结核多表位DNA疫苗免疫效果及其对小鼠耐药结核病的疗效观察

目的研究比较结核分枝杆菌Hsp70、Ag85A、ESAT-6多表位DNA疫苗和卡介苗(BCG)的免疫效果,观察该疫苗联合抗结核药物治疗耐药结核病小鼠的疗效。方法随机将BALB/c小鼠分成A、B、C组,分别用PBS、BCG和多表位DNA疫苗经皮下免疫,1、3、5周各免疫1次。免疫后眼球采血,分离血清,用酶联免疫吸附试验(ELISA)间接法测定特异性IgG抗体,用ELISA双抗体夹心法测定IL2和IFN-γ;同时分离小鼠脾细胞,用MTT法测定淋巴细胞增殖指数。为观察多表位疫苗的疗效,小鼠尾静脉注射结核分枝杆菌双耐菌株(耐利福平和耐异烟肼),4周后将感染模型小鼠随机分成D、E、F 3组,其中D组为阴性对照,注射生理盐水;E组用利福平、异烟肼治疗;F组为联合用药组,用结核分枝杆菌Hsp70、Ag85A、ESAT-6多表位DNA疫苗和利福平、异烟肼联合治疗,疗程均为10周。治疗结束后称取小鼠体重,取其肺、肝、脾,称取质量,并作肺和脾脏菌落计数。结果多表位DNA疫苗组小鼠血清特异性IgG抗体、IL2、IFN-γ和淋巴细胞增殖指数均明显高于PBS组和BCG组(P<0.05);多表位DNA疫苗联合抗结核化疗药能明显降低耐药结核病小鼠肺、脾菌落计数和肺、肝和脾脏指数(P<0.05)。结论结核分枝杆菌Hsp70、Ag85A、ESAT-6多表位DNA疫苗能在小鼠体内诱导较强的特异性免疫反应,产生高水平的特异性IgG抗体、诱导IL2和IFN-γ分泌和特异性淋巴细胞增殖,并能显著提高抗结核药物对耐药结核病小鼠的疗效。     

慢性阻塞性肺疾病患者的血清差异表达蛋白分析

目的应用液体芯片-飞行时间质谱技术从慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者的血清中找出差异表达蛋白,筛选出其蛋白多肽(m/z)的疾病标志物。方法应用液体蛋白芯片(MB-WCX)结合飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对16例病理确诊的COPD患者和32例正常对照人群进行血清蛋白组分析。采用ClinProTools软件进行蛋白多肽的组间差异对比,共获得115个蛋白多肽峰图,其中24个蛋白多肽峰图具有极显著差异(P<0.001),其中10个蛋白多肽在COPD患者中表达下调,其余14个蛋白多肽在COPD患者中表达上调。两组数据中最大差异的两个蛋白多肽峰分别是m/z:1 012.92和m/z:4 152.85。结论利用液体芯片-飞行时间质谱技术可以从COPD患者的血清中获得稳定丰富的蛋白多肽图谱,并且能够筛选出潜在的疾病标志物。     

血清胃泌素释放肽前体和神经元烯醇化酶在小细胞肺癌早期诊断中的价值及其相关性

目的探讨胃泌素释放肽前体(progastrinreleasingpeptide,ProGRP)和神经元烯醇化酶(neuronspecificenolase,NSE)在小细胞肺癌(smallcelllungcancer,SCLC)早期诊断中的作用及两种标志物之间的相关性。方法分别应用双抗体夹心ELISA法和电化学发光免疫法测定了63例SCLC、41例良性肺疾病及40例非小细胞肺癌(nonsmallcelllungcancer,NSCLC)患者血清中ProGRP和NSE的水平。结果单个检测ProGRP、NSE及联合检测ProGRP和NSE(ProGRP+NSE)诊断SCLC的特异性分别为88.89%、80.25%及66.67%,敏感性分别为73.02%、63.49%及84.13%;NSCLC中ProGRP和NSE的敏感性分别为12.5%和22.50%;ProGRP+NSE诊断SCLC的敏感性明显高于NSE(P<0.01),但和ProGRP相比,两者差异无显著性(P>0.05);NSE诊断早期SCLC的敏感性仅36.84%,ProGRP及ProGRP+NSE诊断早期SCLC的敏感性分别为63.16%和73.68%,和晚期SCLC(分别为77.27%及88.64%)相比,均无显著性差异(P>0.05);在SCLC中,ProGRP和NSE的相关性较强(χ2=5.00,P<0.05)。结论NSE对SCLC早期诊断价值有限;ProGRP及ProGRP+NSE可能是肺癌分型及SCLC诊断,尤其是早期诊断的较好指标。     

