盼蓝拒染法进行细胞计数，流式细胞术检测细胞周期分布。结果 １０ｎｍｏｌ／Ｌ和３００ｎｍｏｌ／Ｌ的ＦＡ对ＨＬ－６０细胞无显著性抑制。而１００ｎｍｏｌ／Ｌ ＦＡ对ＨＬ－６０细胞作用４８ｈ后出现显著性抑制作用。不同的是，１０ｎｍｏｌ／Ｌ和１００ｎｍｏｌ／Ｌ Ｆ     

VitE和硒对白血病细胞凋亡及c—myc基因表达的影响

目的 研究ＶｉｔＥ和硒对人髓系白血病细胞株ＨＬ－６０细胞凋亡和ｃ－ｍｙｃ基因表达的影响。方法应用体外细胞培养法,ＤＮＡ凝胶电泳技术、Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹杂交技术。结果 ＶｉｔＥ（１００μｍｏｌ／Ｌ）和Ｓｅ（８μｍｏｌ／Ｌ）作用２４ｈ后,ＨＬ－６０细胞出现细胞凋亡现象。ＶｉｔＥ（１００μｍｏｌ／Ｌ）可以抑制ｃ－ｍｙｃ基因的表达,作用有显著性（Ｐ＜０．０５）。Ｓｅ（８μｍｏｌ／Ｌ）无此作用。结论 抑制     

免疫抑制鼠肾包膜下法检测口腔颌面部恶性肿瘤联合化疗敏感性的实验研究

将18例口腔颌面部恶性肿瘤做原代移植物，移植到CTX免疫抑制鼠SRC，检测了联合化疗敏感性，结合病理学观察，结果：①以对照组△TS≥－0．5omu标准，获可评价率88％（16／18）；SRC移植瘤阳性生长81．2％（69／85），零生长7％（6／85），负性生长11．8％（10／85）。②以对照组与实验组△TS（P＜0．05），移植瘤消退率≥15％为标准，68．8％（11／16）可评价药物敏感性，对PM、PVF、CVP敏感率分别为54．5％（6／11）、60％（6／10）、63.6％（7／11）。病理学证实，对照组移植瘤名存良好，实验组移植瘤有不同程度的退行性改变。③Ag－NOR计数和DNA含量测定结果，化疗敏感组与对照组之间存在显著差异。证实CTX免疫抑制既SRCA对口腔颌面部部分恶性肿瘤实现个体化疗是一简便快速方法。     

慢性肾功能衰竭患者血清对红系祖细胞的抑制及红细胞生成刺激素的疗效

本文探讨了慢性肾功能衰竭患者自身血清对骨髓红系祖细胞的抑制作用及红细胞生成刺激素(erythropoietin EPO)的临床疗效。自身血清加入培养体系与胎牛血清加入组比较,半数病例集落数减少,自身血清用活性炭吸附后,这种造血抑制作用被解除。EPO治疗后的血色素增加程度和自身血清的造血抑制活性呈相关性,可见,如果能设法有效地去除患者体液中的造血抑制因子,EPO的临床疗效就能进一步提高。     

多发性骨髓瘤患者IL-1水平与溶骨损害的相关性

广泛性溶骨损害是多发性骨髓瘤（MultiPleMy6loma，MM）的主要临床病理特征之一，Mundy认为MM港骨程度增强与破骨细胞活性升高有关，而IL－1是一种重要的破骨细胞活化因子（Osteoclastactivatingfactor，OAF），本文检测MM患者外周血单核细胞（PeriPheralbloodmononuclearcells，PBMC）及骨髓细胞培养上清IL－1水平，并分析其与MM溶骨损害的相关关系。材料与方法研究对象：MM患者38例，诊断接文献标准，年龄38～72岁，男24例，女14例。其中10例骨髓标本均取自三期MM患者。以健康献血员20例为正常对照，年龄20～74岁，男15例，女…     

