免疫酶染IgM检测法早期诊断流行性出血热的研究

本实验重点以免疫酶染检测了37例临床确诊EHF患者双份血清中的IgM抗体并与IFA—IgG抗体法进行了对比,所查37例EHF患者中2例早晚期血清免疫酶染IgM及FA—IgG抗体均为阳性,其余35例早期血清IgM抗体阳性检出率明显高于IFA—IgG法;晚期血清二种方法阳性检出率及阳性检出符合率为100%。阻断试验及2—ME耐性试验显示免疫酶染法检出的抗体系特异性IgM;该抗体可在发病第二日出现,整个病程均能检出。实验结果表明,免疫酶染IgM抗体技术敏感性高,特异性强,仅需要光学显微镜,观察清晰,便于基层人员使用。     

制备胃蛋白酶结晶并用之消化人IgG制备F(ab')_2

<正> 目前在免疫学研究中抗体的F(ab’)_2已为不可缺少的试剂,然国内市场既无抗体F(ab’)_2出售亦无制备F(ab’)_2所需的结晶胃蛋白酶供应。我们在瘤组织内淋巴细胞亚群分布的研究中须用人IgG的F(ab’)_2作抗原制备抗多价人免疫球蛋白(Ig)抗血清,为此乃以药用胃蛋白酶为材料制备了三次结晶的胃蛋白酶,用以水解人IgG,制备出IgG的F(ab’)_2片段兹将我们的方法介绍于下。     

免疫酶联吸附试验检测流行性出血热抗体的初步报道

本文着重介绍ELISA检测出血热患者血清IgG抗体方法,并与IFAT进行比较,两方法阳性符合率及阴性符合率是令人满意的,特别是EHF患者发热初期ELISA抗体阳性检出率明显高于IFAT法。实验发现,临床重危型患者发热期ELISA抗体滴度多数高于IFAT抗体滴度2～4倍,而恢复期则正好相反。故该方法适用于EHF临床诊断及流行病学调查。因ELISA系借助酶标检测仪判读结果。数据准确,无检测仪器者可以目测此色,判断结果,故便于基层人员推广使用。     

抗哇巴因多克隆抗体F(ab)2 片段的研制及鉴定

目的　用胃蛋白酶酶解抗哇巴因多克隆抗体 ,制备出F(ab) 2 片段 ,为改型抗体的研究提供依据。方法　免疫家兔制备出抗哇巴因多克隆抗体 ,并用胃蛋白酶分别在不同的酶解条件下消化抗体 ,继之用高效液相排阻色谱法 (HPSEC)对其进行分析、纯化 ,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测、鉴定其活性。结果　用胃蛋白酶 2mg/1 0 0mg抗哇巴因多克隆抗体 ,消化 1 8h ,反应体系的 pH3 0时 ,可获得F(ab) 2 片段。结论　用胃蛋白酶酶解抗哇巴因多克隆抗体是研制出有活性的F(ab) 2 片段的有效方法     

直接ELISA法早期诊断肾综合征出血热

联合应用硫酸鱼精蛋白沉淀和蔗糖垫层超速离心,从感染鼠脑中纯化HFRSV抗原,纯化抗原用HRP标记,成功地建立了采用酶标记HFRSV抗原的IgM抗体捕捉ELISA法,即直接ELISA法,检测HFRS患者血清特异IgM抗体。与已报道的采用酶标记HFRSV IgG的IgM抗体捕捉ELISA法相比。二法敏感度相似,但直接ELISA法可减少一步免疫反应,并能完全避免类风湿因子的干扰。应用直接ELISA法检测临床诊断的HFRS患者血清87份,其中早期患者(1～5病日)血清37份,特异IgM抗体阳性检出率分别为96.5%和91.8%。我们认为酶标记抗原直接ELISA法为HFRS的早期诊断提供了更为特异、简便快速的新方法。     

酶联免疫吸附试验检测流行性出血热患者IgM抗体报告

本文介绍一种检测EHF特异性IgM抗体的ELISA间接法,在临床诊断应用中分别对耳血及静脉血清进行了平行检查,并与IFAT法进行了比较。结果表明:19例临床诊断为EHF患者耳血中ELISA—IgM阳性率为100％(19/19),IFAT—IgM阳性率为89.47％(17/19),且ELISA耳血IgM抗体滴度>IFAT耳血IgM抗体滴度者为68.47％(13/19)。实验发现,耳血ELISA—IgM抗体滴度明显高于静脉血清ELISA—IgM抗体滴度4倍者占73.68％(14/19)。作者认为,该方法特异性、敏感性较好,操作简便,只需要采用耳血就可以达到早期,快速诊断目的,值得推广使用。     

MacEUSA和IFA对EHF病人血清SIgM的动态检测

用IgM抗体捕获法ELISA(MacELISA)和间接免疫荧光法(IFA)同时检测32例流行性出血热(EHF)病人血清特异性lgM抗体(SIgM)的动态反应。二法检出SIgM的总符合率为99.46%,所测抗体滴度的动态反应曲线基本平行,而MacELISA所测抗体滴度比IFA明显提高。早期EHF病人血清即有较高滴度的SIgM抗体,9病日～10病日达高峰,此后趋于下降。IFA法所测不同病日的SIgM滴度无显著差异(F=1.680,P>0.05),而MacELISA则有显著差异(F′=2.978,P<0.05)。二法所测不同病型EHF的SIgM滴度在病日相同时各型间皆无显著差异(P>0.05)。     

