恒磁场对人脐动脉血管平滑肌细胞胞浆游离钙离子浓度的影响

目的 研究恒磁场对培养的人脐动脉血管平滑肌细胞(VSMC)胞浆内游离钙离子浓度([Ca2 ]i)的影响,探讨恒磁场抑制VSMC增殖的作用机制.方法 离体培养人脐动脉VSMC,不同强度的恒磁场垂直作用于VSMC,应用激光共聚焦显微镜观察恒磁场对VSMC胞浆[Ca2 ]i的影响.结果 5 mT的恒磁场作用于VSMC后10-50 min[Ca2 ]i较对照组明显下降,20 min下降最明显;其平滑肌细胞的Ca2 荧光强度明显弱于对照组,至60 min接近对照组.结论 恒磁场对VSMC胞浆[Ca2 ]i有明显降低作用,可能是抑制VSMC细胞增殖的机制.为经皮冠状动脉成型术(PTCA)术后再狭窄的治疗提供了新的理论基础.     

反义C-myc寡核苷酸对人肝癌细胞SMMC-7721的生长抑制

针对C－mycmRNA第二外显子起站码AUG及下游4个密码子设计合成了反斗、正义及错配寡核苷酸（ODNS），并对合成的ODNs进行了疏代磷酸化修饰。在人肝癌细胞SMMC－7721培养体系中，对反义寡核苷酸（ASODN）抑制细胞增殖的作用进行了研究。发现①与正义和错配ODNs相比较，反义C－mycODN有明显抑制人肝癌细胞SMMC-7721生长的作用;②该生长抑制作用随ASODN剂量增加而增强，随ASODN作用时间而变化;③流式细胞计数仅测定证明反义C－mycODN主要阻断肝癌细胞增殖周期的G1到S期。结果提示：反斗C－mycODN在体外有序列特异性和细胞周期特异性抑制人肝癌细胞的生长作用，且该抑制作用与ASODN作用时间及剂量有关。     

热休克蛋白与细胞周期调控

无论原核生物还是真核生物，对于外界环境突然改变，如热、射线、重金属、毒素等，均能引起热休克蛋白（heat shock proteins,HSP)合成增加，其他蛋白合成减少。ＨＳＰ是一组在进化上高度保守的蛋白质，约占细胞内蛋白质总量的２％－５％，存在于几科所有细胞内腔障中。根据分子量、诱导方式及功能，ＨＳＰ可分为ＨＳＰ１００、９０、７０、６０及小分子ＨＳＰ（sHSP）。ＨＳＰ作为细胞在生理条件下生存所必须，不仅在抵抗应激损伤和保护细胞中发挥重要作用，还参与几乎所有细胞生理过程：如细胞分裂，ＤＮＡ复制、转录、蛋白质运输、折叠、聚集、降解，维持细胞骨架及膜功能等。最近研究发现，ＨＳＰ与细胞周期也存在密切关系：如ＨＳＰ７０、ＨＳＰ９０与细胞周期调控有关，可能在细胞周期调控及其正常运转中发挥关键作用。本文旨在对ＨＳＰ与细胞周期关系的最新进展作一简要介绍。     

恒磁场对内皮细胞分泌和表达细胞间黏附分子-1及与单核细胞黏附的抑制作用

目的　观察不同强度恒磁场对氧化修饰低密度脂蛋白 (OX LDL)作用下人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)分泌和表达细胞间黏附分子 1(ICAM 1)及HUVEC与人单核细胞株THP 1黏附的影响。方法　采用体外培养第 3代的HUVEC ,实验分为 6组 ,即对照组、OX LDL(10 0mg·L-1)组及OX LDL +不同磁感应强度 (1、5、10、2 0Gs)的恒磁场组。各组细胞于培养及恒磁场作用 2 4h后收集标本 ,用酶联免疫吸附试验 (ELISA)检测HUVEC分泌ICAM 1的量 ,免疫细胞化学检测ICAM 1的表达 ,计数法观察HUVEC与THP 1的黏附率。结果　OX LDL 10 0mg·L-1刺激细胞 2 4h,ICAM 1的分泌和表达显著增高(P <0 .0 5vs.对照组 ) ;而 1、5、10和 2 0Gs恒磁场组细胞ICAM 1的分泌和表达显著低于OX LDL组 (P <0 .0 5 )。OX LDL10 0mg·L-1与HUVEC孵育 2 4h后 ,HUVEC与THP 1的黏附率显著增加 (P <0 .0 5vs.对照组 ) ;而 1、5、10和 2 0Gs恒磁场组HUVEC与THP 1的黏附率显著低于OX LDL组 (P <0 .0 5 )。结论　 1～ 2 0Gs的恒磁场可拮抗OX LDL的作用 ,抑制HUVEC分泌和表达ICAM 1及与单核细胞的黏附率     

