经宫颈活取早孕绒毛作产前诊断方法的研究

本文对155例早孕妇女进行了经宫颈获取绒毛方法的研究,并对三种不同来源与直径的抽吸管效果进行了对比。临床实验研究证实在B超指示下取材的成功率较盲吸法高,可达99%。改进后的Ⅱ型吸管将钢丝固定在吸管外,操作时不用抽管芯,比进口管操作简便,取一次检材成功率可达85%,实验结果表明,胚胎着床在子宫后壁较易取材成功。孕期7～8周时,在B超指示下取材一次成功率最高,且取到的组织量也最多。20例孕妇在活取绒毛后观察了3～7天后行人流术。近期观察无一例发生流产和胚胎宫内死亡,证明了本操作的安全性。     

胚胎干细胞研究能否得到伦理辩护

胚胎干细胞研究是当前生命伦理学争论最激烈、最突出的一个领域,主要围绕两个问题而展开：（1）如何看待胚胎,胚胎干细胞研究是否毁灭生命;（2）治疗性克隆是否必然滑向生殖性克隆。本文认为,不能简单地把胚胎干细胞研究等同于毁灭生命;治疗性克隆并不必然滑向生殖性克隆。胚胎干细胞研究是一项值得支持的人道主义事业,应能得到伦理辩护。但必须严格伦理规范和伦理程序,这是支持胚胎干细胞研究的一个极为必要且十分重要的条件。     

EB1基因表达与胚胎染色体数目异常的关系

目的研究EB1基因在胚胎绒毛细胞中的表达,并分析其对染色体分离的影响。方法采用荧光定量PCR技术检测EB1基因在人工流产绒毛核型分析正常的胚胎细胞和自然流产绒毛核型分析异常的胚胎细胞中的表达差异;免疫组织化学方法检测EB1蛋白在两者中的表达情况,并用Western blot加以验证。结果EB1基因mRNA拷贝数/GAPDH基因mRNA拷贝数的均值在人工流产绒毛核型分析正常的胚胎细胞中为0.010 04±0.008 223,在自然流产绒毛核型分析异常的胚胎细胞中为0.150 9±0.063 3。Western blot和免疫组织化学结果表明其在自然流产绒毛核型分析异常胚胎细胞中的表达也高于其在人工流产绒毛核型分析正常胚胎细胞中的表达。经统计分析,EB1基因mRNA水平和蛋白水平在上述两组细胞中的表达均有显著差异。结论EB1基因在自然流产绒毛核型分析异常的胚胎细胞中的表达明显高于其在人工流产绒毛核型分析正常的胚胎细胞中的表达,其高表达可能导致染色体分离异常。     

EBl基因表达与胚胎染色体数目异常的关系

目的研究EBl基因在胚胎绒毛细胞中的表达，并分析其对染色体分离的影响。方法采用荧光定量PCR技术检测EBl基因在人工流产绒毛核型分析正常的胚胎细胞和自然流产绒毛核型分析异常的胚胎细胞中的表达差异；免疫组织化学方法检测EBl蛋白在两者中的表达情况，并用Western blot加以验证。结杲EBl基因mRNA拷贝数／GAPDH基因mRNA拷贝数的均值在人工流产绒毛核型分析正常的胚胎细胞中为0．01004±0．008223，在自然流产绒毛核型分析异常的胚胎细胞中为0．1509±0．0633。Western blot和免疫组织化学结果表明其在自然流产绒毛核型分析异常胚胎细胞中的表达也高于其在人工流产绒毛核型分析正常胚胎细胞中的表达。经统计分析，EBl基因mRNA水平和蛋白水平在上述两组细胞中的表达均有显著差异。结论EBl基因在自然流产绒毛核型分析异常的胚胎细胞中的表达明显高于其在人工流产绒毛核型分析正常的胚胎细胞中的表达，其高表达可能导致染色体分离异常。     

Oct4基因的研究进展

Oct4基因是POU转录因子家族中的一员,主要表达于胚胎干细胞、生殖干细胞以及未分化胚胎癌中,对于维持胚胎干细胞的多潜能性和自我更新具有极其重要的作用.本文针对Oct4基因的分子结构、功能,调节通路以及与肿瘤的关系给予详细的阐述,以期为了解这一基因、开展相关研究提供便利.     