不孕症妇女超排卵治疗前后免疫学研究

目的　探讨促性腺激素对生殖内分泌 免疫系统的影响。方法　采用全自动发光法、ELISA法测定 2 0例患者超排卵前后卵泡刺激素 (FSH)、黄体生成素 (LH)、雌二醇 (E2 )、抗卵巢抗体 (AOA)、抗磷脂抗体 (APA)、抗核抗体 (ANA)、抗双链DNA抗体 (ds DND)及血清球蛋白IgA ,IgG ,IgM。结果　治疗后FSH、LH、E2 、IgM、IgG较治疗前无显著性变化 ,IgA明显高于治疗前 ,治疗后 2例患者出现AOA ,1例出现ds DNA。结论　超排卵不影响血清FSH、LH、E2 水平 ,可能对机体的免疫功能有所影响 ,但无明显临床表现     

丙型肝炎病原学检测的临床应用效果评价

目的　了解我国丙型肝炎病毒感染的病原学诊断现状 ,探讨合理有效的临床应用模式。方法　用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测抗HCV抗体 ,用荧光定量反转录聚合酶链式反应 (FQRT PCR)技术定量检测HCV RNA ,用速率法检测ALT水平。结果　 188份抗HCV IgG阳性标本中 10 3份HCV RNA阳性 (大于 10 3 拷贝·mL-1) ,阳性率 5 4 .7% ;10 7份HCV RNA阳性标本中 ,有 4份抗HCV IgG阴性 (3.7% ) ,二者一致率 6 9.8% ,不一致率 30 .2 % ;HCV RNA载量与ALT水平无明显相关性。结论　用ELISA检测抗HCV IgG筛查丙肝病人会有 3.7%的病毒血症者漏检 ,且有 4 5 .2 %的假阳性 (无传染性 ) ;用抗HCV IgG阳性加ALT升高作为诊断丙型肝炎现症患者价值有待探讨 ;抗HCV IgG的出现与否与HCV RNA载量无关。     

病毒唑对EHF患者特异性体液免疫及循环免疫复合物的影响

本文对病毒唑治疗的流行性出血热(EHF)患者血清EHF—IgG及循环免疫复合物(CIC)进行了系统的动态观察,结果显示病毒唑治疗组患者血清EHF—IgG抗体及CIC水平皆比对照组为低。说明用药后患者体内特异性体液免疫反应降低,CIC形成减少,有利于病情改善。     

乙型肝炎IgA型HBsAg循环免疫复合物的研究(摘要)

<正> 近年来,对IgM、IgG型HBsAg循环免疫复合物的研究文献较多,但尚未见到有关IgA型HBsAg—CIC的报道。本文建立了以羊IgG抗人IgA作为包被抗体,以HRP—抗HBs作为指示抗体检测HBsAg/IgA—CIC的HLISA捕捉法。操作过程为:以羊IgG抗人IgA包被反应板各孔,依次加入1:10稀释的待检血清标本,ERP—EHBs和底物溶液,硫酸阻断后测OD值。以等于或大于阴性对照2.1倍为阳性。经阻断试验、中和试验、替代试验、重复性试验和对不同Ag/Ab比例的人工HBsAg/IgA免疫复合物的检测证明,本法特异     

急性散发性戊型肝炎患者血清抗体的动态检测

动态检测了34例1993年6月～1994年5月在我校附属医院住院确诊的急性散发性戊型肝炎患者血清IgM、IgG抗-HEV变化。15例患者IgM和IgG同时阳性。16例平均随访观察303d（6个月～15个月）。结果：IgM、IgG抗-HEV阳性最早出现在黄症后第3天；黄疸后10d阳性率分别达86．7％和100％。两抗体在病初1周时滴度最高，以后缓慢下降，IgM下降较快，病程2月时所检患者均降至不能检出水平；IgG抗体除1例外均在1年左右阴转。ALT在抗体出现后很快下降，6周降至近正常水平。IgM抗-HEV检出率仅44．1％，故不宜仅以此作为急性戊型肝炎诊断标准，应结合IgGJ立体动态变化，综合判断。     

流行性出血热患者血清特异性抗体的动态观察

一、本文检测95例出血热患者487份血清中,出血热IgM及IgG抗体皆为阳性,而非出血热流行地区健康人血清30份及非出血热患者血清30份,皆为阴性。二、出血热患者血清中IgM抗体于病程第1日可检出,3—12日阳性率最高,以后逐渐下降。其滴度2—3病日开始增高,3—6病日达高峰,持续6—12天,第10—14病日逐渐下降。IgG抗体于病程第2日可检出,4—5病日阳性率上升,7—14病日达高峰,其滴度于检出后逐渐增高,5—14病日始达高峰。三、患者病情轻重与血清中抗体水平呈正相关。     

