内皮素受体基因在冠心病患者外周血中表达及意义

目的 研究内皮素受体基因（ｅｎｄｏｔｈｅｌｉｎ ｒｅｃｅｐｔｏｒ ｇｅｎｅ Ａ，ＥＴＡ）在冠心病患者外周血中的表达情况，探讨其临床意义，并建立外周血ＥＴＡ基因的ＲＴ－ＰＣＲ检测方法。方法 应用ＲＴ－ＰＣＲ技术检测外周血循环中ＥＴＡ基因表达水平。结果 ３５例冠心病患者中有３０例出现阳性条带，阳性率为８５％。对照组２０例中有１６例阳性，阳性率为８０％。对两组中出现的阳性条带应用义作半定量分析，冠心病患     

尿型纤溶酶原活化素受体在大肠癌活检标本中的表达和意义

在３３例大肠癌内镜活检标本中以抗配体免疫组化法检测肿瘤细胞尿型纤溶原活化素受体的表达，同时测定Ｃ－ｅｒｂＢ－２蛋白分布情况，结果表明，大肠癌中ｕ－ＰＡＲ阳性率为３９．３％，其中以低分化腺癌为主，占７２．７％，Ｐ１８５阳性率为４２．４％。二者表达有高度一致性，ｕ－ＰＡ是一种丝氨酸蛋白酶，在和肿细胞膜在受体结合后具有增强肿肿瘤细胞浸润能力的作用，应用肠镜活检标本检测ｕ－ＰＡＲ可作为大肠癌恶性程度及估计     

全自动血培养仪BACTEC9050临床应用及评价

目的 对ＢＡＣＴＥＣ ９０５０全自动血培养仪的临床应用进行评价。方法 使用ＢＡＣＴＥＣ ９０５０全自动血培养仪对１ １４７例血标本进行需氧培养,分析阳性率、检出菌的种类、阳性检出时间、假阳性和假阴性。结果 １ １４７例血培养,有１４８例阳性,共分离出细菌３３株,真菌１７株,阳性率为１２．９％,假阳性率为０．３％;２４ｇ内阳性占６０．２％,４８ｈ为８５．２％,７２ｈ为９６．３％;阴性报告为５ｄ。结论     

PCR法检测乙型肝炎患者外周血单个核细胞中HBV DNA

采用ＰＣＲ法检测了７７例乙肝患者外周血单个核细胞（ＰＢＭＣ）中ＨＢＶＤＮＡ，２７例阳性，总阳性率为３５．１％。慢性活动性肝炎（９／２１，４２．９％），肝炎后肝硬化（９／１９，４７．４％）及重型肝炎（８／１６，５０．０％）患者ＰＢＭＣＨＢＶＤＮＡ阳性率明显高于慢迁肝（１／１４，７．１％）和急肝（０／７）患者。结果提示ＰＢＭＣ中ＨＢＶＤＮＡ的存在在乙肝发病机理中具有一定意义。     

PCR早期诊断结核性胸膜炎的临床价值

比较了PCR、涂片法、OT试验及胸膜活检4种方法诊断结核性胸膜炎的临床价值。结果显示：PCR法灵敏度为48％，显著高于其它诸法（P＜0．05或0．01），其特异度为91．6％，与其它诸法接近（P均＞0．05）。PCR法具有快速、灵敏、简便及不依赖结核菌培养等优点，应作为胸腔积液患者的常规检查项目。但其假阴性率、假阳性率分别达52％和8．4％，致其可信性受限。本文对产生假阴性和假阳性的原因进行了分析，并提出了减少假阴性和假阳性的方法。     

应用PCR方法检测人乳头瘤病毒的E_7转化基因

应用聚合酶链反应技术（ＰＣＲ）检测５４份子宫颈癌活检标本中人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ－１６）Ｅ７转化基因的存在情况，结果显示阳性率为７２．２％（３９／５４）。ＨＰＶ－１６Ｅ７转化基因在人子宫颈癌组织中的高检出率，证实该转化基因与其发生关系密切。本研究同时证明，ＰＣＲ方法具有敏感、特异、快速和实用特点，值得推广。     

