生物人工肝对重型肝炎血清的代谢作用

目的　构建生物人工肝 (BAL)并探讨其对乙型重型肝炎患者血清的代谢作用。方法　两步法分离 ,旋转振荡法培养的乳猪肝细胞球形聚集体置入中空纤维生物反应器外间隙内构建成新型BAL。应用此型BAL对乙型重型肝炎患者稀释血清进行 3h的体外灌流实验。每隔 0 .5h、灌流前及灌流后分别检测灌流血清的总胆红素、总蛋白、白蛋白和球蛋白。结果　绝大多数肝细胞在培养 2 4h后都形成了球形聚集体且保持了较高的活性。循环灌流3h后 ,与无细胞的空白对照组相比 ,治疗组血清总胆红素水平显著降低 (P <0 .0 1) ,血清总蛋白和白蛋白水平均明显增高 (P <0 .0 5 )。结论　旋转振荡法是一种简便、经济的球形聚集培养肝细胞的方法。此型BAL有可能为临床乙型重型肝炎患者提供有效的治疗     

肝动脉缺血对供肝细胞的损伤机理及防护措施:Ⅲ.线粒体功能损伤的酶学变化

通过建立16例“简易犬自体肝原位移植模型”，用酶组化光镜观察及分离肝细胞酶活性定量测定技术，检测了肝组织细胞在肝动脉系统缺血（HAI）1h及3h的情况下其SDH（琥珀酸脱氢酶）和LDH（乳酶脱氢酶）的活性，并与正常肝细胞及冷缺血15min的肝细胞作了比较。结果显示：当HAI达1h，肝细胞线粒体SDH活性已明显减低，而LDH活性显著增高，与冷缺血15min组对照有显著性差异（P＜0．001）；当HAI达3h时SDH活性极度减低，而LDH活性极度亢进。提示：HAI可能是移植术后供肝病变致某些早期并发症和胆道并发症的重要因素之一，应尽量限制在1h以内。     

促肝细胞生长素对小鼠肝纤维化的影响

用四氯化碳致小鼠肝纤维化，分别用促肝细胞生长素（PHGT）和复方丹参注射液进行实验治疗。结果显示：实验治疗组病理显示肝细胞变性坏死经，胶原纤维形成减少，肝细胞再生显著，和复方丹参注射液组相比，无显著差异；透明质酸检测肝纤维化模型组含量明显高于治疗组，而治疗组和对照组相比，无显著差异（P＞0．05）。提示PHGT有抗肝纤维化作用，PHGT对小鼠肝纤维化作用的影响主要是肝细胞得到较好的保护，减轻CCl4造成的肝细胞损伤，终止肝细胞变性坏死，抑制肝纤维化的启动因素，使肝细胞再生。     

用于生物人工肝的猪肝细胞三维立体培养

目的　研究猪肝细胞在三维立体培养系统 (中空纤维生物反应器 )中的生长、增殖及功能表达情况 ,探讨肝细胞的生物活性与培养时间之间的关系 ,找出在该培养系统中生物人工肝的有效肝功能支持时段。方法　用体重 5～ 8kg健康杂种小猪作为肝细胞供体。用胶原酶原位灌注法分离肝细胞 ,将分离计数好的肝细胞悬液 ( 5× 1 0 7～ 1 0× 1 0 7·mL- 1 )注入中空纤维管内间隙进行培养。定期对肝细胞的活性、形态、生长情况及功能表达 (白蛋白合成 )情况进行观察和检测。结果　猪肝细胞在中空纤维管培养系统内生长、增殖及功能表达良好 ,能够在长达 35d的时间内保持活力 ,并呈现一定的生长规律。结论　该系统培养的猪肝细胞在第 5～ 2 5天的范围内能够达到生物人工肝支持治疗的要求 ,猪肝细胞—中空纤维生物人工肝在该有效使用时段内可随时应用于实验和临床研究     

