谷氨酸介导的大脑皮层神经细胞凋亡

目的　观察相对低浓度谷氨酸 (Glutamate ,Glu)对培养皮层神经细胞的兴奋毒性作用。方法　以 30 μmol/L处理培养第 7天神经细胞 30min ,应用吖啶橙染色荧光显微镜观察及流式细胞仪定量分析法 ,分别观察Glu作用后细胞凋亡形态特征及不同时间点 ( 6h ,1 2h ,1 8h ,2 4h)凋亡细胞所占比例。结果　Glu作用后 6h即有凋亡细胞的出现 ,1 2h后渐增多 ,以 1 8h达到高峰 ,为 1 2 %。结论　相对低浓度Glu可诱导大脑皮层神经细胞凋亡。     

褪黑素对人肝癌SMMC-7721细胞的抑制作用

目的　观察褪黑素对人肝癌 SMMC- 772 1细胞生长抑制作用及其作用机理。方法　采用不同浓度的褪黑素通过体外细胞培养、MTT显色技术研究其抑制作用 ,以流式细胞仪和电子显微镜技术观察其作用机理。结果　褪黑素对人肝癌 SMMC- 772 1细胞具有抑制作用 ,其 IC30 、IC50 分别为 1 .1 0和 2 .0 0 mmol/L。以 IC30 的褪黑素处理 SMMC- 772 1细胞 ,使其倍增时间由 2 1 .1 h延长到 38.4h。流式细胞仪观察到褪黑素导致 SMMC- 772 1细胞 G0 /G1期比例升高 ,S期比例降低。透射电镜可观察到以 IC30 的褪黑素处理的细胞 ,其超微结构发生了退行性改变。结论褪黑素对 SMMC- 772 1细胞具有抑制作用 ,其作用机理可能是褪黑素导致细胞 G0 /G1阶段的推迟进行     

EFFECT OF SIBELIUM ON HYPOXIC CULTURED NEURONS FROM NEWBORN RATS CEREBRAL CONTEX IN VITRO

ＥＦＦＥＣＴＯＦＳＩＢＥＬＩＵＭＯＮＨＹＰＯＸＩＣＣＵＬＴＵＲＥＤＮＥＵＲＯＮＳＦＲＯＭＮＥＷＢＯＲＮＲＡＴＳＣＥＲＥＢＲＡＬＣＯＮＴＥＸＩＮＶＩＴＲＯ（刘小红）（陈征起）（和光祖）ＬｉｕＸｉａｏｈｏｎｇ；ＣｈｅｎＺｈｅｎｇｑｉ；ＨｅＧｕａｎｇｚｕ；...     

肝动脉缺血对供肝细胞的损伤机理及防护措施:Ⅲ.线粒体功能损伤的酶学变化

通过建立16例“简易犬自体肝原位移植模型”，用酶组化光镜观察及分离肝细胞酶活性定量测定技术，检测了肝组织细胞在肝动脉系统缺血（HAI）1h及3h的情况下其SDH（琥珀酸脱氢酶）和LDH（乳酶脱氢酶）的活性，并与正常肝细胞及冷缺血15min的肝细胞作了比较。结果显示：当HAI达1h，肝细胞线粒体SDH活性已明显减低，而LDH活性显著增高，与冷缺血15min组对照有显著性差异（P＜0．001）；当HAI达3h时SDH活性极度减低，而LDH活性极度亢进。提示：HAI可能是移植术后供肝病变致某些早期并发症和胆道并发症的重要因素之一，应尽量限制在1h以内。     

卡马西平对培养皮层神经细胞毒性的研究

在对体外新生大白鼠（0～1d）大脑皮层神经细胞进行原代培养的基础上，分别加入不同浓度卡马西平（Carbamazepine，CBZ），继续培养3d。检测乳酸脱氨酶（LDH）释出率双膜流动性。结果显示：高浓度的CBZ（24mg／L）可导致神经细胞LDH释出率明显升高（P<0．01）、膜流动性明显降低（P＜0．01）。提示高浓度卡马西平对神经细胞存在有毒性作用。     