不同胚龄昆明小鼠胚胎获取胚胎干细胞体外培养的比较

目的 探讨分离培养昆明小鼠胚胎干细胞(ES细胞)的最佳胚龄.方法 分别从孕3.5 d和4.5 d的母鼠子宫中分离收集桑椹胚和囊胚.比较体外培养时胚胎的贴壁率、内细胞团(inner cell mass,ICM)形成率、形成ES细胞克隆率(P1)和形成ES细胞亚克隆率(P2).结果 孕3.5 d采集的胚胎多为桑椹胚,孕4.5 d采集的胚胎多为囊胚,分离培养结果表明.后者的胚胎贴壁率、ICM形成率和ES细胞克隆形成率均高于前者,均有显著性差异(P<0.05).结论 囊胚较桑葚胚更适合作为体外分离培养昆明小鼠ES细胞的材料.     

制备和检测胚胎显微操作用针的实用方法体系

目的介绍一种优化的制备及检测胚胎显微操作用针的实用方法体系。方法移卵管制作是用普通毛细管在酒精灯上拉制,小砂轮断针,针口用酒精灯火焰稍处理后备用;持卵针是将外径1.0mm的毛胚管在拉针仪上拉制,小砂轮断针,烧针仪上将开口处理成平滑内陷的马蹄形;注射针是将带内芯的外径1.0mm的特制毛胚管在拉针仪上拉制而成。注射针尖端充满注射溶液后,将注射针和持卵针连接到显微操作系统的操作臂上,先置于胚胎培养液内,用针尖轻轻碰触持卵针以破坏开口。之后转移到矿物油里,加压试注射,根据注射针开口液滴流出速度判断针尖是否通畅,流速是否合适。进一步用受精卵试注射进行验证。结果通过本方法体系制备的移卵管、持卵针和注射针均达到胚胎显微操作要求,解决了注射针口液体流速难以判断的问题。结论该胚胎显微操作用针的制备与检测方法体系使胚胎显微注射的前期工作得以标准化,提高了后续胚胎显微注射的效率。     

铁皮石斛早期体细胞胚胎发育及原球茎形态发生研究

铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall ex Lindl）是兰科石斛属多年生草本植物,是一种濒危物种,我们以此为材料建立了高效体细胞胚胎（以下简称“体胚”）发生体系,并从含体胚的胚性愈伤组织中分离出一些胚胎发生的特异基因。本项目就是在此基础上,欲建立早期体胚分离纯化技术,     

不同移植方案在不同获卵数患者中的临床结局分析

目的比较不同获卵数患者2枚第3天(D3)胚胎移植和单囊胚移植的临床结局,为临床移植策略的选择提供数据支持。方法回顾性分析2014年1月至2014年12月在郑州大学第三附属医院生殖医学科行体外受精/卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI)治疗的患者,根据获卵个数分为3组,A组获卵个数为5~9枚卵子,B组为10~14枚卵子,C组为≥15枚卵子。每组患者均有4种不同的移植方式,移植2枚D3胚胎(a)、移植1枚囊胚(b)、复苏移植2枚冷冻D3胚胎(c)和复苏移植1枚冷冻囊胚(d);比较3组患者卵子的2PN受精率、可移植胚胎率及优质胚胎率;比较各组患者4种移植方式的胚胎种植率、生化妊娠率、临床妊娠率、多胎率和流产率等差异。结果 1A组、B组和C组分别有667、573、479个移植周期,其中A组患者IVF的2PN受精率和可移植胚胎率明显高于B组和C组(P=0.003/P<0.001);2A组患者4种移植方式的生化妊娠率、临床妊娠率和流产率差异均无统计学意义(P>0.05),但c的种植率明显低于a和d(P=0.027/0.020);B组患者中d的种植率明显高于a和c(P=0.005/0.001);C组患者中d的生化妊娠率和临床妊娠率均明显高于a(P=0.048/0.027)和c(P=0.003/0.001),且囊胚移植的种植率均明显高于D3胚胎(P<0.05);33组患者单囊胚移植多胎率较胚胎移植明显降低(P<0.05)。结论对卵巢高反应人群(获卵数≥15枚),单囊胚移植在保证高种植率和妊娠率的同时,明显降低了多胎率;而获卵数为5~9枚和10~14枚的患者,D3胚胎移植的临床妊娠率和单囊胚移植相似,但多胎率明显增高;D3胚胎培养囊胚后择期移植具有较高的临床妊娠率,对于获卵数≥10枚患者是最佳的移植方案。     