肝动脉缺血后供肝组织中氧自由基含量变化及意义

利用犬肝自体原位移植模型，观察了肝动脉缺血（ＨＡＩ）后供肝组织的脂质过氧化物（ＭＤＡ），黄嘌呤氧化酶（ＸＯＤ）和超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）活性变化。结果显示：随着ＨＡＩ时间延长，各指标活性与对照组比较差别显著（Ｐ＜０．０５）；术后血清谷丙转氨酶和胆红素含量增高更为明显（Ｐ＜０．０１），且下降缓慢（Ｐ＜０．０５）。认为，ＨＡＩ对供肝有明显的损伤作用，氧自由基是导致这一损伤作用的重要因素之一。     

清肝饮对大鼠肝纤维化模型胶原纤维和网状纤维的影响

研究中药清肝对大鼠肝纤维化模型胶原纤维和网状纤维的影响。方法以四氯化碳建立大鼠肝纤维化模型,用免疫组化染色,通过图像处理,分析ＣＦ和ＲＦ的面积,并察了肝细胞核／浆比值的变化。结果与造型对照组比较,清肝懈的早期和晚期治疗ＣＦ和ＲＦ平均面积均减少,是早期治疗组的肝细胞核／浆比明显升高。结论清肝饮具有延缓肝纤维化进程,减轻肝纤维化程度的作用。     

犬急性肝衰模型的建立

目的　建立犬急性肝衰模型 ,以进一步探讨应用体外异种全肝灌注治疗急性肝衰的方法与效果。方法　选 7只犬予以戊巴比妥钠 2 5mg·kg-1腹腔注射麻醉 ,分别行一期门腔端侧分流 ,肝周韧带断离 ,膈动脉缝扎。肝动脉血流完全阻断 2h ,制备致死性肝衰模型。术中定时采血测ALT、AST、LDH、PT、FIB、ammonia。取犬肝组织行光镜、电镜观察。结果　 1只犬因麻醉过量致死 ,其余 6只均手术成功。所有犬均在全肝血流完全阻断后 (3～7.5h)死亡 ,平均生存时间 (5 .7± 1.2 )h。随全肝血流阻断时间延长 ,动物血ALT、AST、ammonia、LDH进行性升高 ,PT时间延长 ,PIB减少 ,血压进行性下降。结论　一期门腔分流、全肝血流完全阻断 2h制备犬急性肝衰模型方法简便、可靠。     

分子吸附循环系统人工肝支持治疗重症肝炎患者血流动力学的变化

目的　探讨和评价分子吸附循环系统 (MARS)人工肝支持治疗对重症肝炎血流动力学的影响及其与治疗效果的关系。方法　应用MARS人工肝支持治疗重症肝炎 16例共 36次作为治疗组 ,对照组为 2 0例重症肝炎 ,采用综合治疗 ,两组年龄、性别及肝功能相匹配 ;观察单次治疗前后平均动脉压、心率的变化及与主要生化指征和预后的关系。结果　治疗组存活率较对照组明显提高 ,存活率分别为 6 2 .5 %和 37.5 % (P <0 .0 1) ,单次人工肝治疗前后总胆红素和结合胆红素明显下降 ,分别由 (5 36± 175 )和 (35 2± 113)下降为 (30 1± 10 5 )和 (16 2± 6 3) μmol·L-1,平均动脉压由 (72± 8)mmHg上升为 (81± 7)mmHg(P <0 .0 1) ,心率由 (10 6± 18)下降为 (86± 12 )次·min-1。结论　MARS人工肝能有效的清除有毒代谢物 ,改善血流动力学状况 ,预防或减轻肝肾综合征及肝性脑病     

