丹皮药材指纹图谱定性和有效成分定量分析方法研究

目的　建立丹皮药材的反相高效液相色谱定性和定量分析方法。方法　RP HPLCPlanetsilC18分析柱 (15 0mm× 4 .6mm ,5 μm) ,流动相为甲醇 水 冰醋酸 (44∶5 6∶0 .1) ,流速为 1.0mL·min-1,检测波长为 2 4 0nm ,柱温为室温 ,对丹皮药材进行指纹图谱定性分析 ,并对丹皮中的有效成分丹皮酚进行定量测定。结果　在此色谱条件下 ,13份不同丹皮药材的RP HPLC指纹图谱中可检出 11个相对位置稳定的色谱峰 ,通过色谱峰间峰面积的相关性分析 ,可以确定 10个峰可作为定性鉴别的指标峰 ;丹皮药材中丹皮酚含量为 1.32 %～ 2 .78%。结论　丹皮RP HPLC指纹图谱定性和有效成分定量分析方法具有较好的针对性和准确性 ,可用于丹皮药材的质量控制。     

乌药挥发油的血清药物化学及对兔在体肠运动的影响

目的 对乌药挥发油的血清药物化学进行研究,并观察乌药挥发油对兔肠道运动的影响.方法 建立HPLC色谱分析方法;分析乌药挥发油给药前后血浆样品与其体外乌药挥发油的成分变化,鉴定血中移行成分.按在体肠实验操作,观察灌胃给予乌药挥发油时,兔肠肌收缩频率及幅度的变化.结果 体外乌药挥发油在11.6 min处有峰,给乌药挥发油后30 min、1h、1.5h、2h、4h、6h的血浆与空白血浆相比,在11.6 min和46.5 min有新成分被测出.给乌药挥发油前后兔肠运动的频率和振幅差异无统计学意义(P＞0.05),但呈下降趋势.结论 乌药挥发油有成分吸收入血,并对兔在体肠的运动有抑制趋势.     

黄芩甙和芸香甙对·OH的清除作用

用荧光法研究了黄芩甙、芸香甙、苦杏仁甙、丹皮酚和百里香酚对Fenton反应生成的·OH的清除作用。结果表明，以上化合物的清除作用均强于·OH特异性清除剂甘露醇（EC50=6．7mmol／L），以黄芩甙、芸香甙的清除作用特别显著，其EC50分别为0．039mmol／L和0．069mmol／L，根据清除剂对荧光的抑制，推导了清除剂与·OH反应的速率常数。     

经尿道切除综合征的实验研究

本文通过经尿道切除综合征(TURS)的实验研究发现:①冲洗液吸收完时,血钠下降最为明显,而它的恢复与血浆甘露醇的消除在时相上并不一致。低钠的影响大且持续的时间长。②冲洗液吸收后,血钾逐渐升高。高钾血症是实验动物死亡的主要原因之一。③等渗的甘露醇冲洗液吸收,血浆渗透压不发生改变。④死亡兔肺重量明显增加,呈肺水肿表现。无脑水肿存在。④根据动物实验推算,经尿道前列腺切除的患者,术中短时间內吸收38ml/kg以上的冲洗液,有发生TURS的可能。上述结果对TURS病理生理改变的认识及其防治提供了实验依据。     

大青叶淫羊藿中微量锰在兔血中药代动力学的研究

以催化动力学分析法为监测手段,利用二价锰离子对高碘酸钾——罗丹明B反应体系的催化作用,使用邻菲罗啉为活化剂,对兔血中微量锰进行了荧光测定,绘制了药时曲线,结果经微机处理,得到系列药代动力学参数。     

分光光度法测定废水中对硝基酚的含量

本文运用分光光度法的原理，利用722分光光度计测定对硝基酚生产中排放的酸性或碱性废水中残留的对硝基酚(钠)的含量；测定过程中首先探索了最大吸收波长、溶液最佳pH值、显色时间、显色温度等条件。然后将相应的试验测试条件运用于含对硝基酚(钠)的废水检测中，试验结果的相关性很好。     

四(N-咪唑甲基)二酚化合物的合成

以联苯二酚、二酚A为原料，经羟甲基化和咪唑甲基化二步反应法合成四(N-咪唑甲基)二酚化合物．运用咪唑甲基化反应，0.02mol化合物(2α，2b)与0．120mol咪唑在5mL的DMF中搅拌反应，温度控制在130～140℃，反应进行3～4h，再升温至160～170℃，反应1h，合成四(N-咪唑甲基)二酚化合物(3α，3b)，产率3α为57％，3b为59．3％．所得的目标化合物被MS，^1HNMR，IR和元素分析证实．     

