吗啡依赖大鼠及人体组织内吗啡的免疫组织化学研究

为探讨吗啡依赖形成的机理及免疫组化方法对石蜡包理组织内吗啡检测的可行性，对染吗啡大鼠及吗啡依赖人体组织内的吗啡进行了原位免疫组织化学研究。结果表明染毒７ｄ大鼠脑组织内未能检出吗啡，染毒１４ｄ大鼠脑组织内出现了强弱不一的免疫反应。慢性染毒大鼠及依赖人体石蜡切片亦为阳性结果。提示在大鼠吗啡依赖形成过程中，脑组织内吗啡含量增高，且吗啡的分布与卜阿片受体分布一致。免疫组化方法对石蜡包埋组织内吗啡的检测是可行的。     

单克隆抗体DH7识别抗原与胃癌增生及分化的关系

应用免疫组化ＡＢＣ法观察ＤＨ７识别抗原在５３例胃粘膜不典型增生和胃癌组织中的表达，结果显示胃粘膜不典型增生和高分化腺癌的阳性率分别为７／７，９／９，低分化腺癌阳性率为１４／１６，其中高分化腺癌与低分化腺癌的强阳性率分别为７／９和１／１６，两者间具有高度显著性差异。     

人胃癌细胞热耐受性与热休克蛋白70的关系

观察４１℃６０ｍｉｎ温热作用后人胃癌细胞ＢＧＣ－８２３热耐受性和ＨＳＰ７０表达的变化。方法 ４１℃６０ｍｉｎ温热作用后不同时间，测定时间４３℃６０ｍｉｎ温热再作用的克隆形成率，并进行细胞ＨＳＰ７０免疫组化分析。结果：１．４０℃诱导后即时细胞已形成较高的热耐受性，４ｈ有所降低，８ｈ达到高峰。２４ｈ恢复近原有水平；２．ＢＧＣ－８２３细胞常温下表达少量ＨＳＰ７０，并且主要分布于胞浆内；４１℃诱导后即时Ｈ     

无水硫铝酸钙水化热动力学特性的研究

采用具有８０年代国际先进技术性能的热导式Ｃ８０微量热仪，研究了无水硫铝酸钙（Ｃ４Ａ３Ｓ）在ＣａＳＯ４。２Ｈ２Ｏ存在条件下的水化反应热动力学特性，并与硅酸盐水泥水化热动力学特性作了分析和比较。热谱曲线分析表明Ｃ４Ａ３Ｓ的水化历程可以分三个阶段：１）水化加速期（１５～５０ｍｉｎ）；２）水化减速期（５０～１４０ｍｉｎ）；３）受扩散控制期（１４０ｍｉｎ后）。文中还按数学模型计算了Ｃ４Ａ３Ｓ的最终水化热（Ｐ     

混凝活性炭吸附微生物法治理洗涤废水

探讨了采用混凝剂ＰＡＣ处理洗涤废水的最佳操作条件：投量为３００－４５０ｍｇ／Ｌ，ＰＨ为７左右，时间为５ｍｉｎ，出水ＣＯＤ〉２００ｍｇ／Ｌ，外观清澈透明，进一步用活性炭吸附固定微生物法处理混凝土出水，工作参数，曝气１２０ｍｉｎ左右，水力停留时间４ｈ，间隔停运３ｈ，出水外观清澈透明，ＣＯＤ〈５０ｍｇ／Ｌ，ＰＨ为６．５－７．５，无剩余污泥产生，水质达到中水指标。     

核受体免疫组织化学染色时抗原修复方法的选择

目的 探讨不同抗原修复法对DA.1U大鼠肝组织内核受体检测结果的影响.方法 应用微波修复法、高压修复法、酶修复法和高压加酶修复法对DA.1U大鼠肝组织切片进行修复,然后进行免疫组化染色.结果 DA.1U大鼠肝组织内核受体LXR-α、LXR-β、PPAR-γ和FXR经高压抗原修复后,染色阳性强度较其他修复方法明显增强,而且定位较佳.结论 在核受体免疫组化染色中高压抗原修复法染色效果优于其他抗原修复法.     