虾青素预处理对体外氧化应激诱导内皮祖细胞凋亡的保护作用

目的探讨虾青素对体外氧化应激诱导的人外周血内皮祖细胞凋亡的影响及机制。方法体外培养人外周血单核细胞源的内皮祖细胞,分为正常对照组、模型组(叔丁基过氧化氢100μmol/L)、虾青素+叔丁基过氧化氢(虾青素0.1、1、10nmol/L预处理24h后,再加终浓度为100μmol/L的叔丁基过氧化氢溶液继续培养6h)组。MTT法检测细胞存活率;DAPI染细胞检测细胞凋亡率;DCFH-DA法检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平;比色法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase-3)活性;JC-1法测定线粒体膜电位。结果与正常对照组比较,叔丁基过氧化氢(100μmol/L)能明显造成内皮祖细胞凋亡(P<0.05)。虾青素可降低叔丁基过氧化氢引起的内皮祖细胞凋亡,表现为细胞凋亡率减少(P<0.05),线粒体膜电位增加,Caspase3表达减弱。结论虾青素对叔丁基过氧化氢诱导的内皮祖细胞凋亡具有保护作用,其机制可能与保护线粒体功能有关。     

多抗甲素对同种移植物的保护作用

多抗甲素是从甲型链球菌培养物中提取的一种生物反应调节剂（ＢＲＭ），在体外同种混合淋巴细胞反应（ＭＬＲ）中能抑制特异性ＣＴＬ的产生（对照组：ｌ０２±７６溶解单位，实验组：３４±３４溶解单位，Ｐ＝０．００５），而对ＮＫ活性并无显著影响。滴定实验测定，１０ｍｇ／Ｌ时抑制作用尤为明显。同时用ＢＡＬＢ／Ｃ和Ｃ５７Ｂ／Ｌ小鼠间行皮肤移植，结果表明多抗甲素能明显延长移植物存活时间，可望用于临床移植，其作用机理需进一步研究。     

单纯疱疹病毒胸苷激酶基因表达对人肝癌细胞的生长抑制

使用转导有单纯疱疹Ⅰ型病毒胸苷激酶（ＨＳＶ１－ＴＫ）基因的人肝癌ＳＭＭＣ－７７２１细胞株建立了裸鼠移植瘤模型，并进行了在体和体外试验性无环鸟苷（ＡＣＶ）治疗。结果发现基因转导后的肝癌细胞表现出对ＡＣＶ的敏感性，肝癌细胞生长抑制与ＡＣＶ的剂量有关；用药组裸鼠除平均瘤重明显低于对照组外，还可见细胞核分裂指数降低，伴有细胞变性和坏死。结果表明：ＨＳＶ１－ＴＫ基因经逆转录病毒转导后，用ＡＣＶ诱导表达明显抑制了人肝癌细胞的生长。     

不同人细胞系细胞周期中的P_(53)表达

P53是维持细胞遗传稳定性，监控细胞周期正常进行的最重要蛋白分子。已经公认，P53参予细胞周期G1／SCheckpoint，诱导DNA损伤细胞周期阻留，促进DNA损伤修复，促使细胞分化或诱导DNA损伤细胞凋亡。最近研究证实，细胞周期中还存在多个Checkpoint，如G2／M、S、M和S／MCheckpoint，而且功能研究表明，P53是G2／MCheckpoint的最重要参予者，然而P53在细胞周期各时相的表达却未见深入研究。最近，我们选用人肿瘤细胞系细胞进行体外培养，经不同条件诱导细胞凋亡（42℃1h），或处于对数生长期（37℃常规培养），或延缓生长（4℃6h）…     

DIG－DNA探针检测宫颈癌组织中HPV－16的E_7转化基因

应用地高辛配基（Ｄｉｇ－１１－ｄＵＴＰ）标记人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ－１６）Ｅ７转化基因作探针，分别检测了宫颈癌活检组织、宫颈炎及正常宫颈脱落细胞ＤＮＡ。其检出率为：宫颈癌中４２．１％（２４／５７）、宫颈炎中２．５％（１／３９）、正常宫颈中５．５％（１／１８）。宫颈组织中ＨＰＶ－１６Ｅ７转化基因的检出率较高，提示该转化基因与宫颈癌的发生可能密切相关。本研究也证实ＤＩＧ配基标记的Ｅ７基因探针具有特异、敏感、安全、稳定和能反复使用的优点，适合基层使用。     