褪黑素对人食道磷癌Eca-109细胞的生长抑制作用

目的　研究国产褪黑素对人食道磷癌Eca 10 9细胞的生长抑制作用及其作用机理。方法　采用不同浓度的褪黑素通过体外细胞培养、MTT显色技术研究其抑制作用 ,通过流式细胞仪和透射电子显微镜技术观察 ,对其作用机理进行探讨。结果　褪黑素对人食道磷癌Eca 10 9细胞具有抑制作用 ,其IC30 、IC50 分别为 0 .89、1.6 0mmol·L- 1 。以IC30 的褪黑素处理Eca 10 9细胞 ,使其倍增时间由 33.6h延长到 39.4h。流式细胞仪观察到褪黑素可导致Eca 10 9细胞G0 G1 期比例升高 ,S期比例降低。透射电镜可观察到以IC30 的褪黑素处理的细胞 ,其超微结构发生了退行性改变。结论　褪黑素对人食道磷癌Eca 10 9细胞具有抑制作用 ,其作用机理可能是褪黑素导致细胞周期从G1 到S阶段的推迟进行     

兔中缝隐核对血压的调节作用及其外周途径

目的　探讨中缝隐核对家兔血压的调节作用及其外周途径。方法　采用中缝隐核内微量注射以及外周受体阻断的方法观察家兔血压的变化。结果　实验发现将微量兴奋性氨基酸谷氨酸钠注射到中缝隐核内可以使基础血压升高 ,而将微量γ 氨基丁酸注射到中缝隐核内却可以降低基础血压。外周应用酚妥拉明或者在脊髓T3～T4节段切断可以阻断微量谷氨酸钠注射到中缝隐核内所引起的升压效应。而外周应用心得安、阿托品或者双侧颈部迷走神经切断却不能阻断微量谷氨酸钠注射到中缝隐核内所引起的升压效应。结论　中缝隐核在生理情况下具有一定的紧张性活动 ,该活动可能在维持血压的稳定方面具有重要作用 ,这一作用的外周途径是通过交感神经及 α 受体介导的     

列车气密性静态泄漏理论模型与计算

基于一维等熵流动理论推导了列车气密性静态泄漏状态方程, 考虑泄漏孔流量系数, 得到了压降泄漏时间和总泄漏时间计算公式; 数值模拟了列车气密性静态泄漏的动态过程, 并研究了长细比分别为1∶1、1∶4、1∶8和1∶16, 车内初始气压分别为6、5、4和3 kPa时, 泄漏孔长细比和车内初始气压对列车气密性的影响。分析结果表明: 在车内空气压力从3.0 kPa下降到0.8 kPa的过程中, 数值仿真和理论公式计算得到的压降时间分别为20.25、20.23 s, 与试验结果的相对误差分别为1.41%和1.51%;当泄漏孔长细比为1∶8和1∶16时, 列车车厢内空气压力下降时程曲线基本一致, 泄漏孔气流流量保持不变; 泄漏过程中泄漏孔的气流速度呈现中间大周围小的分布特征, 这是由泄漏孔壁面的黏滞作用引起的; 根据出口截面的中心速度和质量流率得到泄漏孔流量系数为0.71, 车内初始气压对相同指定压力下降时间的影响不足1%;若压降范围一致, 随着初始气压的增大, 压降时间减小, 压力从4 kPa下降到1 kPa的时间为24.18 s, 从5 kPa下降到2 kPa的时间为19.80 s; 数值仿真得到的压降泄漏时间与理论计算结果的最大相对误差为1.22%, 表明理论模型与数值仿真计算方法可以用于计算列车泄漏面积或气密性。      