套式RT-PCR检测肾综合征出血热病毒方法的建立及应用

针对汉坦病毒（Ｈａｎｔａｎｖｉｒｕｓ,ＨＶ）中国代表株（Ａ９、Ｒ２２）Ｍ基因片段设计分型引物（Ⅰ、Ⅱ型）,采用改进的异硫氰酸胍酚一步法（胍酚法）提取汉坦病毒ＲＮＡ,套式ＲＴ－ＰＣＲ检测稀释病毒上清,模拟病人血清和２０例急性期（１～７ｄ）血清样本。结果：能检测到模拟血清中少至几个ＰＦＵ病毒ＲＮＡ,敏感性５～１０ｆｇ。检测过程可在５ｈ内完成。２０例急性期患者血清检测阳性率为１００％,并能进行临床分型。扩增产物经打点杂交证实其特异性。而正常及非ＨＦＲＳ患者血清结果均为阴性。提示：套式ＲＴ－ＰＣＲ基因诊断技术优于传统的ＭａｃＥＬＩＳＡ、ＩＦＡＴ和ＲＰＨＩ诊断法。     

用聚合酶链反应检测口腔癌组织中人乳头状瘤病毒的E_6转化基因

作者采用聚合酶链反应（ＰＣＲ），并对照核酸斑点杂交法对１０例口腔恶性肿瘤组织中ＨＰＶ１６Ｅ６转化基因进行了检测。这些肿瘤包括６例口腔粘膜鳞癌（ＳＣＣ），２例涎腺腺样囊性癌（ＡＣＣ），１例涎腺恶性多形性腺瘤（ＭＰＡ）和１例腭部软组织胚胎性横纹肌肉瘤（ＥＲ）。对照组为１０例非肿瘤组织，包括唇裂、腭裂粘膜组织标本各５例。结果表明两种方法检测结果基本一致，肿瘤组阳性６例（６／１０），包括４例ＳＳＣ，１例ＡＣＣ和１例ＥＲ（除外１例ＡＣＣ用核酸杂交法检测为弱阳性），其余为阴性；对照组用核酸杂交法检测４例，除１例唇裂标本为弱阳性以外，均为阴性（０／４）；用ＰＣＲ法检测１０例均为阴性结果（０／１０）。两组间ＨＰＶ１６Ｅ６转化基因的检出率有明显差异（Ｐ＜０．０５）。这一结果为开展口腔癌的ＨＰＶ病因学研究提供了参考资料。     

用PCR技术标记双链DNA探针

利用ＰＣＲ技术制备生物素或地高辛标记的ＤＮＡ探针，经原位杂交试验及敏感性和特异性检测，均取得满意效果。ＰＣＲ标记法具有经济、快速、简易和标记量大等优点。实践中发现Ｂｉｏ／Ｄｉｇ－１１－ｄＵＴＰ的质量、ｄＴＴＰ和Ｂｉｏ／Ｄｉｇ－１１－ｄＵＴＰ的比例及起始ＤＮＡ模板浓度是标记成败的关键。     

妇科肿瘤组织中端粒酶活性的检测

为明确妇科肿瘤中端粒酶的活性，探索端粒酶活化在妇科肿瘤形成中的作用，应用以ＰＣＲ为基础的端粒酶测定方法（ＴＲＡＰ）对７８例妇科肿瘤和对照组织标本进行端粒酶活性测定。结果表明，端粒酶活性在子宫颈癌、卵巢癌和子宫内膜癌标本中阳性率为９１％（３０／３３）；子宫肌瘤、卵巢良性肿瘤和宫颈湿疣等良性增生病变中阳性率为１５％（３／２０）；正常对照组全部阴性。恶性肿瘤组阳性率明显高于后两组（Ｐ＜０．００５）。提示端粒酶活化是妇科恶性肿瘤中的普遍现象，在妇科肿瘤形成中有重要作用。     