β—胡萝卜素诱导白血病细胞凋亡

目的 从细胞凋亡角度探讨β－胡萝卜素抑制白血病细胞增殖的机制。方法 体外培养白血病细胞ＨＬ６０、Ｋ５６２细胞，培养时添加１０μｍｏｌ／Ｌ，５０μｍｏｌ／Ｌ、１００μｍｏｌ／Ｌ β－胡萝卜素作用２４ｈ，４８ｈ，７２ｈ后，用台盼蓝拒染法进行活细胞计数，绘制细胞生长曲线；同时利用ＤＮＡ凝胶电泳检测白血病细胞凋亡。结果 细胞生长曲线显示，１０￣１００μｍｏｌ／Ｌ的β－胡萝卜素均对白血病细胞ＨＬ－６０，Ｋ５     

粒-巨噬细胞集落刺激因子对大鼠血钙及甲状腺C细胞数的影响

甲状腺C细胞位于甲状腺滤泡旁或滤泡细胞间，其主要的生理作用是分泌降钙素（calcitonin，CT）。有报道粒一巨噬细胞集落刺激因子（granulocyte macrophage-colony stimulating factor，GM—CSF）与核因子调节降钙素受体的表达和功能。但是GM—CSF与血钙浓度及甲状腺c细胞之间的关系尚不清楚，也未见相关报道。我们采用GM—CSF刺激大鼠，然后用全自动生化分析仪检测血钙浓度并用免疫组化的方法观察C细胞数量及形态，旨在探讨GM—CSF与C细胞的关系。     

放射损伤对小鼠骨髓间充质干细胞成骨潜能及造血干细胞龛位的影响

目的 观察放射对小鼠骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells, BMMSCs)体外成骨潜能及体内骨髓造血干细胞(hematologic stem cells, HSCs)龛位的影响.方法 分离、培养正常及接受4 Gy放射后不同时间点小鼠BMMSCs,用碱性磷酸酶(alkaline phosphatase, ALP)染色法和实时定量RT-PCR检测成骨分化相关基因,鉴定BMMSCs体外成骨分化潜能的改变,并通过骨组织形态学和免疫组织化学的方法检测放射后小鼠体内成骨细胞及纺锤形的、表达神经钙黏附分子的成骨细胞(spindle-shaped N-cadherin-expressing osteoblasts, SNOs)数量的变化.结果 全身照射(total body irradiation, TBI)后早期小鼠BMMSCs的成骨潜能增强,但随后迅速降低;TBI后28 d小鼠骨髓中成骨细胞和SNOs的数量均显著减少.结论 4Gy放射损伤后远期小鼠BMMSCs的成骨潜能显著降低,体内HSCs龛位也明显缩小.     

温里健脾外敷药袋对家兔血液流变学的影响

将３０只健康家兔随机分为３组：模型组，以高脂饲料喂养；用药组，以相似高脂饲料喂养，同时神阙穴敷以温里健脾药袋；正常组，以常规饲料喂养。３０ｄ后，用旋转筒式粘度计，体外血栓形成仪及酶法测定以上实验动物血液的高切变率（２００ｓ－１）粘度，低切变率（４０ｓ－１）粘度，体外血栓及血清血脂等血液流变学指标。结果表明，温里健脾药袋能降低血液粘度（Ｐ＜０．０５）；减低体外血栓指数（Ｐ＜０．０１）；降低血清总胆固醇量（Ｐ＜０．０１）．提示温里健脾药袋具有活血化瘀功能。     

绞股蓝总皂甙与阿霉素、5－氟尿嘧啶联用的抑瘤效果

用患有进展期Ｓ１８０肉瘤的小鼠进行的重复实验证实，绞股蓝总皂甙（ＧＰ）对Ｓ１８０肉瘤有明显的抑制作用，使肿瘤生长延缓，肿瘤坏死比率（肿瘤坏死面积ＴＮＡ／肿瘤总面积ＴＴＡ×１００％）显著增加，瘤周瘤内淋巴细胞、巨噬细胞浸润明显增多，荷瘤鼠脾重明显增加，脾白髓动脉周围淋巴鞘显著增大。阿霉素（ＡＤＭ）或５－氟尿嘧啶（５－Ｆｕ）与ＧＰ联用后，上述各指标均明显优于其分别单用，且ＧＰ能明显减轻阿霉素、５－氟尿嘧啶对骨髓的抑制作用。