5-HT受体亚型参与介导腹外侧眶皮层内5-HT诱发的抗伤害效应

免疫组织化学的研究表明相当数量的5-羟色胺(5-HT)能上行轴突从中缝背核投射到前脑的很多区域,包括腹外侧眶皮层(VLO)在内。VLO内广泛分布着5-HT1A、2、3、4受体。本研究以辐射热诱发的大鼠甩尾反射潜伏期(TFL)为指标,观察微量注射5-HT是否参与VLO内的下行抗伤害效应,并研究了5-HT1A、5-HT2、5-HT3和5-HT4受体亚型的拮抗剂对5-HT效应的影响,以明确参与该效应的受体亚型。结果表明VLO内微量注射5-HT(2、5、10μg/0.5μL)剂量依赖性抑制了大鼠甩尾反射。预先分别给予选择性5-HT1A受体拮抗剂NAN-190(10μg),选择性5-HT2受体拮抗剂CPT(50ng)以及选择性5-HT3受体拮抗剂LY-278,584(2.5μg)均可部分拮抗VLO内微量注射5-HT(10μg)诱发的抗伤害效应,而5-HT4受体选择性拮抗剂GR113808(10μg)对VLO内微量注射5-HT诱发的抗伤害效应没有影响。VLO内单独微量注射NAN-190、CPT和LY-278,584对甩尾反射没有影响。研究结果提示5-HT1A、5-HT2和5-HT3受体,而不是5-HT4受体参与介导VLO内5-HT诱发的抗伤害效应。VLO内微量注射5-HT可激活其内到导水管周围灰质(PAG)的投射神经元,进而激活脑干下行抑制系统在脊髓水平产生抗伤害效应。     

哈尔滨松花江斜拉大桥9~#主塔承台施工

哈尔滨松花江斜拉大桥 9# 主塔承台位于松花江北岸 ,承台处地质层为细砂 ,水位标高为 1 1 5 0 0m ,筑岛顶面标高 1 1 8 5 0m ,承台结构长度为 5 4 5m ,宽度为 1 5m ,其顶面标高 1 1 6 5 5m ,底面标高 1 1 1 5 5m ,厚度为 5m ,9# 主塔承台的混凝土工程量为 36 74 5m3 。由于地下水位高 ,承台基础面积大 ,混凝土数量大 ,混凝土内部水化热量大 ,且又在冬季施工 ,外部环境气温低 ,因此我们针对这些难点 ,制定了 9# 集水井降水、基础开挖、降低混凝土内部水化热、防止混凝土温度裂缝、冬季保温施工等一系列施工方案     

shRNA干扰LGR5对HeLa细胞增殖及耐药性的影响

目的探讨富含亮氨酸重复序列G-蛋白偶联受体5(LGR5)基因在HeLa细胞增殖及耐药性中的作用及可能机制。方法采用shRNA技术干扰LGR5表达,构建LGR5干扰(shLGR5)的HeLa细胞,并设对照组(shCon)。采用细胞计数、平板克隆以及MTT实验观察shLGR5对HeLa细胞增殖及耐药性的影响;采用Western blot检测LGR5、β-catenin在HeLa细胞中的表达。结果成功构建了LGR5干扰的HeLa细胞系;与shCon组相比,shLGR5组细胞生长速度及克隆形成率明显降低,差异具有统计学意义(P<0.01);shLGR5组与shCon组HeLa细胞对顺铂的耐药性差异亦具有统计学意义(P<0.01);且干扰LGR5抑制HeLa细胞中β-catenin蛋白的表达。结论 LGR5基因在HeLa细胞增殖及耐药性中有重要作用,且与Wnt/β-catenin通路有关。     