聚合酶链反应早期诊断结核性关节炎的临床价值

目的　探讨聚合酶链反应 (PCR技术 )对诊断结核性关节炎的临床价值。方法　对 42例结核性关节炎与 2 0例非结核性关节炎的关节积液分别应用抗酸染色镜检 ,分离培养和PCR检测。结果　 42例结核性关节积液三种方法的检出率分别为 :镜检法 1 9 0 % ,培养法 38 1 % ,PCR法 66 7% ,后者显著高于前二者 (P <0 .0 1 )。 2 0例非结核性关节积液抗酸染色镜检和分离培养结果均为阴性 ,PCR阳性率 1 0 %。结论　PCR技术检测关节积液中的结核杆菌具有快速、敏感和高效等优点 ,对关节结核的早期诊断和鉴别诊断具有重要价值     

58例达芬奇机器人系统辅助肺部手术的临床分析

目的探讨及总结采用达芬奇机器人系统行肺部手术的初期经验。方法回顾性收集西安交通大学第一附属医院胸外科行达芬奇机器人手术系统辅助肺部手术病例的临床资料并进行统计分析。结果 2016年3月-2017年11月我院应用达芬奇机器人系统行肺部手术58例,其中男42例,女16例,年龄25～79(59±11)岁。所有病例均顺利完成机器人手术,包括肺叶切除41例,肺段切除7例,肺楔形切除6例,肺袖式切除2例,联合肺段切除、楔形+肺段各1例;术后病理诊断为良性病变17例,肺癌41例;手术时间分别为,肺叶切除(169.93±66.88)min,肺段切除(165.43±56.37)min;术中清扫淋巴结5～26(15.1±8.7)枚;术后留置胸腔引流管2～15(6.0±2.6)d,术后住院时间2～21(7.95±3.23)d。除1例患者出现支气管胸膜瘘接受二次手术外,余均无严重术后并发症,顺利出院。患者住院期间总费用为32 015.57～127 087.89(78 483.19±15 925.18)元。结论达芬奇机器人系统辅助肺部手术在具有丰富常规胸腔镜手术经验的医疗中心可顺利开展,其效果安全、可行,并且在一些复杂操作中具有优势,但是相对昂贵的费用是限制其使用的一个重要因素。     

5种血清学标志物对急性呼吸窘迫综合征的诊断和预后预测价值

目的探讨血管生成素2(Ang-2)、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原(KL-6)、肺表面活性蛋白D(SP-D)、血管性血友病因子(vWF)、白介素8(IL-8)在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者外周血水平变化和对ARDS诊断、预后预测的临床价值。方法选择两个医学中心重症医学科49例ARDS患者,同期50例非ARDS患者(对照组)作为研究对象,检测入科时(T_1)、诊断为ARDS时(T_2)血清标志物水平,记录临床基本资料。结果 ARDS组5种标志物水平较对照组增高(P<0.05),且T_2时间点高于T_1(P<0.05);除vWF(P>0.05)外,ARDS死亡组(n=17)标志物水平均高于存活组(n=32)。受试者工作特征曲线分析表明,单一标志物(T_1)诊断ARDS的最大曲线下面积(AUC)为0.816(95%CI:0.730, 0.902)(KL-6),联合诊断最大AUC为0.869(95%CI:0.795, 0.942)(KL-6+Ang-2);单一标志物(T_2)预测死亡的最大AUC 0.764(95%CI:0.627, 0.901)(IL-8),联合预测最大AUC 0.829(95%CI:0.715, 0.943)(IL-8+KL-6)。结论 5种血清标志物与重症患者ARDS的发生及预后密切相关。血清KL-6和Ang-2水平变化有助于诊断,血清IL-8与KL-6水平升高预示预后不良。     