仿生骨植入钛网管固定修复兔骨缺损

目的探讨MHA-bBMP仿生骨作为替代骨对有限接触式钛网管固定下兔股骨干缺损模型的修复作用。方法48只新西兰大白兔随机分组,实验组:MHA-bBMP仿生骨+钛网管;对照组:自体髂骨移植+钛网管。于股骨干中段截除10 mm,建立兔股骨干缺损模型,将MHA-bBMP仿生骨/自体髂骨植入骨缺损处加有限接触式钛网管固定修复骨缺损。观察兔一般情况,检测血碱性磷酸酶,进行X线片、病理组织、电镜等观察。结果钛网管组织相容性好,固定稳定有效,两组均修复了骨缺损。两组血碱性磷酸酶、X线片表现、病理组织、电镜检查的数据经统计分析无显著性差异。结论有限接触式钛网管对植入物和骨缺损断端起到可靠的固定作用;MHA-bBMP仿生骨与自体髂骨植入相比较,诱导成骨活性相当。     

钙拮抗剂尼群地平的反相高效液相色谱分析及其在家兔体内的分布

对兔血浆及组织器官中钙拮抗剂尼群地平的分析方法进行了研究，建立了反相高效液相色谱（RP-HPLC）的内标测定法。样品在弱碱性条件下经环已烷-异丙醇（96．5：3．5）提取，用YWGC18反相柱，以地尔硫作内标，甲醇：50mmol／L磷酸盐缓冲液（70：30）pH6．8为流动相，UV236nm检测。方法最低检测限约为10ng，血药浓度在21．6～216μg／L之间，尼群地平的量与其峰面积比值之间，线性关系良好，回归方程为Y＝0．00672X－0．013，r＝0．9958。方法回收率95．4％～98．1％，RSD＜4．63％。　用该分析方法测定了家兔口服尼群地平2h后在主要脏器体液中的分布。     

葡萄糖酸铜和硫酸铜的药物动力学研究

本文用原子吸收分光光度法测定口服葡萄糖酸铜(copper gluconate)和硫酸铜(copper sulphate)在兔体内的血清铜浓度,用“实用药代动力学计算程序3P87”在IBM-TC/XT计算机上计算了它们的药代动力学参数。实验结果表明:葡萄糖酸铜具有口服吸收快,维持时间长,峰浓度高的特点。它是一种优于硫酸铜的良好补铜剂。     

肺癌肺动脉供血的DSA研究

肺癌的血供主要来源于支气管动脉已无可争议，但肺动脉是否参与血供则很少报道。有人认为肺动脉不参与肺癌的供血，肺癌的介入治疗只经支气管动脉进行。为了进一步确定肺动脉是否参与肺癌的供血，自1996年6月至1997年10月我们对35例肺癌患者在经支气管动脉介人治疗前均行肺动脉造影，现将方法及结果报告如下。材料与方法本组35例，男28例，女17例，年龄35～78岁，平均年龄58岁。原发性肺癌31例，转移性肺癌4例；原发性肺癌中鳞癌19例，小细胞未分化癌7例，腺癌5例。中心型肺癌24例，周围型肺癌7例。所有病例均经股静脉和股动脉穿刺并留置血…     

五氯硫酚的毒性研究

为安全性评价提供毒理学资料对五氯硫酚用不同种属动物进行了多项毒性试验。结果表明，其经口ＬＤ５０雄性大鼠为９０９０ｍｇ／ｋｇ，而对小鼠大于１０ｇ／ｋｇ，属低毒物质。其蓄积系数大于５，故对小鼠无明显蓄积毒性。对家兔皮肤粘膜刺激作用轻微，但对豚鼠具轻度皮肤致敏作用。Ａｍｅｓ试验及微核试验中未显示诱变性。９０ｄ喂养试验中，中、低剂量组在血象、尿检、生化、病理及生长发育各观察指标未见异常改变，而高剂量组雄性大鼠的总进食量与体重增长明显低于对照，提示亚慢性毒作用阈剂量为９０９ｍｇ／ｋｇ。本研究未证实五氯硫酚具有卟啉原性作用。     