3-MA通过抑制自噬反应提高结肠癌5-FU的化疗效果

目的探索新的联合化疗方案以提高5-FU为基础的结肠癌化疗效果。方法研究5-FU(7.5μmol/L)、3-MA(5mmol/L)以及两种药物联合使用对人结肠癌细胞株HCT116的自噬及凋亡影响。MTT、Hoechst+PI染色检测细胞生长及凋亡,MDC染色观察细胞内自噬反应,Western blotting观察细胞内的凋亡及自噬相关蛋白改变。将HCT116细胞注射至裸鼠皮下建立在体肿瘤模型并进行治疗,观察肿瘤生长情况。结果MTT检测结果显示HCT116在5-FU作用下细胞生长受到抑制,Hoechst+PI染色显示5-FU联合3-MA组凋亡数量较5-FU组明显增加;Western blotting检测5-FU联合3-MA组的凋亡蛋白Caspase-3、PARP表达较5-FU组明显增高。同时,MDC染色以及自噬特异性蛋白LC3II检测发现在5-FU作用下自噬反应升高,而通过3-MA抑制5-FU引起的细胞自噬反应,细胞生长抑制率从5-FU单独作用的(51.64±4.04)%提高至(79.89±1.35)%,凋亡增加超过100%。皮下注射HCT116细胞的裸鼠肿瘤模型,5-FU联合3-MA组较单独使用5-FU组有效抑制肿瘤生长,肿瘤体积及质量均明显减少。结论 3-MA可抑制5-FU处理引起的细胞自噬反应,促进细胞凋亡,HCT116细胞生长抑制率明显增加;为提高5-FU为基础的结肠癌化疗提供新思路。     

本月关注

中国特色传祺GS5广汽传祺Gs5是概念车X-powe r的量产车型,将于2012年3月投产、4月上市。传祺Gs5有着超过2 7m的大轴距,空间优势非常明显。传祺Gs5不但具备时尚的外形设计和舒适的超大空间,传祺Gs5更着重汽车安全和操控性的核心价值。目前已     

水泥砼路面及水稳碎石基层冬季施工技术的应用

引言我国规范明确规定半刚性基层或底基层施工期的日最低气温应在5℃以上,并且规定水泥混凝土施工的摊铺现场连续5昼夜平均气温低于5℃,夜间最低气温低于-3～-5℃时,应该停止水泥混凝土路     

生存素在5-氟尿嘧啶诱导人绒癌细胞株JAR凋亡中的作用

目的探讨生存素(survivin)在化疗药物5-氟尿嘧啶(5-Fu)诱导的人绒癌细胞株(JAR)凋亡中的作用。方法用JAR细胞株进行培养传代,以不同浓度5-Fu作用于JAR细胞,MTT方法观察5-Fu对JAR细胞生长的抑制情况,流式细胞仪检测细胞凋亡率,用逆转录聚合酶链(RT-PCR)和免疫印迹技术(Western-blot)方法检测survivin基因和蛋白的表达。结果①5-Fu对JAR细胞的生长具有抑制作用,并有浓度和时间的依赖性;②5-Fu诱导JAR细胞凋亡,凋亡率随浓度而增加;③5-Fu作用后survivin基因和蛋白表达减少,随浓度增加而减少。结论5-Fu可能是通过降低survivin表达水平,诱导JAR细胞凋亡。     

子宫内膜腺癌中p53和CDK4的表达及意义

目的　探讨子宫内膜腺癌中调亡相关基因p5 3和细胞周期素依赖性激酶 4 (cyclindependentkinase 4 ,CDK4 )的表达水平及临床意义。方法　采用免疫组化SP法检测 32例子宫内膜腺癌中p5 3和CDK4的表达。结果　 32例子宫内膜腺癌中p5 3蛋白表达阳性率为 4 3.8% ,p5 3阳性表达与子宫内膜腺癌的组织学分级 ,肌层浸润深度和淋巴结转移呈负相关 (P <0 .0 5 ) ,与临床分期无相关关系 (P >0 .0 5 ) ;CDK4在子宫内膜腺癌中的阳性表达率为 6 8.8% (2 2 /32 ) ,CDK4阳性表达与子宫内膜腺癌的浸润深度和淋巴结转移呈正相关 (P >0 .0 5 ) ,与组织学分级和临床分期均无关(P >0 .0 5 ) ,p5 3和CDK4的表达呈负相关 (P <0 .0 5 )。结论　p5 3和CDK4作为细胞周期调控因子可能参与了子宫内膜腺癌的发生发展     