p16INK4/CDKN2在胆囊癌中的表达及临床意义

为明确p16基因及其产物在胆囊恶性肿瘤中表达的意义，用免疫组化ABC法对46例胆囊癌p16INK4／CDKN2表达进行检测，结果表明：p16INK4／CDKN2在良性病变中的阳性率高于胆囊癌（P＜0．05）。该蛋白的失活或缺失主要见于肿瘤的中、晚阶段，与胆囊外浸润和淋巴转移密切相关（P＜0．01），与肿瘤的病理类型及分化程度无关（P＞0．05）。检测p16INK4／CDKN2对临床正确地估计肿瘤的侵袭性、淋巴转移潜能及判断预后具有重要价值。     

呼吸阻抗对慢性阻塞性肺疾病的诊断价值

目的　探讨呼吸阻抗对慢性阻塞性肺疾病 (COPD)的诊断价值。方法　用脉冲振荡法 (IOS)对 117例COPD患者进行呼吸阻抗测定并与常规肺通气功能比较。结果　COPD患者 5～ 35Hz振荡频率时黏性阻力和共振频率较健康组明显增高 ,5、35Hz时电抗明显低于健康组。COPD组除X5与常规肺通气功能指标呈显著正相关外 ,Fres、R5、R5-R2 0 均与其呈显著负相关。Fres与FEV1 pred .和FEV1 FVC %相关性最密切 ,相关系数分别为 - 0 .6 3和 - 0 .6 2。Fres诊断COPD敏感度最高 ,其次为R5、X5,并随病情加重 ,敏感度不断提高。三项指标的特异度分别为 90 .91%、95 .4 5 %和 93.18%。结论　IOS法所测COPD患者Fres、R5、R5-R2 0 、X5与传统肺通气功能指标有显著的相关性 ,其中Fres是诊断COPD最敏感的指标     

五种血清肿瘤标志物单个或联合检测在肺癌诊断中作用的初步评价

目的初步评价细胞角蛋白19的片段(Cyfra21-1)等5种肿瘤标志物单个或联合检测在肺癌诊断,尤其是早期诊断中的作用。方法采用电化学发光免疫法检测了124例肺癌和41例非肿瘤肺病患者血清中Cyfra21-1、癌胚抗原(CEA)、神经元烯醇化酶(NSE)、糖链抗原19-9(CA19-9)及鳞状细胞抗原(SCCAg)等五种标志物的水平。结果CEA特异性最高,达97.56%,Cyfra21-1最低,为73.17%;CEA、Cyfra21-1及NSE的敏感性分别在腺癌、鳞癌、小细胞肺癌中最高(分别为68.29%、62.30%、66.47%);Cyfra21-1、NSE在早期和晚期肺癌中的敏感性无显著性差异(P>0.05)。联合检测Cyfra21-1+CEA诊断肺癌的特异性和敏感性分别为70.73%和66.13%;同时检测3或4个标志物可提高诊断的敏感性,但特异性却明显降低;Cyfra21-1+CEA、Cyfra21-1+CA19-9诊断早期和晚期肺癌的敏感性无显著性差异(P>0.05)。结论作为肺癌筛查指标,上述标志物均不理想;CEA>10μg/L对肺癌,尤其是腺癌的定性诊断有较大价值;Cyfra21-1和NSE分别是鳞癌和小细胞肺癌较好的标志物,两者在肺癌早期诊断中均可能有一定价值。Cyfra21-1+CEA可能是诊断肺癌(包括早期)的一个较佳组合。     