不同人细胞系细胞周期中的P_(53)表达

P53是维持细胞遗传稳定性，监控细胞周期正常进行的最重要蛋白分子。已经公认，P53参予细胞周期G1／SCheckpoint，诱导DNA损伤细胞周期阻留，促进DNA损伤修复，促使细胞分化或诱导DNA损伤细胞凋亡。最近研究证实，细胞周期中还存在多个Checkpoint，如G2／M、S、M和S／MCheckpoint，而且功能研究表明，P53是G2／MCheckpoint的最重要参予者，然而P53在细胞周期各时相的表达却未见深入研究。最近，我们选用人肿瘤细胞系细胞进行体外培养，经不同条件诱导细胞凋亡（42℃1h），或处于对数生长期（37℃常规培养），或延缓生长（4℃6h）…     

白血病HL60/ADR细胞Mdrl、NF-κB的表达及解毒化瘀药的干预作用

目的 探讨解毒化瘀药血清对白血病HL60/ADR细胞多药耐药基因(Mdrl)、核周因子κB(NF-κB)信号基因表达的影响.方法 采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT PCR)法检测解毒化瘀药血清处理后HL60/ADR细胞Mdrl基因的表达;Western blot法检测NF-κB/P65、NFκB/P50、IκBα的表达.结果 解毒化瘀药血清能够降低HL60/ADR耐药细胞NFκB/P65、NFκB/P50、1κBα的表达,降低Mdrl耐药基因的表达.结论解毒化瘀药对HL60/ADR细胞的耐药逆转作用可能是通过阻断NF-κB信号通路,影响Mdrl耐药基因的表达,进一步逆转耐药.     

叶酸对白血病细胞周期分布的影响

目的：研究叶酸（ＦＡ）影响白血病细胞增殖和细胞周期分布，以探讨ＦＡ抑制白血病细胞增殖的机理。方法：体外培养白血病细胞株ＨＬ－６０、Ｋ５６２。利用台盼蓝拒染法进行细胞计数，流式细胞术检测细胞周期分布。结果 １０ｎｍｏｌ／Ｌ和３００ｎｍｏｌ／Ｌ的ＦＡ对ＨＬ－６０细胞无显著性抑制。而１００ｎｍｏｌ／Ｌ ＦＡ对ＨＬ－６０细胞作用４８ｈ后出现显著性抑制作用。不同的是，１０ｎｍｏｌ／Ｌ和１００ｎｍｏｌ／Ｌ Ｆ     

白血病HL60/ADR细胞Mdr1、NF-κB的表达及解毒化瘀药的干预作用

目的探讨解毒化瘀药血清对白血病HL60/ADR细胞多药耐药基因(Mdr1)、核周因子κB(NF-κB)信号基因表达的影响。方法采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测解毒化瘀药血清处理后HL60/ADR细胞Mdr1基因的表达;Western blot法检测NF-κB/P65、NF-κB/P50、IκBα的表达。结果解毒化瘀药血清能够降低HL60/ADR耐药细胞NF-κB/P65、NF-κB/P50I、κBα的表达,降低Mdr1耐药基因的表达。结论解毒化瘀药对HL60/ADR细胞的耐药逆转作用可能是通过阻断NF-κB信号通路,影响Mdr1耐药基因的表达,进一步逆转耐药。     

Nucleostemin基因特异性RNA干扰对胃癌细胞增殖和凋亡的影响

目的 探讨应用RNA干扰技术抑制nucleostemin(NS)基因表达对胃癌SGC-7901细胞株增殖和凋亡的影响.方法 阳离子脂质体法将构建好的NS siRNA表达载体转染胃癌SGC-7901细胞株,采用MTT法测试各组细胞增殖抑制率;RT-PCR法检测各组细胞NS基因表达情况,流式细胞术检测细胞周期,Annexin V FITC/PI法检测细胞凋亡率.结果 与对照组相比,S组细胞的增殖减慢,24、48、72h细胞增殖抑制率分别为53.21%、71.54%、87.47%;NS基因表达量下降,G0/G1期细胞百分率显著升高(58.34%),S期细胞减少(20.68%),细胞凋亡率增加(26.85%).结论 RNA干扰技术可抑制胃癌SGC 7901细胞株NS基因的表达,使细胞增殖减慢,细胞周期阻滞在G0/G1期,凋亡率增加.     