酶联抗人IgG单克隆抗体与多克隆抗体测定PAIgG法的比较

作者应用辣根过氧化酶—抗人IgG单克隆抗体(HRP—McAb)和辣根过氧化酶—抗人IgG多克隆抗体(HRP—PcAb),在ELISA检测PAIgG影响因素的预试方面以及对一批正常人(N=34)和不同类型的血小板减少症患者(N=65)进行了PAIgG测定的比较,结果表明;HRP—McAb和HRP—PcAb在ELISA检测PAIgG法各预试条件方面多数相近似,二种试剂检测值间呈现较好的相关性(Y=0.689,P<0.0005)故在常规ELISA检测PAIgG法中可用HRP—McAb代替HRP—PcAb,以利实验方法的标准化。     

不孕不育与支原体感染和抗精子抗体的关系

目的　探讨不孕不育与支原体感染和抗精子抗体 (ASA)之间的关系。方法　采用培养法分别对 2 4 8例不孕妇女(观察组 )和 16 7例不育男性患者 (观察组 )进行解脲支原体 (UU)和人型支原体 (MH)检测 ;采用ELISA法检测血清抗精子抗体ASA IgM和ASA IgG。同时分别选择 6 9例正常妇女和 4 3例正常男性作为对照。结果　不孕症观察组及不育症观察组UU、MH阳性检出率均明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。不孕和不育观察组ASA阳性检出率 (2 8.6 3% ,2 0 .96 % )均显著高于对照组 (7.2 1% ,6 .98% ,P <0 .0 5 )。支原体感染阳性组ASA阳性率明显高于支原体感染阴性组(P <0 .0 2 5 )。结论　女性不孕和男性不育均与支原体感染及免疫因素有关 ,并且ASA与支原体感染有关     

滴金法检测幽门螺杆菌细胞毒素相关蛋白A抗体试剂盒的研制及应用

目的　建立一种快速、简易的检测血清中抗幽门螺杆菌 (Hp)细胞毒素相关蛋白A(CagA)抗体的胶体金免疫渗滤法 (DIGFA)。方法　采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒 ,标记葡萄球菌A蛋白 (SPA) ,将重组的CagA抗原固定于硝酸纤维素膜上 ,制成免疫渗滤试剂盒。血清中抗CagA抗体与试剂盒上金标记物及硝酸纤维素膜上的固相抗原结合后 ,形成肉眼可见的红色斑点。结果　用DIGFA与酶联免疫吸附试验 (ELISA)试剂盒对比检测了 32 6份血清标本中抗CagA抗体 ,本方法的特异性为 95 .8% ,敏感性为 97.3% ,两种方法符合率为 96 .6 %。结论　DIGFA检测血清中的抗CagA抗体特异性强、灵敏度高、简便快速 ,无需特殊仪器设备 ,有广泛应用价值     

酶联免疫吸附试验快速检测流行性出血热病人耳血IgM抗体(通讯)

<正> 据病毒研究室歧天茂等报道,目前国内外学者均以免疫荧光技术(IFAT)及免疫酶染技术检测流行性出血热(EHF)病人静脉血清中的IgM抗体做为早期诊断的依据。该     

流行性出血热实验室感染的临床特点(附12例报告)

<正> 本文报告一起由实验大白鼠引起的流行性出血热(EHF)小暴发流行。1986年8月～1986年12月,1986年12月～1987年2月两次发病,共12例。全部病例按1986年全国流行性出血热防治方案诊断标准,经间接免疫荧光检测血清EHF 抗体阳性,双份血清EHF抗体4倍以上增高。     

IgM抗体捕获ELISA法对流行性出血热患者尿液中特异性IgM抗体的检测

将IgM抗体捕获ELISA法应用于检测流行性出血热病人尿液中的特异性IgM抗体,总阳性率72.62%,7～9病日可达83.87%;第3病日即可出现阳性;并且具有较高的特异性和敏感性。尿中特异性IgM抗体检出的阳性率与病日(G=7.3858,P>0.05)及尿蛋白含量(G=4.4003,P>0.05)间均无明显关系;特异性IgM抗体的滴度与病日有关(F′=26.5331,P<0.01)与尿蛋白含量无明显关系(F=2.2074,P>0.05);不同病日尿液中特异性IgM抗体检出的阳性率与滴度呈正相关(r=0.9973,P<0.01)。     

HBsAg阳性各类肝炎及携带者HBV复制指标及传染性的观察

<正> HBsAg阳性各类肝炎及其携带者是否均有传染性是值得深入探讨的问题,我们曾对381例各类乙型肝炎病人进行了HBV复制指标的观察,检测HBsAg、抗-HBs、抗-HBc、抗-HBcIgM,HBsAg/IgM、PHSA—R均采用固相放射免疫法,HBeAg及抗-HBe用酶联吸附免疫法,HBV—DNA为斑点杂交法。本文采用HBeAg、抗-HBcIgM,HBsAg/IgM、PHSA-R及HBV—DNA作为乙肝病毒传染性指标,任何一项出现阳