BALF中SOD和溶菌酶检测对肺癌的诊断意义

对７４例肺癌和７６例良性肺病患者进行了血清及支气管肺泡灌洗液（ＢＡＬＦ）中超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）和溶菌酶（ＬＺＭ）的测定，结果表明：①肺癌患者血清及ＢＡＬＦ中ＳＯＤ水平明显降低，以癌患侧ＢＡＬＦ中ＳＯＤ降低最明显，阳性率为７１．８％。腺癌较鳞癌及小细胞癌低，周围性肺癌较中央型低，Ⅲ、Ⅳ期较Ⅰ、Ⅱ期低。②肺癌患者血清及ＢＡＬＦ中ＬＺＭ水平降低，阳性率为４６．３％和５９．７％。小细胞癌降低最明显，晚期肺癌较早期更低。③ＳＯＤ和ＬＺＭ联合检测诊断肺癌的价值明显优于单项指标检测，其敏感性、特异性分别高达８７．８％和８９．５％。提示：通过血清及ＢＡＬＦ中ＳＯＤ和ＬＺＭ联合检测对肺癌早期诊断、病理分型及预后判断有一定意义。     

乳腺结核23例报告

乳腺结核属于少见疾患,临床医生易将其误诊为乳腺癌或乳腺脓肿.乳腺结核好发于20～40岁的妇女.它可分为原发性和继发性两种.结核杆菌侵入乳腺有三种途径:血运、淋巴扩散和直接侵入.乳腺结核分为结节型,弥散型和硬化型。乳腺结核的诊断是困难的.确诊的方法有穿刺液的细菌培养、组织学检查和豚鼠的接种试验.鉴别诊断包括:乳腺癌,形成脓肿的急、慢性乳腺炎和放线菌病.治疗采取手术和抗结核药物的联合应用.     

电子阴道镜结合HPV16、18及沙眼衣原体检测对宫颈上皮内瘤样病变的诊断价值

目的　通过对电子阴道镜检查宫颈上皮内瘤样病变(CIN ),以及 HPV16、18 型、沙眼衣原体与 CIN关系的研究,探讨电子阴道镜结合HPV16、18及沙眼衣原体检测对 CIN的诊断价值。方法　采用电子阴道镜观察宫颈形态,PCR法检测宫颈组织中HPV16、18及免疫层析法检测宫颈分泌物中沙眼衣原体(CT),并与病理检查结果对照分析。结果　电子阴道镜诊断CIN的灵敏度为67%,特异度为75%,阳性预测值63%,阴性预测值78%;HPV16、18阳性病例中CIN的发生率显著高于阴性病例,电子阴道镜诊断CIN的准确率在 HPV16、18 阳性病例中显著高于阴性病例,在CT阳性与阴性病例间无显著性差异。结论　电子阴道镜适合作为CIN的诊断方法; HPV16、18 检测可作为诊断CIN的方法之一,与电子阴道镜结合可提高诊断的准确率,电子阴道镜结合CT检测对诊断CIN帮助不大。     

结核患者不同标本中结核杆菌DNA的检测

为提高不典型结核患者的诊断符合率，寻求结核病理想的实验室诊断技术，运用聚合酶链反应技术对60例结核病患者7种（125份）不同标本中的结核杆菌DNA进行了检测。结果显示疾液、胸水中的DNA阳性率较高（分别为54％、49．25％），血清中的DNA阳性率仅为28％（P＜0．05），其原因主要与不同标本中存在的结核杆菌数目的多少有关。同一标本被检测两次（复检），阳性例数较前有所提高，这样可使某些假阴性结果得到及时纠正。如果同一患者多种标本检测结果同时为阳性，则更支持结核病的诊断。     

Diagnostic value of diffuse and peripheral lung lesions by transbronchial lung biopsy