基于液体芯片-飞行时间质谱分析的肺结核患者血清差异表达蛋白

目的应用液体芯片-飞行时间质谱技术分析肺结核患者和正常对照人群的血清蛋白多肽图谱,找出组间具有统计学意义的差异表达蛋白多肽,从而筛选出肺结核的标志蛋白多肽峰图(m/z)。方法应用2种液体蛋白芯片技术(MB-WCX和MB-IMAC-CU)结合飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)对14例病理确诊的肺结核患者和32例正常对照人群进行血清蛋白多肽图谱分析;采用ClinProTools软件分析肺结核患者和正常对照组的组间差异表达蛋白。结果 MB-WCX型液体蛋白芯片处理后共获得74个蛋白多肽峰图,其中42个蛋白多肽峰图呈组间极显著差异(P<0.001)表达。MB-IMAC-CU型液体蛋白芯片处理后共获得68个蛋白多肽峰图,有11个蛋白多肽呈组间极显著差异(P<0.001)表达,且其中的8个峰图与MB-WCX型液体芯片检出的组间极显著差异峰图完全相同。经MB-WCX处理所获的42个差异蛋白多肽峰图中有17个蛋白多肽在肺结核患者组中表达上调,其余25个蛋白多肽在肺结核患者组中表达下调。结论利用液体芯片-飞行时间质谱技术可以从肺结核患者的血清中获得稳定丰富的蛋白多肽图谱,并且能够筛选出潜在的疾病标志物。     

单相动作电位同步记录电极的建立和应用

目的　设计跨心室壁三层单相动作电位(MAP)同步记录电极,为跨心室壁复极异质性的在体研究提供有效途径。方法　以改造的 12 号不锈钢针头为外鞘,按先后顺序将彼此绝缘的外、中、内膜电极依次与外鞘组装,经过绝缘性、电导通性检测后,分别在体记录了兔、犬跨左心室壁内、中、外膜心肌的单相动作电位和心电图。结果　①兔左心室前壁内、中、外三层单相动作电位形态各不相同,中、外膜层 MAP复极起始部分具有典型的“峰和圆顶”特征,内膜层MAP复极过程中不存在明显切迹;在心率为272 次/min时,兔左心室内、中、外层心肌动作电位时程分别为 140、140、130 ms;动作电位幅度分别为17.5、19.31、11.51 mV。②犬中、外膜层心肌复极起始部分具有“峰和圆顶”特征,中膜层心肌1期切迹不如外膜层典型,内膜层心肌复极1期仅有小的切迹;心率为 139 次/min时,犬内、中、外层心肌动作电位时程分别为230、250、200 ms;动作电位幅度分别为46.33、66.41、43.30 mV。结论　自制单相动作电位能清晰、有效的记录在体动物跨心室壁各层的动作电位,可用于跨心室壁复极异质性的在体实验研究。     

北豆根中粉防己碱的药物代谢动力学研究

粉防己碱是北豆根所含主要有效成分之一，为了解药动学和药效学的关系，本文选择灵敏度高，选择性强的胶束荧光法，研究了粉防己碱在兔体内的药代动力学。实验结果表明，粉防己碱是一种中速吸收，中速消除的药物，其几个主要药动学参数为ｔ１／２（α）为１．４ｈ，ｔ１／２（β）为５．１８７ｈ、ｔ１／２（Ｋａ）为１．３１４ｈ、Ｋ２１为０．４３１２ｈ－１、Ｋ１０为０．１５３４ｈ－１、Ｋ１２为０．０４４ｈ－１、ＡＵＣ为１０５．７μｇ·ｈ·ｍｌ－１。     

兔眼环孢霉素A缓释微球的眼内释药性研究

目的建立兔眼房水中环孢霉素A缓释微球的高效液相测定方法,考察在不同给药剂量下兔眼房水中的药物代谢特性,为该药预防后发性白内障提供理论依据。方法兔眼行晶体囊外摘除,左眼前房及囊袋内注射环孢素微球,右眼给予空白微球作对照,采用高效液相色谱法监测给药后4周内兔眼房水中环孢霉素A的浓度。色谱柱为反相C18硅胶柱,柱温为60℃,流动相为乙腈-水(67∶33),检测波长210nm。结果兔眼房水中环孢霉素A的浓度在0.13-1.25mg/L范围内呈良好线性关系(r=0.9951),最低检测浓度0.13mg/L,回收率95.91%,日间和日内精密度均小于5.0%。缓释微球的释药速率适中,兔眼前房给药后可在2周内维持较高浓度,高低两种给药剂量下,环孢霉素A的吸收半衰期(t1/2Ka)和血浆清除速率(CL)经检验无统计学差异,药时曲线下面积(AUC)和峰浓度(Cmax)与剂量之间线性相关。结论环孢素A缓释微球在兔眼内有较高的生物利用度,实验期内可达到抑制后发性白内障的有效浓度。     