腰椎板切开髓核切除椎板关闭术

目的　探讨中央型椎间盘突出及多间隙腰椎间盘突出症使用全椎板切开治疗方法的改进和应用。方法　通过CT和MRI检查 ,对 2 30例腰椎盘突出患者采用全椎板切开、髓核切除椎板关闭术。结果　中央型椎间盘突出 89例 ,L3 4～L4 5突出 1 5例 ,L4 5～L5S1椎突出 1 0 5例 ,L3 4～L4 5～L5S1突出 2 1例。其中合并髓核钙化 5 4例 ,神经根管狭窄 1 63例。术后 1 76经半年～ 1 0年随访均获明显好转。结论　该术式手术彻底 ,并发症少 ,是改善全椎板切除术后脊柱稳定性差 ,粘连多的一种有效术式     

5-氨基乙酰丙酸光动力疗法对人卵巢癌细胞的杀伤作用

目的 探讨5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,5-ALA)介导的光动力疗法(photodynamic therapy,PDT)对体外培养的人卵巢癌3AO细胞的杀伤效应.方法 显微镜观察细胞形态;MTT法检测5-ALA介导的PDT(5-ALA-PDT)对3AO细胞增殖的抑制作用;PI染色及Annexin V-PI双染结合流式细胞术分析5-ALA-PDT对3AO细胞的细胞周期及死亡方式的影响.结果 5-ALA-PDT后3AO细胞出现典型的凋亡形态学改变;细胞抑制率随着5-ALA浓度及激光能量密度的升高而升高(P<0.01),当光敏剂浓度达到一定水平时,抑制率不再相应升高,该作用存在浓度饱和现象;流式细胞术显示PDT后细胞发生了G0/G1期生长停顿(P<0.05),有明显的晚期凋亡和继发性坏死(P<0.01).结论 5-ALA对卵巢癌3AO细胞有杀伤作用;凋亡是5-ALA-PDT杀伤卵巢癌细胞的一种机制.     

五里亭大桥无承台变截面桩施工

韶关市五里亭大桥是韶关市内环路上一座大桥 ,长 5 0 5m ,190m宽的河面上 ,仅有四根大直径墩柱。基础采用Φ5 6m、Φ3 5m、Φ3m变截面钻孔桩。以此为例 ,介绍变截面钻孔桩的施工方法。     

白花蛇舌草注射液逆转人肝癌细胞BEL-7402/5-FU的多药耐药作用

目的研究白花蛇舌草注射液对BEL-7402/5-FU细胞多药耐药的逆转作用,并探讨其作用机制。方法四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测药物对BEL7402/5-FU细胞的半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测细胞凋亡;ELISA双抗体一步夹心法测定酪氨酸激酶含量。结果无毒剂量的白花蛇舌草注射液(6μL/mL)联合5-FU对BEL-7402/5-FU细胞的IC50为636.5μmol/L,比单独应用5-FU的IC50(1 071.6μmol/L)明显下降,逆转倍数为1.68;加白花蛇舌草注射液后,5-FU对BEL-7402/5-FU细胞的凋亡比例明显增加,且显著下调BEL-7402/5-FU细胞的酪氨酸激酶含量。结论白花蛇舌草注射液对BEL-7402/5-FU细胞的多药耐药性具有一定的逆转作用,其机制可能与下调酪氨酸激酶有关。     