Objective To evaluate the diagnostic value of transbronchial lung biopsy (TBLB) via bronchoscope for lung diffuse lesions and peripheral pulmonary lesions. Methods The results of TBLB were retrospectively analyzed from 256 diagnoses of unknown patients with lung diffuse lesions or peripheral lung lesions. Results Eighty-nine final diagnosis cases via TBLB only once, the diagnostic rate of double lung diffuse lesions was the highest, [51.06% (24/47)], local non-nodule lesions, nodule lesions, cavity lesions were 33.33%(23/69), 29.91%(35/117), and 28.57%(4/14), respectively. Among 24 diagnostic cases of double lung diffuse lesions, there were 6 cases of pneumonia of pulmonary tuberculosis, 9 cases of lung carcinoma, 7 cases of adenecarcinoma; 6 cases of pneumonia, 2 cases of fungous infection, and 1 case of lung hemosiderusis. The diagnostic yield about 58 cases of local lesions was low, among which non-nodule lesions accounted for 33.33% and nodule lesions accounted for 29.91%. In 89 cases of peripheral lung lesions with histological diagnosis, lung carcinoma and pulmonary tuberculosis were frequent diseases, which accounted for 86.52%. Conclusion TBLB is a reliable, safe, effective and repeatable operation method in diagnosis of lung diffuse lesions and peripheral pulmonary lesions.     

蛋白芯片技术对8种自身抗体的检测及其评价

目的　研究蛋白芯片技术对自身抗体检测的敏感性及特异性,探讨其对自身免疫性疾病的鉴别诊断价值,并对其方法学进行评估。方法　用胶体金标法、间接免疫荧光法及蛋白芯片法检测抗 ds- DNA;用免疫印迹法、蛋白芯片法检测抗Sm 、抗u1RNP 、抗SSA、抗SSB 、抗Rib- P、抗 Jo -1及抗 Scl- 70 7 种自身抗体,对检测结果进行统计学分析。结果　抗dsDNA抗体检测,蛋白芯片法优于胶体金标法 (P<0.01);皮肌炎和多发性肌炎(DM/PM)组 Jo -1 抗体(P<0.01)、混合性结缔组织病(MCTD)组u1RNP抗体(P<0.01)、硬皮病(PSS)组 Scl- 70 抗体(P<0.05),蛋白芯片法与免疫印迹法检测结果存在显著性差异;在 DM/PM组、PSS组、MCTD组,蛋白芯片法与免疫印迹法对自身免疫性疾病的鉴别诊断有显著性差别(P<0.05)。4种方法的总体敏感性依次为蛋白芯片法、免疫印迹法、间接免疫荧光法、胶体金标法。结论　蛋白芯片法检测项目多、简便快速、敏感性好、特异性强、分析客观,值得推广使用。     

放射免疫分析法检测血清癌胚抗原对肺部良恶性病变的诊断价值

目的总结分析放射免疫分析法检测血清癌胚抗原(CEA)对肺部良恶性疾病的诊断价值。方法采用碘[125I]放射免疫分析法对经病理诊断的331例肺癌和98例结核病患者血清CEA进行对照检测。结果肺癌患者血清CEA阳性率为29.61%,显著高于结核病患者(P<0.01);血清CEA对肺癌诊断的灵敏度为29.61%,特异度100%,阳性预测值为100%,阴性预测值为29.61%;其中肺腺癌血清CEA阳性率最高(54.55%),CEA浓度也最高,以上两参数与小细胞肺癌(SCLC)和鳞癌相比均有显著性差异(P均<0.01);CEA阳性率在早中期及晚期肺癌无显著性差异,但CEA浓度伴随肿瘤分期愈晚浓度越高,差异有统计学意义(P<0.01)。结论放射免疫分析法检测血清CEA浓度特异度高,对肺癌的诊断、病情评估有重要参考价值。     