肝母细胞瘤21例临床病理分析

本文报道了儿童肝母细胞瘤21例,其中男15例,女6例,2岁以下者15例,多见于肝右叶。临床症状常见腹部包块。病理形态特点:(1)瘤体大,直径平均10厘米左右。瘤体与周围组织分界清,常有包膜;(2)瘤组织主要成份为胚胎性肝上皮组织,瘤细胞体积小于正常肝细胞,胞浆少,排列紧蜜呈团索状;(3)上皮性瘤细胞团间可见胚胎性或较成熟的间叶组织;(4)瘤组织中还可以见类似软骨的结构。按瘤细胞的分化程度及有无类似软骨结构分为胎儿型9例,胚胎型7例,未分化型4例和混合型1例(含类似软骨结构)。     

棉酚宫腔给药对大鼠的抗生育作用

用妊娠2、4和6天的大鼠,按妊娠期各分为实验组与对照组。实验组向一侧子宫角内注射0.1ml醋酸棉酚注射液(含棉酚0.5mg或1mg),对照组向一侧子宫角内注射0.1ml生理盐水。于妊娠12～13天处死动物,观察两组动物双侧子宫角内胚胎存活情况。结果表明实验组动物无论妊娠2、4、6天,注射1mg棉酚侧子宫角内的胚胎死亡率皆明显高于未注射侧;而对照组动物注射盐水侧子宫角内胚胎死亡率与未注射侧比较无显著差异。实验提示棉酚直接宫腔内一次给药可能是用于终止早期妊娠的一种有效药物。     

胰岛干细胞的研究现状与展望

详细介绍了胚胎干细胞和成体干细胞向胰岛干细胞转化的诱导分化方法及可能途径,用于胰岛干细胞鉴定的基因分子标志及胰岛干细胞促分化因子。并简要介绍了胰岛干细胞治疗糖尿病的研究现状及存在的问题。     

人晚期囊胚体外培养中的动态观察

近几年随着可用于人体外受精 胚胎移植 (ＩＶＦ ＥＴ)培养液的不断改进 ,使人受精卵发育至囊胚期移植成为可能。囊胚期移植不仅减少了移植胚胎的数目 ,降低了多胎妊娠率 ,提高了临床妊娠率 ,也使人类胚胎体外发育的形态学研究不断深入[1]。但是关于在体外培养条件下 ,人晚期囊胚自透明带内孵出后的动态描述 ,尚未见报道。本文将近来观察到的 1例患者的卵母细胞在体外培养经过体外成熟、受精、卵裂以及发育至晚期囊胚 ,共经历 1 76ｈ的形态学变化报告如下。1　材料和方法1 1　一般资料　患者 ,女 ,2 9岁 ,因男性因素不孕 5年。月经 3ｄ采用…     

MTT法检测丙烯酰胺对神经细胞毒性作用

介绍一种用四氦唑蓝为底物的酶反应定量比色分析法。方法用ＭＴＴ法测定了丙烯酰胺对体外培养的大鼠胚胎中脑神经细胞的毒性。结论ＭＴＴ法用于测定细胞毒性作用具有快速，正确等优点。     