城市轨道交通峰前折扣定价方案编制模型

构建面向高峰拥挤缓解的峰前折扣定价方案编制模型，为定价方案编制提供决策方法. 基于票价变动对高峰客流的影响分析，考虑运营企业可承担的收益损失，建立以运力运量匹配度最大化为目标的峰前折扣定价方案编制模型，科学确定折扣车站、折扣比例及折扣时段. 对北京地铁八通线进行实证研究，结果表明：相比实际方案，优化方案中折扣截止时间较晚，认为限制当前政策效果的关键在于折扣截止时间设置不合理；在不增加收益损失的前提下，可通过定价方案优化提高客流拥挤疏解效果.     

人唾液蛋白的高效疏水色谱分离纯化

目的　探讨高效疏水色谱分离、纯化人全唾液蛋白、腮腺液蛋白及颌 /舌下腺液蛋白的最佳分离条件和临床意义。方法　将收集的唾液样品经低温离心 ,过滤 ,冻干 ,低温保存备用。以不同浓度的 (NH4 ) 2 SO4 、KH2 PO4 溶液分别为A、B流动相 ,梯度分离 ,收集各个组分峰 ,通过生化方法对蛋白进行定性。结果　全唾液蛋白被分离为 12个峰组分 ,腮腺液被分离为 6个峰组分 ,颌 /舌下腺液被分为 8个峰组分。经统计学处理 ,平均出峰时间标准差小 ,个体间重复性好。目前能初步定性的唾液蛋白为富含脯氨酸蛋白、半胱氨酸蛋白、富酪蛋白和富组蛋白及α 淀粉酶。结论　疏水色谱可用于人全唾液蛋白、腮腺液蛋白及颌 /舌下腺液蛋白的分离     

HPLC法测定兔眼角膜中毛果芸香碱的含量

毛果芸香碱又名匹罗卡品（Pilocarpine），是从芸香科植物毛果芸香叶中提取的毒蕈碱型拟胆碱药[1]。毛果芸香碱滴入眼内使瞳孔缩小，前房角间隙扩大，房水引流通畅，降低眼压，特别适用于原发性闭角型青光眼[2]。为了研究毛果芸香碱眼用制剂在眼组织中滞留量及时间与药效的关系，笔者建立了HPLC法测定兔角膜中毛果芸香碱的含量[3~5]，测定了4g／L毛果芸香碱溶液、乳浊液在兔角膜中的滞留量。材料与方法1仪器WISP710B高效液相色谱仪，HP－3392A积分记录仪（美国）；ShimadzuSPD－10AUV检测仪（日本）。2药品盐酸毛果会香碱（Allerga…     

微囊化软骨细胞诱导间充质干细胞定向分化治疗兔椎间盘退变的实验研究

目的探讨经微囊化软骨细胞诱导分化的间充质干细胞对兔椎间盘退变的治疗效果。方法将微囊化软骨细胞与间充质干细胞进行共培养,干细胞诱导分化。观察分化后干细胞的免疫学特征、增殖曲线、蛋白多糖及Ⅱ型胶原蛋白合成能力。建立兔椎间盘退变模型,并观察分化后的间充质干细胞对兔椎间盘退变的修复能力。结果经微囊化软骨细胞分化诱导7d后的间充质干细胞,增殖能力未受到明显影响,同时具备了软骨细胞的部分表面特征,能够合成蛋白多糖及Ⅱ型胶原蛋白,且能力优于Transwell对照组。将干细胞植入兔椎间盘退变模型中,在术后16周内,椎间盘的力学性能得到修复,形态及结构也得到了明显改善。结论与传统的Transwell诱导体系相比,微囊诱导体系具有更高的诱导效率;经微囊化软骨细胞诱导的MSCs,植入椎间盘退变模型动物体内后,能更好地维持椎间盘的形态、结构及力学特征。