法国梧桐花粉的部分纯化及其主要变应原免疫活性分析

目的　对法国梧桐花粉变应原进行部分纯化并对其主要变应原免疫活性进行分析。方法　采用凝胶层析法分离纯化法国梧桐花粉变应原 ,经SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳检测收集到的主要峰段的蛋白质分子质量 ,并对 7例法国梧桐花粉过敏支气管哮喘患者血清进行免疫印迹分析。结果　法国梧桐花粉变应原粗制液经SephadexG 10 0层析柱洗脱得两个洗脱峰 ,第一峰及第二峰升段富含蛋白 ;收集各段进行SDS PAGE电泳 ,第一峰升段、峰段、降段电泳图相似 ,主要含分子质量为 2 2～ 71ku之蛋白质 ,第二峰升段以分子质量为 14～ 16ku之蛋白质为主。电泳结果清晰显示 6条蛋白区带 ,分子质量分别为 71、5 0、35、39、2 2、16ku。免疫印迹分析可见 4条sIgG反应带 ,分子质量为 5 0、39、2 2、16ku。结论　法国梧桐花粉变应原含 6种主要蛋白成分 ,第一峰蛋白质含量高 ,为主要致敏组分 ;第二峰蛋白质含量少 ,为次要致敏组分。     

~(99)Tc~m-HL91在肺部肿瘤诊断中的临床价值

目的　应用99Tcm HL91进行肺部肿瘤阳性显像 ,探讨其在肿瘤良恶性诊断中的临床应用价值。方法　对 42例高度怀疑肺部肿瘤的患者注射99Tcm HL91后行 2h、4h平面显像及 4hSPECT/CT断层融合显像 ,使用ROI技术计算肿块与对侧正常肺组织的比值 (T/N)。结果　恶性组在 2h、4h平面及 4h断层图像上T/N值分别为 1.50±0 .17、1.71± 0 .2 2、2 .72± 0 .75,良性病变组分别为 1.2 1± 0 .10、1.2 5± 0 .2 2、1.49± 0 .3 6,各组间均有显著性差异 (P均 <0 .0 1) ;恶性组 4h延迟平面像组较 2h组T/N比值明显增高 (P <0 .0 1) ,而良性组无明显增高 (P >0 .0 5) ;各病理类型各时相之间无显著性差异 (P <0 .0 5) ;以恶性组横断层T/N值 x -1s为诊断阈值 ,其诊断灵敏度、特异度、准确性分别为 84.85%、88.89%和 85.71% ;以良性组 x + 1s为诊断阈值 ,灵敏度、特异度及准确性分别为 90 .91%、88.89%和 95.2 4%。结论　99Tcm HL91作为一种肿瘤阳性显像剂 ,对肺部肿瘤的定性诊断具有较高价值     

乳腺癌p16和p53蛋白的表达及意义

目的　探讨p1 6蛋白和p53蛋白在乳腺癌中的表达及意义。方法　应用免疫组化ABC法检测了 74例乳腺癌 p1 6蛋白和p53蛋白的表达情况。结果　 74例乳腺癌 p1 6蛋白阳性表达率43 2 % ;在不同组织学分级的乳腺癌中p1 6蛋白阳性率分别为Ⅰ级 1 1 1 % ,Ⅱ级 50 % ,Ⅲ级 44 8% ,其各组间差异无统计学意义 (P >0 0 5)。 74例乳腺癌p53蛋白的阳性率为 44 6% ;p53蛋白阳性表达与乳腺癌组织学分级明显相关 ,其阳性率分别为Ⅰ级 2 2 2 % ,Ⅱ级 30 6% ,Ⅲ级 69 0 % ,Ⅲ级明显高于Ⅰ级 (P <0 0 1 )和Ⅱ级 (P <0 0 1 )。乳腺癌 p1 6蛋白与p53蛋白表达之间无明显相关。结论　p1 6蛋白的失表达 ,突变型p53蛋白的过表达均与乳腺癌发生发展有关 ,它们通过不同途径发挥生物学作用 ,p53蛋白表达对评估乳腺癌的分化程度和判断预后具有一定价值。