聚合酶链反应检测弓形虫核酸的研究

应用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术，设计了一对寡核苷酸引物，对弓形虫Ｂ１基因的保守序列进行体外扩增，显示该引物只对弓形虫核酸扩增，可对４个或４个以上弓形虫扩增出明显条带，检测弓形虫核酸的最低量为２．５ｐｇ。该ＰＣＲ对急性感染弓形虫的小鼠，于４８ｈ后就可从部分小鼠（２／５）的外周血中检测到弓形虫核酸，９６ｈ后全部小鼠（５／５）外周血中均检测到弓形虫核酸，而感染２４ｈ后可从其肝、脾、肾等组织中扩增到弓形虫核酸。对３４例孕妇外周血分别用ＥＬＩＳＡ及ＰＣＲ平行检测，ＥＬＩＳＡ测ＩｇＭ阳性者３例，ＰＣＲ扩增阳性者６例（其中３例ＩｇＭ亦阳性），表明ＰＣＲ具有较高的敏感性和特异性。     

尖锐湿疣患者人乳头瘤病毒亚临床感染及潜伏感染的研究

用多聚酶链反应方法（PCR）检测30例生殖器尖锐湿疣（CA）患者临床皮损、醋酸白试验阳性及阴性的非皮损区刮屑及尿道拭子中人乳头瘤病毒（HPV）。结果：CA临床皮损HPV29例阳性，阳性率96．60％，醋酸白试验阳性的非皮损区HPV22例阳性，阳性率73.3％，醋酸白试验阴性的非皮损区HPV21例阳性，阳性率70％，尿道拭子HPV18例阳性,阳性率60％。结果表明CA患者非皮损区及尿道内均存在HPV潜伏感染，HPV潜伏感染在CA复发中起着很重要的作用。     

用PCR-SSCP方法研究子宫颈癌组织中人乳头瘤病毒E_7基因的变异

运用核酸杂交和聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对临床确诊的６１份子宫颈癌Ⅱ～Ⅲ期标本进行了人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）１６型Ｅ７基因的检测。非同位素地高辛标记探针斑点杂交阳性检出率为４５．９％，ＰＣＲ检测阳性率为５４．１％，两种检测结果证实ＨＰＶ－１６型感染与子宫颈癌的发生密切相关。进一步用灵敏的单链构象多态性分析法（ＳＳＣＰ）对３３例阳性标本进行分析，发现有２７例单链ＤＮＡ迁移率与正常对照有不同，推测均发生了ＤＮＡ序列的改变，提示ＨＰＶ－１６Ｅ７基因的变异在子宫颈癌组织中是较常见的现象，其与子宫颈癌的发生有一定的关系。     

PCR早期诊断结核性胸膜炎的临床价值

比较了PCR、涂片法、OT试验及胸膜活检4种方法诊断结核性胸膜炎的临床价值。结果显示：PCR法灵敏度为48％,显著高于其它诸法(P＜0．05或0．01),其特异度为91．6％,与其它诸法接近(P均＞0．05)。PCR法具有快速、灵敏、简便及不依赖结核菌培养等优点,应作为胸腔积液患者的常规检查项目。但其假阴性率、假阳性率分别达52％和8．4％,致其可信性受限。本文对产生假阴性和假阳性的原因进行了分析,并提出了减少假阴性和假阳性的方法。     

大鼠视觉相关脑区表达序列标签的克隆与鉴定

目的 分析视觉相关脑区基因的差异表达并获取新的表达序列标签。方法 利用差异显示反转录ＰＣＲ（ＤＤＲＴ－ＰＣＲ）技术分析大鼠外侧膝状体与视皮层基因差异表达情况，并筛选差异表达基因片段。结果 经ＤＤＲＴ－ＰＣＲ筛选并通过反Ｎｏｒｔｈｅｒｎ杂交法除假阳性，最终获得１个差异表达基因片段。对其进行克隆、测序和同源性比较发现，该片段为一新的表达序列标签，并与心肌集钙蛋白的ｍＲＮＡ具有７４％的同源性。结论 视觉     