螺内酯在预防大鼠肝纤维化形成中的作用

目的　探讨螺内酯对实验性大鼠肝纤维化的预防作用及醛固酮在肝纤维化发病中的意义。方法　实验分为正常对照组、肝纤维化组、螺内酯预防组。用复合因素制备肝纤维化模型 ,螺内酯每日按 10 0mg·kg- 1 制成1mL溶液灌胃 ,观察其预防肝纤维化形成的作用。结果　①螺内酯可使纤维化肝组织羟脯氨酸 (HYP)含量明显下降 (P <0 .0 1)。②VG染色、网状纤维染色可见螺内酯预防组肝纤维化程度明显降低 (P <0 .0 1)。③肝纤维化组血清、肝组织ALD水平较正常对照组明显升高 (P <0 .0 5 ) ;螺内酯预防组与正常对照组相比 ,血清、肝组织ALD均升高 (P <0 .0 5 )。结论　螺内酯对肝纤维化的形成有预防作用 ,醛固酮可能参与肝纤维化的形成过程     

硒抗肝纤维化作用的实验研究

以综合法建立大鼠慢性肝损伤模型 ,观察硒对肝羟脯氨酸( Hydroxyproline,Hyp)含量及超微结构影响。结果 :补硒预防组肝 Hyp含量明显低于模型对照组 ( P <0 .0 5 ) ,超微结构显示肝组织内胶原原纤维亦明显减少 ,上述改变与秋水仙素组比较仍有差距。提示硒有一定抗纤维化作用。     

萎缩性胃炎胃泌酸储备功能的研究

采用五肽胃泌素刺激试验对47例慢性萎缩性胃炎（CAG）进行胃液分析，并和49例慢性浅表性胃炎（CSG）进行对照，以测定CAG患者胃酸分泌的储备功能。结果：①CAG患者BAO、MAO和PAO均明显降低，平均壁细胞数4．9亿个。非分泌状态的储备壁细胞3．7亿个。CSG平均壁细胞数8．1亿个，6．5亿个是非分泌状态的储备壁细胞，大约是CAG的1．7倍，表明CAG胃泌酸储备功能降低。②CGG患者胃液分泌量明显减少，但空腹胃液及五肽胃泌素刺激后胃液［H+］和CSG相同，说明CAG现存壁细胞的功能正常。③五肽胃泌素刺激后［H+］及胃液分泌量在CAG和CSG均明显增加，说明H+分泌速率代偿性增强，因此胃泌酸储备功能包括二个方面即壁细胞的数量和壁细胞对H+的分泌速率。     

益气养血保元方对小鼠血清溶菌酶及巨噬细胞活性的影响

实验结果显示:生理盐水对照组小鼠的血清溶菌酶含量(μg/ml)为5.31±0.72,益气养血保元方组为7.02±0.44(P<0.01);生理盐水对照组小鼠的MΦ吞噬率(%)及吞噬指数分别为14.58±2.01和0.1826±0.043;益气养血保元方组分别为52.48±4.12及0.7249±0.1222(P<0.01);益气养血保元方组的MΦ中ANAE及ACPasea活性比生理盐水对照组小鼠明显提高。说明益气养血保元方对小鼠血清溶菌酶活性及巨噬细胞活性有正性作用,提示益气养血保元方具有生物反应调节剂BRMs的作用。     

TREATMENT OF CANINE ACUTE LIVER FAILURE WITH MODIFIED EXTRACORPOREAL PIGLIVER PERFUSION

Acuteliverfailure(ALF)isaseveresymptomcausedbykindsofreasons ,suchaschemicalandvirologicalones.Becauseofthelife threatingcom plicationsofacuteliverfailure ,75 %of patientswilldiewithinafewdaysofonset.TherewasnosatisfactorytreatmentforALFexceptlivertrans plantation .Althoughlivertransplantationissuccess ful,withasurvivalraterangingfrom 6 0 %to80 % [1] .Thereisashortageofavailabledonoror gans.Onlyalittleamountofpatientsreceivedlivertransplantation[2 ] .Sothereisagreatneedforanef fectiveliver…     