蝮蛇抗栓酶对胎儿晶状体上皮细胞体外生长的影响

目的研究蝮蛇抗栓酶(AF)对胎儿晶状体上皮细胞体外生长的影响。方法取中晚孕引产死胎眼球晶状体前囊膜,用改良方法进行胎儿晶状体上皮细胞培养,取生长状况良好的2、3代传代细胞,加入6种不同浓度(2×10-4、4×10-4、8×10-4、16×10-4、32×10-4、64×10-4u/mL)的蝮蛇抗栓酶溶液与胎儿晶状体上皮细胞持续接触48h,倒置显微镜下观察各组细胞形态的变化,四甲基偶氮唑盐法检测各孔细胞数量的吸光度(A)值。结果与对照组相比,AF组特别是高浓度AF组中,细胞失去正常多角形,胞质减少,细胞内颗粒增多,细胞间隙增宽,排列疏松散乱,甚至崩解不贴壁。随着浓度增加,各组A值逐渐减低,除2×10-4u/mLAF组外,其他各浓度组A值与对照组比较均有统计学差异(P<0.05),并且随着浓度增加,生长抑制率逐渐增加。结论AF浓度>4×10-4u/mL,能通过持续接触抑制体外培养的胎儿晶状体上皮细胞的生长,并且具有浓度依赖效应。     

大脑皮层神经细胞原代培养及其缺氧性损害模型

用２ｄ龄的ＳＤ大鼠大脑皮层进行分散神经细胞原代培养，经氰化钠阻断细胞呼吸链，模拟了大脑皮层神经细胞急性缺氧损害模型。模型中缺氧细胞形态不典型，膜流动性降低，乳酸脱氢酶漏出增多，类似整体动物脑缺氧后神经细胞变化。此模型可用于研究缺氧皮层神经细胞的损伤、损伤后恢复及药物的保护作用。     

褪黑素对人胃腺癌SGC-7901细胞的抑制作用

目的　研究褪黑素对人胃腺癌SGC 790 1细胞的生长抑制作用及其作用机理。方法　采用不同浓度的褪黑素通过体外细胞培养、MTT显色技术研究其抑制作用 ,通过流式细胞仪和透射电子显微镜技术观察 ,对其作用机理进行探讨。结果　褪黑素对人胃腺癌SGC 790 1细胞具有抑制作用 ,其IC30 、IG50 分别为 0 83和 1 70mmol·L- 1 。以IC30 的褪黑素处理SGC 790 1细胞 ,使其倍增时间由 31 2h延长到 38 4h。流式细胞仪观察到褪黑素导致SGC 790 1细胞G0 /G1 期比例升高 ,S期比例降低。透射电镜可观察到以IC30 的褪黑素处理的细胞 ,其超微结构发生了退行性改变。结论　褪黑素对人胃腺癌SGC 790 1细胞具有抑制作用 ,其作用机理可能是褪黑素导致细胞G0 /G1 阶段的推迟进行     

恒定均匀磁场对肿瘤细胞调亡Bcl-2及Bax蛋白表达的研究

目的　探讨磁场对肿瘤细胞凋亡及其相关基因 Bcl- 2及 Bax蛋白表达的影响 ,揭示磁场抗癌作用的分子机制。方法　 460只 SD大鼠右下肢皮下移植 Walker- 2 56瘤株 ,常规饲养 2周后 ,随机选择 40 0只分为荷瘤对照组和荷瘤实验组。实验组每日接受不同强度不同时间的磁场处理 ,持续 2周 ,观察瘤鼠存活率 ,然后处死 ,测量瘤体体积及湿重 ,最后行 HE及免疫组化染色。结果　与对照组比较 ,实验组大鼠存活率 (84.2 8% )增高 ,肿瘤体积 (1 .78cm3± 0 .82 cm3)及肿瘤湿重 (2 .2 0 g± 1 .43g)明显减小 (P <0 .0 5)。病理组织学检查可见细胞凋亡的数目明显增多。Bcl- 2蛋白阳性表达率 (1 8% )低于对照组 ,Bax蛋白阳性表达率 (43% )高于对照组 (P <0 .0 5) ,Bcl- 2 /Bax的比值低于对照组。结论　恒定均匀磁场的作用结果使凋亡相关基因 Bcl- 2蛋白的表达下调 ,Bax蛋白的表达增高 ,Bcl- 2 /Bax的比值减小 ,是诱导肿瘤细胞凋亡的原因之一     