硝酸亚铈对小鼠睾丸细胞能量代谢相关酶活性、细胞周期及凋亡的影响

目的 探讨硝酸亚铈对于小鼠睾丸细胞能量代谢相关酶类活性、细胞周期以及凋亡的影响.方法 100只雄性小鼠随机分为阴性对照组、环磷酰胺组及硝酸亚铈15、30、60mg/kg组,各组动物用相应受试物连续灌胃60d.采用酶化学方法检测乳酸脱氢酶(LDH)、山梨醇脱氢酶(SODH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、葡萄糖-6磷酸脱氢酶(G-6PD)的活性;采用流式细胞仪检测睾丸细胞的细胞周期及细胞凋亡.结果 与环磷酰胺组比较,15mg/kg硝酸亚铈能促进LDH、SODH、SDH及G-6PD活性(P<0.05),30mg/kg硝酸亚铈有促进SDH活性的作用(P<0.05);15mg/kg和30mg/kg硝酸亚铈均能延长睾丸细胞G0/G1期,缩短S期和G2+M期,抑制细胞凋亡(P<0.05).与阴性对照组比较,60mg/kg硝酸亚铈对LDH、SDH、G-6PD均有显著性抑制作用(P<0.05),且能缩短睾丸细胞G0/G1期,延长S期和G2+M期,细胞凋亡明显增加(P<0.05).结论 低剂量的硝酸亚铈对小鼠睾丸细胞能量代谢相关酶活性和细胞增殖有促进作用,而高剂量硝酸亚铈则表现出明显的抑制作用.     

γ-射线诱导HL-60细胞凋亡的观察

目的 观察γ-射线诱导HL-60细胞凋亡的时间和剂量效应,以探求辐射诱发肿瘤细胞凋亡分子机制。方法 分别以2.5、5、7.5、10、15Gy γ射线照射HL60细胞,于照后继续培养3、6、9、12、24、27、30h,分别收获细胞。电泳检测DNA梯状带;流式细胞术(FCM)细胞凋亡定量并观察细胞周期变化;Hoechst 33258-PI复染荧光显微镜计数凋亡细胞及已死亡细胞百分率。结果 HL-60细胞受照后死亡方式主要是凋亡,其首先阻滞在G２／M期并由此走向凋亡;DNA梯状带及FCM检测结果发现,细胞凋亡具有时间和剂量依赖性;Hoechst 33258PI染色法检测结果与FCM检测的凋亡细胞随剂量的加大及时间的推移而增多的结果并不呈平行关系。结论 γ-射线诱导HL-60细胞凋亡时间和剂量效应关系的确立为进一步探讨该凋亡途径分子机制奠定了基础。     

CLONING AND EXPRESSION OF A GENE MEDIATING γ-RADIATION-INDUCED APOPTOSIS IN HL-60 CELLS

Apoptosis,orprogrammedcelldeath(PCD),isanintricatelyregulatedprocess">.Geneticstud-iesofapoptosisinCaenorhabditiseleganshavei-dentifiedced-3andced-4asproapoptoticgenesandced-9asanantiapoptoticgene"=-Severalmam-malianhomologuesofced-3,ced-4andced-9havebeenidentified.Recentstudiesindicatethatthefundamentalapoptosismachinery,whichconsistsofdistincteffectors,inhibitorsandinitiators,hasbeenconservedthroughoutevolution.Thekeyapoptosiseffectorsinmammalsareafamilyofcys-teine-containing,aspartate-spe…     