人体硬组织DNA遗传多态性的研究

用ＰＣＲ扩增片段长度多态性技术分析了３０５名汉族人群ＶＮＴＲ位点ＤＩＳ８０、Ｄ１７Ｓ３０遗传多态性，结果发现：ＤＩＳ８０有２２个等位基因，基因频率０．５７～３３．１４，杂合度８２．６３％；Ｄ１７Ｓ３０有１３个等位基因，基因频率０．７８～３５．８８，杂合度８２．６３％。家系分析证实，这些ＶＮＴＲ位点等位基因遗传符合孟德尔遗传规律。同时对同一个体的血－骨、血－牙样本ＤＮＡ进行研究，均获得一致性分析结果。表明骨牙ＤＮＡ分析完全可以代表软组织的基因分析应用于个体识别和遗传学研究等领域。     

Becker型肌营养不良一家系分子遗传学研究

目的 应用分子遗传学方法对患者在基因水平上作出诊断。方法 应用ｄｙｓｔｒｏｐｉｎ ｃＤＮＡ１４ｋｂ探针（包括６个亚探针１－２ａ，２ｂ－３，４－５ａ，５ｂ－７、８、９－１４）与一名１８岁的临床表现温和肌营养不良患者及２例对照者（１例正常２５岁男性及１例１２岁ＤＭＤ患者）的基因组ＤＮＡ／Ｈｉｎｄ Ⅲ片段进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析。结果 前者在与亚探针５ｂ－７杂交中，发现其１．５ｋｂ，０．５ｋｂｖｓｕ     

母、脐动脉血血气分析与新生儿Apgar评分关系的研究

监测１００例母Ａ血和脐Ａ血血气分析和新生儿出生１ｍｉｎＡｐｇａｒ评分相关变化。结果：①随着新生儿评分的降低，母Ａ血和脐Ａ血的ｐＨ值、氧分压、碳酸氢根、二氧化碳总量、实际碱剩余等均显著下降，而二氧化碳分压则明显增加，和混合性酸碱失衡与低氧血症显著增加（Ｐ＜０．０１）；②脐Ａ血ｐＨ≤７．２０者，评分在≤３分者为８０％。４～７分者为２０％，＞７分者无１例，差异有显著意义（Ｐ＜０．０１）。     

生长激素对离体大鼠缺血再灌注心脏泵功能的影响

目的 应用离体大鼠心脏缺血再灌注模型观察基因重组生长激素（ＧＨ）对缺血再灌注心脏泵功能的影响。方法 大鼠随机分为二组，分别每天皮下注射ＧＨ０．５ＩＵ／ｋｇ（ＧＨ组）或等量生理盐水（对照组），７ｄ后进行离体心脏缺血再灌注，分别测定缺血前、后再灌注１０ｍｉｎ、３０ｍｉｎ的心脏泵功能指标和冠脉流量的恢复率。结果 ＧＨ组离体心脏缺血前基础水平的左室收缩峰压（ＬＶＳＰ）、收缩期左室压力上升速度峰值（＋ｄｐ／     

环氧氯丙烷对组织工程心脏瓣膜构建中基质金属蛋白酶1、3表达的影响

目的探讨环氧氯丙烷对组织工程心脏瓣膜构建中基质金属蛋白酶-1、3(matrix metalloproteinase-13、,MMP-1、3)表达的影响。方法采用去垢剂和胰蛋白酶消化制备的脱细胞猪主动脉瓣膜支架作为对照组,用30 g/L环氧氯丙烷处理24 h的去细胞支架材料作为实验组。将培养的人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymalstem cells,hBMSCs)种植于脱细胞支架上的组织工程心脏瓣膜(tissue engineering heart valve,TEHV),分别行石蜡包埋切片HE染色和扫描电镜观察TEHV的组织结构,并行RT-PCR测定hBMSCs分泌MMP-1、3的功能。结果hBMSCs在实验组脱细胞瓣膜表面生长良好,MMPs的表达比对照组降低。结论环氧氯丙烷处理的脱细胞猪主动脉瓣膜支架,可以抑制hBMSCs的MMP-1、3的表达。     

垂体移植对去垂体大鼠的生理功能和靶腺的影响

将体重１５０ｇ～２００ｇ的ＳＤ大鼠随机分成４组，Ⅰ：对照组，Ⅱ：去垂体组，Ⅲ：肌肉移植组，Ⅳ：第Ⅲ脑室移植组。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组术后３０ｄ的死亡率分别为５０％、１６．７％、３０％，６０ｄ的存活率分别为１１．８％、６６．７％、６０％。结果提示：垂体移植可提高去垂体大鼠的应激性，并延长寿命。在２个半月的时间内，Ⅰ组体重增加１５８．６±５７．２ｇ，Ⅱ组减少３８．５±１１．２ｇ，相反在肌肉和第Ⅲ脑室移植垂体后Ⅲ组体重增加４７．０±３４．３ｇ，Ⅳ组增加５４．８±３６．２ｇ。这说明：植入二部位的垂体可分泌几乎等量的ＧＨ，但其量还远未达到正常水平。Ⅰ组体温波动于３８．１±０．１３℃，而Ⅱ组降低１．８℃，但在移植垂体后，Ⅲ、Ⅳ组的体温均有回升。冷应激试验表明：Ⅰ组的体温均在１．５ｈ内恢复，而Ⅱ组在６ｈ尚未恢复，但Ⅲ、Ⅳ组的体温均在大约２．５ｈ内得以恢复。Ⅲ、Ⅳ组肾上腺、性腺的重量较Ⅱ组明显增加，但仍较Ⅰ组有所减少。在形态上，Ⅱ组的肾上腺、性腺均严重萎缩，但在Ⅲ、Ⅳ组均有一定程度的恢复。由于技术上的原因，在肌肉内未找到移植的垂体，但在第Ⅲ脑室都可看到成活的垂体，其细胞形态正常。ＲＩＡ技术测定表明：Ⅲ组血中的ＴＳＨ接近正常水平。     