褪黑素对花萼海绵诱癌素诱导的神经细丝过度磷酸化的影响及机制

目的探讨褪黑素(Mel)对花萼海绵诱癌素(CA)在成神经瘤细胞诱导的神经细丝过度磷酸化中的影响及其机制。方法采用鼠野生型成神经瘤细胞(N2awt),给予CA处理,或同时给予不同浓度Mel或维生素E(Vit E)处理,并用免疫印迹法检测神经细丝磷酸化水平和蛋白磷酸酯酶2A(PP-2A)含量,32P-特异底物标记技术检测PP-2A活性。结果①CA可在N2awt细胞引起神经细丝过度磷酸化,同时伴有PP-2A含量和活性降低。②Mel对CA引起的神经细丝过度磷酸化有保护作用,且强于Vit E;Mel同时对抗CA诱导的PP-2A活性和含量降低。结论Mel可通过调节细胞内PP-2A的含量和活性而减轻CA引起的神经细丝过度磷酸化。     

Glutamate enhances the expression of vascular endothelial growth factor in cultured SD rat astrocytes

Objective To study the effect of glutamate on the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF) mRNA and protein in cultured rat astrocytes. Methods Cultured rat astrocytes were randomly divided into 6 groups: control group (C), glutamate group (G), QA group (Q), DCG-IV group (D), L-AP4 group (L) and glutanmte-FMCPG gronp (G+M). Cells were cultured under nomoxic condition (95% air, 5% CO2). RT-PCR and ELISA methods were used to detect the expression of VEGF mRNA and protein in cultured astrocytes, respectively. G+ M group was preincubated with lmM MCPG for 30 min prior to the stimulation with glutamate. There were 7 time points at 0,4,8,12,16,24 and 48 h in each group except G+M group. Results The expression of VEGF mRNA and protein did not differ significantly among D group, L group and C group. Different from that in C group, the expression of VEGF mRNA and protein could be enhanced both in a dose-dependent and time-dependent manner in G group and Q group. Meanwhile, the enhanced expression of VEGF mRNA and protein in G group was completely suppressed by MCPG after 24 h. Conclusion Glutamate can increase the expression of VEGF mRNA and protein in cultured astrocytes, which may be due to the activation of group I metabotropic glutamate receptors in astrocytes.     

车辆系统空气弹簧失气安全性分析

建立了具有刚度衰变特性的空气弹簧失气模型和非线性粘滑接触模型,结合车辆系统动力学,模拟空气弹簧失气动态过程与失气后的应急状态,分析了空气弹簧失气后车辆系统的稳定性与空气弹簧突然失气对车辆动力学性能的影响,研究了不同失气过程时长、运行速度与曲线通过工况下空气弹簧失气车辆的安全性。计算结果表明:空气弹簧失气后车辆临界速度由623km.h-1大幅降低为351km.h-1。空气弹簧突然失气导致轮轨垂向力减小,轮重减载率增大,且失气过程越短,轮重减载率越大,失气过程为0.2s时轮重减载率达到0.651。车辆运行速度低于300km.h-1时,车速对轮重减载率和轮轨力影响不明显,当大于300km.h-1时,减载率随车速增大迅速增大。车辆通过曲线时,在圆曲线上失气最危险,轮重减载率最大为0.652。     

益气活血开窍复方对缺血再灌注脑组织兴奋性氨基酸及超微结构的影响

目的　探讨益气活血开窍复方对缺血再灌注脑组织保护作用的机理。方法　以线栓法制备大鼠脑缺血再灌注模型 ,采用全自动氨基酸分析仪、干湿重法、原子吸收分光光度计测量脑组织中兴奋性氨基酸 (EAA)含量、含水量及钙离子 (Ca2 + )含量 ,电子显微镜观察脑组织超微结构改变。结果　中药组谷氨酸 (Glu)含量下降 (P <0 .0 1) ,谷氨酸 /γ 氨基丁酸 (Glu/GABA)趋向于正常比值 ,脑组织含水量及Ca2 + 浓度下降 (P <0 .0 5 )。中药可减轻由于缺血再灌注所导致的细胞超微结构的改变。结论　益气活血开窍方通过抑制EAA释放、Ca2 + 内流而发挥脑组织保护作用。     

THE PROTECTIVE EFFECTS OF THE TOTAL SAPONIN OF DIPSACUS ASPEROIDES ON THE APOPTOSIS OF HIPPOCAMPAL NEURONS INDUCED BY β-AMYLOID PROTEIN