胎儿SRY基因用于产前诊断的初步研究

采用ＰＣＲ技术，对５０例胎儿组织ＤＮＡ进行了Ｙ染色体特异的ＳＲＹ基因扩增。扩增片段长度为２５０ｂｐ。结果显示：３２例早孕绒毛ＤＮＡ中，有１７例扩增出特异性片段．１５例未扩增出特异性片段，有、无特异性片段比例为１．１３３：１，接近胎儿自然出生性别之比；１８例中孕引产胎盘ＤＮＡ中８例阳性，１０例阴性，与引产胎儿实际性别完全一致。因ＰＣＲ扩增胎儿ＳＲＹ基因特异性强、灵敏度高，可用于早期胎儿性别的产前诊断。     

甲亢~(131)Ⅰ治疗前后血清TGA、TMA与甲减关系的探讨

本文分析了甲亢~（131）Ⅰ治疗前后血清TGA、TMA测定结果与甲减发生的关系。77例前后对照资料表明:在治疗前抗体阳性组和阴性组中甲减发生率分别为12.5％及14.2％,甲减组与非甲减组抗体阳性率分别为70.0％及73.1％,均无显著性差异;~（131）Ⅰ治疗后抗体阳性组和阴性组中甲减发生率分别为6.7％及17.0％,甲减组与非甲减组抗体阳性率分别为20.0％及41.8％,显然抗体阳性对于甲减的发生无影响;同时发现~（131）Ⅰ治疗后46.4％的患者TGA、TMA转阴,而疗前为阴性者疗后无1例出现阳性。427例疗后患者抗体测定结果也与甲亢疗效无关。据此,我们认为甲亢患者TGA、TMA阳性不能作为禁忌~(131)Ⅰ治疗的指征。     

不孕不育与支原体感染和抗精子抗体的关系

目的　探讨不孕不育与支原体感染和抗精子抗体 (ASA)之间的关系。方法　采用培养法分别对 2 4 8例不孕妇女(观察组 )和 16 7例不育男性患者 (观察组 )进行解脲支原体 (UU)和人型支原体 (MH)检测 ;采用ELISA法检测血清抗精子抗体ASA IgM和ASA IgG。同时分别选择 6 9例正常妇女和 4 3例正常男性作为对照。结果　不孕症观察组及不育症观察组UU、MH阳性检出率均明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。不孕和不育观察组ASA阳性检出率 (2 8.6 3% ,2 0 .96 % )均显著高于对照组 (7.2 1% ,6 .98% ,P <0 .0 5 )。支原体感染阳性组ASA阳性率明显高于支原体感染阴性组(P <0 .0 2 5 )。结论　女性不孕和男性不育均与支原体感染及免疫因素有关 ,并且ASA与支原体感染有关     

用PCR法检测胸液中结核杆菌DNA

利用聚合酶链反应（ＰＣＲ）技术检测了３２例结核性渗出性胸膜炎和２０例非结核性疾病患者胸液中结核杆菌的６５ＫＤａ抗原蛋白编码基因的特异ＤＮＡ片段。结果表明，其检出率为７８．１３％，并具高度特异性。提示ＰＣＲ扩增ＤＮＡ技术对结核性渗出性胸膜炎是高度敏感和特异的早期、快速诊断方法。     

胃癌中内分泌细胞及其意义

应用免疫组化ABC法对48例胃癌进行胃泌素、生长抑素、胰高血糖素标记。结果胃泌素阳性14例（29．2％），生长抑素阳性9例（18．7％），两者均阳性者6例（12．5％）。未分化腺癌中内分泌细胞阳性率较高分化腺癌高。胃泌素阳性组其浆膜浸润率13／14例（92．9％），淋巴结转移率11／14例（78．5％），明显高于阴性组（P<0.01）。生长抑素阳性组浆膜浸润率6／9例（66．7％），淋巴结转移率4／9例（44．4％），与阴性组相比均无明显差异（P＞0．05），提示胃泌素有促进癌细胞生长的作用，癌细胞生长愈活跃，其侵袭能力愈强，转移率愈高。