游走概念车的真实世界

过去，在车展上看到的概念汽车，如果成功出产，最快也是三五年之后的事情。更多的“胚胎”，往往都死在腹中。但今后，汽车从概念化到正式上市的时间，相信会越来越短。     

人体组织酸性磷酸酶表型研究

采用快速超薄层聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳技术（ＵＬＰＡＧＩＦ），分析了４２例胚胎组织及其绒毛组织中酸性磷酸酶（ＡＣＰ）表型，同时调查了西安汉族群体ＡＣＰ表型分布，并对室温及４℃保存血痕中ＡＣＰ表型检出时限进行研究。结果证明：胚胎组织中ＡＣＰ具有遗传多态性，与绒毛组织中ＡＣＰ表型一致；西安汉族群体ＡＣＰ基因频率：Ｐａ０．２１３，Ｐｂ０．７８７，个体识别率ＤＰ０．５０，非父排除率Ｐ０．１３９５：室温保存血痕ＡＣＰ活性持续到第９周，４℃保存血痕检测到第１４周全部能正确判型，这对血痕检材个人识别具有现实意义。     

双侧减张缝合加咽后壁组织办移植术一次修复腭裂100例临床报告

先天性唇裂及腭裂畸形的发生是由于口腔腭突内的中胚叶组织在胚胎早期、妊娠前三个月时发生发育暂停所致。唇裂畸形和腭裂畸形可同时发生,亦可单独发生其发生率约为1‰左右,二者皆为口腔颌面外科常见的手术治疗疾病。     

诊断剂量的超声波辐照后人胚绒毛的亚微结构改变

诊断剂量超声波辐照人6～9周胚胎,24h后取胎盘绒毛组织在透射电镜下观察,发现合体滋养层和细胞滋养层细胞膜、线粒体及粗面内质网有明显亚微结构改变,主要是细胞膜损伤中断;微绒毛膨大变形;粗面內质网扩张;线粒体肿胀,嵴减少并呈小泡状或不规则膨大。     

多步骤诱导逐步筛选法建立高效的胚胎干细胞定向分化为胰岛祖细胞的分化方案

目的探讨胚胎干细胞(ESCs)体外定向分化为胰岛祖细胞的分化潜能,应用多步骤诱导逐步筛选法建立高效的胚胎干细胞定向分化为胰岛祖细胞的分化方案,提高胚胎干细胞向胰岛祖细胞分化的效率。方法体外传代培养ESCs,采用逐步筛选分化方案,在不同的分化阶段,给予不同的生长因子诱导分化后,RT-PCR法检测胰腺特异性基因的表达,筛选最佳的诱导因子组合,并用免疫细胞化学方法鉴定相关特异蛋白的表达,从而建立体外高效的定向分化方案。结果从未分化ESCs定向分化为定形内胚层细胞,以活化素A诱导组的Sox17和Foxa2基因表达最显著;从定形内胚层细胞分化到后前肠细胞,以维甲酸+FGF10诱导组的Hnf4a和Hnf6基因表达最显著;从后前肠细胞定向分化到胰腺内胚层细胞,以维甲酸+环杷明+DAPT+Exendin 4诱导组的Pdx1、Ptf1a、Hblx9等胰腺特异性基因表达最显著;从胰腺内胚层细胞定向分化到胰岛祖细胞,以维甲酸+DAPT+Exendin 4诱导组的Ngn3、Nkx6.1、Pax4、Pax6等基因表达最显著。免疫细胞化学方法检测可见胰腺特异性的相关蛋白表达,多数Ngn3+细胞同时表达胰腺特异性基因Nkx6.1和Pdx1。结论应用多步骤诱导逐步筛选法可以建立高效的ESCs定向分化为胰岛祖细胞的分化方案,提高ESCs向胰腺内胚层分化的分化效率,为1型糖尿病的β细胞再生治疗提供试验依据和可行性方案。     

简讯(二)

<正> 5月26日至28日,美国得克萨斯大学医学院妇产及生殖科学系安娜·斯坦伯克博士及得克萨斯生殖医学及内分泌学研究所主席爱米尔·斯坦伯克夫妇来我校访问,参观了组织胚胎教研室郭仁舆教授领导的实验室。外宾对郭教授领导的研究工作很感兴趣,给予高度评价,