利用钢轨桩进行基坑护壁施工设计方案

沈阳市公和斜拉桥1^#墩承台基坑(30．5m*21．5m*5．5m)开挖。由于基坑距离铁路线太近,经方案比较后,确定为采用钢轨作基坑护壁支撑桩。     

呼吸阻抗对慢性阻塞性肺疾病的诊断价值

目的　探讨呼吸阻抗对慢性阻塞性肺疾病 (COPD)的诊断价值。方法　用脉冲振荡法 (IOS)对 117例COPD患者进行呼吸阻抗测定并与常规肺通气功能比较。结果　COPD患者 5～ 35Hz振荡频率时黏性阻力和共振频率较健康组明显增高 ,5、35Hz时电抗明显低于健康组。COPD组除X5与常规肺通气功能指标呈显著正相关外 ,Fres、R5、R5-R2 0 均与其呈显著负相关。Fres与FEV1 pred .和FEV1 FVC %相关性最密切 ,相关系数分别为 - 0 .6 3和 - 0 .6 2。Fres诊断COPD敏感度最高 ,其次为R5、X5,并随病情加重 ,敏感度不断提高。三项指标的特异度分别为 90 .91%、95 .4 5 %和 93.18%。结论　IOS法所测COPD患者Fres、R5、R5-R2 0 、X5与传统肺通气功能指标有显著的相关性 ,其中Fres是诊断COPD最敏感的指标     

hGDF5基因转染对骨髓间充质干细胞增殖和分化的影响

目的探讨人生长分化因子5(hGDF5)基因转染对骨髓间充质干细胞(BMSCs)增殖及分化的影响。方法采用脂质体介导方法将hGDF5基因转入体外培养的兔BMSCs,用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR)、间接免疫荧光检测hGDF5 mRNA和蛋白质的表达,并通过检测碱性磷酸酶活性、细胞增殖能力(MTT法)、Ⅱ型胶原(ColⅡ)以及蛋白多糖(PG)的表达,分析转染hGDF5对BMSCs增殖、分化的影响。结果hGDF5 mRNA及蛋白在基因转染细胞内得到正确表达;hGDF5基因转染组和对照组相比,ColⅡ、PG表达水平显著增高(P<0.01,P<0.01),而碱性磷酸酶活性和细胞增殖能力无明显变化(P>0.05)。结论外源基因转染可以使BMSCs表达有生物活性的hGDF5。高表达的hGDF5可以促进BMSCs向软骨表型分化,但对细胞增殖和碱性磷酸酶活性无明显影响。     

新辅助化疗对乳腺癌p53、bcl-2表达的影响及其意义

目的　探讨新辅助化疗对乳腺癌p5 3、bcl 2蛋白表达的影响及其意义。方法　用免疫组织化学ABC法检测 97例术前化疗 (研究组 )和同期 76例未行术前化疗 (对照组 )的乳腺癌组织p5 3、bcl 2蛋白的表达 ,并结合 5年无病生存率 (DFS)进行分析。结果　研究组p5 3阳性率为 2 8.9% (2 8 97) ,对照组为 38.2 % (2 9 76 ) ;研究组bcl 2阳性率为4 0 .2 % (39 97) ,对照组为 5 6 .7% (43 76 ) ;研究组 5年DFS为 74 .2 % (72 97) ,对照组为 6 0 .5 % (46 76 ) ,两者比较均有显著差异。结论　新辅助化疗可能通过调节p5 3、bcl 2的表达影响预后     

Ce0．5 Zr0．5 O2纳米多孔纤维的制备及其氧储存能力分析

利用干纺丝工艺,采用溶胶-凝胶法结合化学模板法制备了Ce0．5 Zr0．5 O2纳米多孔纤维,并在此基础上采用传统抄纸法制备了Ce0．5 Zr0．5 O2纤维纸。通过引入SiO2、TiO2和Al2 O3作为支撑体,利用XRD、低温N2吸附、拉曼光谱等手段分析了Ce0．5 Zr0．5 O2纳米多孔结构性能的变化。在空气条件下通过循环热失重分析法测定了材料在300～800℃温度范围内的氧储存能力,Ce0．5 Zr0．5 O2纳米多孔纤维的氧储存能力受到包括材料的比表面积、结晶程度以及支撑体性质等多方面因素的影响。     