DIG－DNA探针检测宫颈癌组织中HPV－16的E_7转化基因

应用地高辛配基（Ｄｉｇ－１１－ｄＵＴＰ）标记人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ－１６）Ｅ７转化基因作探针，分别检测了宫颈癌活检组织、宫颈炎及正常宫颈脱落细胞ＤＮＡ。其检出率为：宫颈癌中４２．１％（２４／５７）、宫颈炎中２．５％（１／３９）、正常宫颈中５．５％（１／１８）。宫颈组织中ＨＰＶ－１６Ｅ７转化基因的检出率较高，提示该转化基因与宫颈癌的发生可能密切相关。本研究也证实ＤＩＧ配基标记的Ｅ７基因探针具有特异、敏感、安全、稳定和能反复使用的优点，适合基层使用。     

牙周膜牵张成骨正畸牙快速移动规律与牙根组织变化的光镜观察

目的　观察正畸牙快速移动时移动牙支抗牙的移动规律及移动牙根的组织学变化。方法　杂种犬 8只 ,随机分为 7、14、2 1、44d四组。拔除下颌两侧第二前磨牙 ,实验侧实施减阻 牵张措施 ,加力 14d ,停止加力固定 30d ;对照侧仅行拔牙术。于 1、7、14、2 1、44d时测量移动牙支抗牙移动距离 ,观察移动规律 ;7、14、2 1、44d时取材 ,常规石蜡包埋、切片 ,HE染色光镜观察移动牙根的组织学变化。结果　加力 14d ,移动牙移动呈直线上升趋势 ,支抗牙移动呈前 7d的直线上升和后 7d的平台趋势 ;加力期间 ,移动牙牙根牙骨质无明显吸收 ,根部牙槽骨稍有吸收 ,固定 30d后 ,牙根组织结构基本恢复正常。结论　牙周膜牵张成骨快速牙移动过程中 ,移动牙移动规律与常规方法不同 ,支抗牙移动规律与之相同 ;移动牙的快速移动不会造成牙根的广泛吸收。     

Zfhag的锌指结构和同结构域的基因重组、表达和功能研究

报道了成功地亚克隆Ｚｆｈａｇ的锌指结构和同结构域基因，并将其在细菌体内表达成麦芽糖结合蛋白的融合蛋白的方法和结果，使用这些表达蛋白进行了蛋白－ＤＮＡ相互作用的研究。结果表明：ＭＢＰ－ＺＤ１和ＭＢＰ－ＺＤ２蛋白能与糖蛋白激素的α亚基基因、鼠生长激素（γ－ＧＨ）基因和促甲状腺激素β亚基（ＴＳＨ－β）基因的甲状腺激素反应成分（ＴＲＥ）结合，而不能结合含有天然ＴＲＥ的ＭＨＣ和Ｆ２Ｈ基因，及含有合成ＴＲＥ的ＤＲ４和ＰＡＬ寡核苷酸。     

痤疮患者血清多种激素水平异常的分析

探讨痤疮中各种性激素异常的特点，进一步探讨各种激素在痤疮发病中的意义，方法用放射免疫法测定患者血清中黄体生成素（ＬＨ）、卵泡刺激素（ＦＳＨ）１孕激素（Ｐ、）雄激素（Ｔ）、脱氢表雄酮（ＤＨＥＡ）、雌二醇（Ｅ２）、雌三醇（Ｅ３）的水平。结果睾酮水平高于正常的女性占１０．３％，男性占８．５％有部分男性睾酮水平低于正常占５．７％，脱氧表雄酮高于正常的女性占１０．８％，男性则未见异常。主捕雄酮同时高于正常的     