心阻抗图对潘生丁试验的评价

本文采用心阻抗图观察92例患者潘生丁试验(DP—T)。结果表明:①冠心病组94%患者的B—X缩短(P<0.01)。Q—B/B—X增大(P<0.01),A波、O波振幅亦增大(P<0.05),A/C、0/C均增大(P<0.01)。②可疑冠心病组69%患者有上述指标变化。③正常对照组3%有上述指标改变。这可能是DP引起冠状动脉窃血所致。并指出采用上述指标观察DP—T诊断冠心病,其敏感性优于心电图及症状学诊断。     

硒对培养人肝细胞的毒性作用

原代培养人胚肝细胞，观察外加不同剂量亚硒酸钠对肝细胞生长代谢的影响。结果表明，当培养液中硒的作用浓度增至1．156×10－6mol／L时，肝细胞聚缩、脱落，丙氨酸转氨酶外释增多，白蛋白合成减少，存活率下降。提示过量硒具有明显的肝细胞毒性作用。     

恶性纤维组织细胞瘤间质肥大细胞与AgNOR定量检测及其预后意义

为探讨恶性纤维组织细胞瘤间质肥大细胞及肿瘤细胞核仁组成区嗜银蛋白（ＡｇＮＯＲ）定量检测与肿瘤恶性度及预后的关系,应用甲苯胺蓝染色法及ＡｇＮＯＲ染色法对４１例资料完整有随访结果的恶性纤维组织细胞瘤手术切除标本进行染色以显示肥大细胞及Ａｇｘｏｎ,常规及体视学方法定量检测。结果：肿瘤与正常组织交界区肥大细胞定量明显高于肿瘤中,Ｃ及正常组织中的肥大细胞定量,并与生存期正相关（ｒ＝０．７３５３,Ｐ＜０．００１）,肥大细胞定量高值组较之肥大细胞定量低值组患者生存期长（Ｐ＜０．０１）,肿瘤无转移组肥大细胞定量高于有转移组（Ｐ＜０．０５）,肿瘤位置浅在组肥大细胞定量高于肿瘤位置深在组（Ｐ＜０．０５）。肿瘤细胞核ＡｇＮＯＲ定量与生存期负相关（ｒ＝－０．６１０７,Ｐ＜０．００１）,ＡｇＮＯＲ定量高值组患者生存期短,肿瘤恶性度高（Ｐ＜０．０１）;肿瘤转移组较光转移组ＡｇＮＯＲ定量高（Ｐ＜０．０５）;肿瘤位置深在组较浅表组ＡｇＮＯＲ定量高（Ｐ＜０．０５）。肥大细胞定量与ＡｇＮＯＲ定量负相关（ｒ＝－０．３５１４,Ｐ＜０．０５）。结论：肿瘤与正常组织交界区肥大细胞及肿瘤细胞核ＡｇＮＯＲ定量与患者生存期密切相关,与肿瘤转移及位置深浅等反?     

NS398对放射抗拒食管癌裸鼠移植瘤的放射增敏作用

目的研究COX-2抑制剂NS398对放射抗拒食管癌细胞裸鼠移植瘤的放射增敏作用。方法采用食管癌细胞悬液裸鼠皮下接种法建立裸鼠移植瘤模型,比较食管Eca109细胞和放射抗拒Eca109R50Gy细胞(接受总剂量50Gy照射)的致瘤能力。选取接种Eca109R50Gy细胞荷瘤裸鼠,随机分为NS398组、放射组、NS398+放射组和对照组。在干预的14d中记录移植瘤体积、重量,计算各组肿瘤抑制率和NS398的放射增敏比值(E/O)。结果 Eca109R50Gy细胞比Eca109细胞裸鼠体内致瘤能力高出40倍。NS398+放射治疗能显著抑制裸鼠移植瘤的生长,体积缩小和瘤重减轻最为明显(P<0.05)。1.5mg/kg NS398的放射增敏比值E/O=1.61(>1.4)。结论 NS398对人食管Eca109R50Gy细胞裸鼠移植瘤具有放射增敏作用,其中更深入的信号传导机制值得进一步研究。