钠通道SCN5a突变体R104W的构建及验证

目的构建并验证Brugada综合征相关钠通道SCN5a基因R104W突变体。方法采用一步法PCR突变技术,以pEGFP-SCN5a为模板,体外定点诱变构建pEGFP-SCN5a-R104W突变体,进行基因测序,并用Lipofectamine TM3000脂质体转染法转入HEK293细胞,通过Western blotting和膜片钳记录检测蛋白质表达和电流加以验证。结果测序结果显示SCN5a-R104W突变体基因序列上第310C>T,其他序列碱基与野生型相比未发生改变;Western blotting结果显示SCN5a-R104W突变体蛋白表达量较野生型SCN5a降低;荧光显微镜下显示SCN5a-R104W突变体蛋白位于胞质内;SCN5a-R104W突变体转染后膜片钳记录未能检测到钠电流,且R104W突变体对野生型通道有负显性抑制作用。结论成功构建并验证SCN5a基因R104W突变体。     

西安市男性吸烟、饮酒与食管癌关系的Meta分析

目的　探讨西安市男性吸烟、饮酒与食管癌的病因关系。方法　应用Meta分析对吸烟、饮酒与食管癌病例对照研究的文献进行综合评价。结果　纳入本次Meta分析的 5篇研究吸烟的文献中 ,病例组 5 30例 ,对照组 4 0 0 5例 ,异质性检验结果P >0 .0 5 ,支持固定效应模式 ,计算的OR为 2 .88(2 .32～ 3.5 8)。研究饮酒的 4篇文献中 ,病例组 4 6 5例 ,对照组 385例 ,异质性检验P <0 .0 5 ,按随机效应模式计算的OR为 1.81(1.0 8～ 3.0 5 )。结论　吸烟、饮酒与食管癌呈中等联系强度 ,是西安市男性食管癌的危险因素。     

miR-450b-5p在肝细胞癌中的表达及功能

目的探究miR-450b-5p在肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中的表达情况、临床意义及生物学功能,并初步探究其潜在的作用机制。方法 Real-time PCR检测miR-450b-5p在HCC组织和细胞系的表达情况;分析miR-450b-5p的表达水平与HCC临床病理特征及患者预后的相关性,并用Cox多因素回归分析法分析患者的独立预后因素;采用Transwell迁移和侵袭实验检测miR-450b-5p对HCC细胞迁移与侵袭能力的影响;MTT实验观察miR-450b-5p对HCC细胞增殖能力的影响;应用生物信息学工具预测miR-450b-5p的下游靶点,并应用荧光素酶报告实验及Western blot分析miR-450b-5p对靶点的调节作用。结果 miR-450b-5p在HCC组织和细胞系中的表达均明显降低(均P<0.001);miR-450b-5p的表达水平与肿瘤大小(P=0.026)、静脉侵犯(P=0.013)、TNM分期(P=0.020)及HCC患者的预后(P=0.014 2)相关,且Cox多因素回归分析结果显示miR-450b-5p为HCC患者的独立预后因素之一;上调MHCC-97H细胞的miR-450b-5p表达后,细胞迁移、侵袭和增殖能力显著被抑制;而下调Hep3B的miR-450b-5p表达时,细胞的迁移、侵袭和增殖能力明显增强;生物信息学分析发现,性别决定区Y框蛋白2(sex determining region Y-box2,SOX2)可能是miR-450b-5p的作用靶点;荧光素酶报告实验显示,miR-450b-5p能够负向调节SOX2-3′UTR的荧光素酶活性;miR-450b-5p mimics能降低MHCC-97H细胞中SOX2的表达水平,miR-450b-5p inhibitors能上调Hep3B细胞中SOX2的表达水平。结论 miR-450b-5p通过靶向作用于SOX2抑制HCC细胞的迁移、侵袭及增殖,进而抑制HCC的发生发展。