Objective To investigate the effects of the total saponin of Dipsacus asperoides (tSDA) and ginsenoside Rb1 (GRb1) on the apoptosis of primary cultured hippocampal neurons induced by β-amyloid protein (Aβ). Methods Primary cultured hippocampal neurons, the cultures were pretreated with tSDA and GRb1 on 10d for 24 hours respectively. Then the cultures were treated with 35μmol·L-1 Aβ25-35 for 24 hours, observed the changing of survival rate of neurons and the apoptosis of neurons with biochemical analysis combining immunofluorescent cytochemical double-staining technique. Results Hippocampal neurons were treated with 35μmol*L-1 Aβ for 24 hours, and survival rate of neurons downed to 52.6%. When neurons were pretreated by tSDA and GRb1, survival rate of neurons increased 11% to 15%. The findings of immunofluorescent cytochemical double-staining indicated that apoptotic neurons were obviously more than that of the blank group, reaching 43.9%.When neurons were pretreated by tSDA and GRb1, apoptotic neurons were downed to 16.6%, 10.8% respectively. Conclusion tSDA had the same effects as GRb1, protecting the neurons, antagonizing neurotoxicity of Aβ, increasing survival rate of neurons, and reducing apoptotic neurons induced by Aβ.     

超声去除循环冷却水中水华鱼腥藻的研究

采用50 kHz超声去除水华鱼腥藻,研究了藻类初始浓度、溶液体积对处理过程的影响.结果表明,在超声过程中藻类浓度随超声时间延长逐渐降低.而随着藻类初始浓度和处理体积的增加,去除速率亦逐渐下降.此外,研究了纯水超声过程中H2O2的生成动力学,探讨了超声去除藻类的机理.     

超声及超声微泡介导基因转染的可行性研究

目的探讨超声、超声造影剂微泡介导基因转染的可行性及所需超声照射时间。方法选择超声能量在MI=1.5、超声频率f=8MHz,向人脐静脉内皮细胞(HUVEC)悬液加入微泡后分别超声辐照20s、1、5、10、15、30min,继续培养24h。然后用台盼蓝拒染法计数活细胞,各组与对照组(无辐照)行统计学分析,选择超声辐照的最佳时长。然后,微泡与增强型绿色荧光蛋白(EGFP)质粒充分孵育后,采用该时长进行超声微泡介导基因转染试验,细胞继续培养48h后,通过荧光显微镜观察EGFP的表达。结果超声辐照10、15、30min组细胞计数比对照组降低,差异有统计学差异(P<0.05)。利用超声能量在MI=1.5、超声频率f=8MHz条件下辐照5min,继续培养48h后荧光显微镜观察,有EGFP表达,细胞生长良好。结论超声微泡能够促进质粒进入细胞并转染基因。超声能量MI=1.5、超声频率f=8MHz时,超声微泡介导基因转染的最佳辐照时长为5min。     

大黄素对模拟冷缺血再灌注后肝细胞内钙离子浓度及细胞凋亡的影响

目的 研究中药大黄素对模拟冷缺血再灌注后肝细胞内钙离子浓度及细胞凋亡的影响.方法 体外培养肝细胞株HL-7702,随机分为对照组和大黄素处理组.对照组未予大黄素处理,大黄素处理组按100、10、1 μmol/L分为高、中、低3个浓度组,建立模拟冷缺血再灌注模型,流式细胞技术检测各组细胞内钙离子浓度及细胞凋亡水平,分别检测各组细胞培养上清液乳酸脱氢酶水平.结果 冷缺血8 h再灌注6 h后,高、中、低浓度大黄素处理组钙离子荧光强度分别为(24.12±0.51)、(26.35±1.34)、(39.12±1.94),均显著低于对照组的105.29±1.01(P<0.01).高、中、低浓度大黄素处理组细胞凋亡率分别为(5.46±0.41)%、(10.64±0.64)%、(11.90±0.50)%,均显著低于对照组的(25.40±1.41)%(P<0.01).高、中浓度大黄素处理组上清液LDH含量分别为(179.67±18.57)u/L、(198.83±14.22)u/L,显著低于对照组的(351.33±34.16)u/L(P<0.01).结论 大黄素可降低模拟冷缺血再灌注后的肝细胞内钙离子浓度,抑制细胞凋亡,减轻肝细胞损伤.