氨基胍对兔骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

目的研究氨基胍对兔骨关节炎软骨细胞凋亡的影响。方法将32只兔子随机分组,正常组未采取任何处理,氨基胍组及模型组行右后肢伸直位管型石膏固定造模,氨基胍组腹腔内注射100 mg/(kg.d)氨基胍硫酸盐溶液,模型组每天腹腔内注射相同体积的生理盐水。分别于4周和8周处死动物,留取标本观察软骨大体形态,切片HE染色观察镜下形态,免疫组化检测iNOS表达,TUNEL法原位检测凋亡。结果与模型组相比,氨基胍组在大体形态、HE切片镜下形态接近于正常组,组化染色显示iNOS表达阳性细胞数显著减少(P<0.05),TUNEL法原位检测显示凋亡阳性细胞数显著减少(P<0.05)。结论氨基胍能有效减少iNOS表达和软骨细胞的凋亡,延缓OA的病情发展。     

套式RT-PCR检测肾综合征出血热病毒方法的建立及应用

针对汉坦病毒（Ｈａｎｔａｎｖｉｒｕｓ,ＨＶ）中国代表株（Ａ９、Ｒ２２）Ｍ基因片段设计分型引物（Ⅰ、Ⅱ型）,采用改进的异硫氰酸胍酚一步法（胍酚法）提取汉坦病毒ＲＮＡ,套式ＲＴ－ＰＣＲ检测稀释病毒上清,模拟病人血清和２０例急性期（１～７ｄ）血清样本。结果：能检测到模拟血清中少至几个ＰＦＵ病毒ＲＮＡ,敏感性５～１０ｆｇ。检测过程可在５ｈ内完成。２０例急性期患者血清检测阳性率为１００％,并能进行临床分型。扩增产物经打点杂交证实其特异性。而正常及非ＨＦＲＳ患者血清结果均为阴性。提示：套式ＲＴ－ＰＣＲ基因诊断技术优于传统的ＭａｃＥＬＩＳＡ、ＩＦＡＴ和ＲＰＨＩ诊断法。     

导向激光捕获显微切割技术在贲门腺癌差异蛋白质组学的应用研究

目的建立一套适用于贲门腺癌差异蛋白质组学研究的导向激光捕获显微切割技术(navigated laser capture microdissection,NLCM)方法,并探讨其可行性。方法比较染色剂和固定剂对蛋白质影响的差异,探讨不同处理条件下贲门腺癌和癌旁组织切片的镜下组织学特点,改进常规LCM,建立在染色切片指引下分离细胞的NLCM技术,并通过双向凝胶电泳分析对该技术进行评价。结果染色剂对蛋白质的影响大于700mL/L乙醇固定剂;光镜下在不染色的组织切片上,贲门腺癌细胞、肠化生细胞和正常柱状上皮细胞都有其各自的形态特异性,易于辨认;NLCM可以准确纯化贲门腺癌细胞、肠化生细胞和正常柱状细胞;LCM的苏木素染色贲门腺癌细胞(A组)、NLCM的无染色贲门腺癌细胞(B组)和未切割的新鲜贲门腺癌组织(C组)的双向电泳表达图谱非常相似。各组蛋白质点的数量之间差异无统计学意义(P>0.05)。A组碱性端蛋白等点聚焦较差,部分蛋白质点的表达量减低或消失,B组双向电泳表达图谱蛋白质点分离较好。结论 NLCM不但可以快速、准确地将贲门腺癌及其癌前病变细胞进行分离,而且有效避免了染色剂对蛋白质提取质量的影响,是一项适用于贲门腺癌蛋白质组学研究的样品制备方法。     

肠功能恢复汤对肠缺血-再灌注损伤大鼠肠黏膜屏障的影响

目的观察肠功能恢复汤对肠缺血-再灌注损伤大鼠肠黏膜屏障的影响,探索多器官功能障碍综合征的新的防治途径。方法SD大鼠45只,随机分为3组:正常对照组、肠缺血-再灌注损伤模型组、肠功能恢复汤治疗组,分别检测各组血清中二胺氧化酶(DAO)和D-乳酸含量,收集小肠灌洗液并测定灌洗液中的溶菌酶含量,同时取肠系膜静脉血、肠系膜淋巴结、肝及脾组织进行细菌培养,观察细菌移位情况,取回肠组织制成石蜡切片,HE染色光镜下观察,测量小肠黏膜厚度、绒毛高度和隐窝深度,取回肠组织制成电镜标本,透射电镜观察。结果肠功能恢复汤组与模型组相比,血清中DAO和D-乳酸含量均显著降低(P<0.01),小肠灌洗液中溶菌酶含量显著升高(P<0.01),细菌移位率显著降低(P<0.01)。肠功能恢复汤组小肠黏膜的病理形态明显好于模型组。结论肠功能恢复汤对肠缺血-再灌注损伤大鼠的肠黏膜屏障具有保护作用。