EFFECTS OF THE HYPERTHERMIA AND HARRINGTONINE ON TELOMERASE ACTIVITY OF HL-60 CELLS

ＴｅｌｏｍｅｒａｓｅｉｓａｎＲＮＡｄｅｐｅｎｄｅｎｔｐｏｌｙｍｅｒａｓｅｔｈａｔｓｙｎｔｈｅｓｉｚｅｓｔｒｌｏｍｅｒｅＴＴＡＧＧＧｒｅｐｅａｔｓｓｅｑｕｅｎｃｅｓａｔｔｈｅｅｎｄｓｏｆｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓｒｅｑｕｉｒｅｄｆｏｒｔｈｅｉｎｔｅｇｒｉｔｙａｎｄｓｔａｂｉｌｉｔｙｏｆｌｉｎｅａｒｃｈｒｏｍｏｓｏｍｅｓ[1] .Ｎｏｒｍａｌｓｏｍａｔｉｃｃｅｌｌｓ ,ｇｅｎｅｒａｌｌｙｌａｃｋｉｎｇｔｅｌｏｍｅｒａｓｅａｃｔｉｖｉｔｙ ,ｄｉｓｐｌａｙｐｒｏｇｒｅｓｓｉｖｅａｔｔｒｉｔｉｏｎｏｆｔｅｌｏｍｅｒ…     

EFFECTS OF ANTISENSE OLIGODEOXYNUCLEOTIDES ON EXPRESSION OF CASPASE-3 IN Γ-RADIATION INDUCED APOPTOTIC HL-60 CELLS

Objective To study the inhibitory effects of caspase-3 mRNA antisense oligodeoxynucleotides (ASODN) on expressions of caspase-3 and it's mRNA in γ-radiation induced apoptotic HL-60 cells, and screen the effective ASODN. Methods ASODN-1 and ASODN-2 targeting 5′-noncoding region and initial translation region of caspase-3 mRNA were respectively designed, synthesized and introduced into HL-60 cells by means of liposome-mediated transfection followed by 10Gy γ-radiation exposures. TUNEL assay was conducted to investigate the morphologic change and apoptotic percentage of HL-60 cells 18 h later. Immunocytochemical staining and one step RT-PCR were respectively performed to detect the expressions of caspase-3 and it's mRNA. Mismatched oligodeoxynucleotide (MODN) transfected and un-transfected HL-60 cells were taken as control. Results TUNEL assay found that the apoptotic percentages in ASODN-1 and ASODN-2 groups were significantly reduced compared with the control groups (P<0.01) when the final concentration of both ASODNs was ≥3μmol/L. Immunocytochemistry showed that caspase-3 positive cell percentages were reduced but the average gray values increased significantly compared with the control groups (P<0.01). RT-PCR showed expressions of caspase-3 mRNA was decreased after ASODN transfection. Furthermore, ASODN-1 proved more effective in inhibiting HL-60 cell apoptosis than ASODN-2 (P<0.01). Conclusion Caspase-3 mRNA ASODNs can prevent HL-60 cells from apoptosis induced by γ-radiation and reduce expression of caspase-3 and its mRNA. These effects are dose dependent in a certain range.     

去甲斑蝥素在体外对白血病细胞核酸和蛋白质合成的影响

应用细胞培养、放射性核素示踪技术研究了去甲斑蝥素对白血病细胞的作用。结果表明，去甲斑蝥素对人早幼粒白血病ＨＬ－６０细胞株ＤＮＡ和蛋白质合成有抑制作用，对ＲＮＡ合成未见明显影响；对正常人骨髓细胞ＤＮＡ合成无抑制相反有一定促进作用。     

人宫颈癌细胞凋亡的研究

目的　观察顺铂、60 Co在宫颈癌细胞凋亡的作用及其引起的细胞形态学、DNA及细胞周期变化。方法　将人宫颈癌细胞株Hela,SiHa和RJC进行体外培养 ,用不同强度的放射线60 Co照射 ,观察照射后不同时间内肿瘤细胞形态变化 ,并采用末端脱氧核苷酰转移酶标记法 (TDT法 )检查细胞DNA有无断裂 ,用流式细胞仪记录细胞周期的改变和Bcl 2蛋白表达情况。同时将顺铂处理的宫颈癌细胞作为对照组 ,观察放射线和药物对宫颈癌细胞的联合作用。结果　经60 Co照射的三株细胞均出现凋亡的典型形态学改变 ,TDT法染色见受照细胞核内均有DNA断裂表现 ;细胞周期进展受到阻滞 ;Bcl 2蛋白表达在Hela细胞升高 ,而在SiHa和RJC细胞则降低 ,SiHa细胞对60 Co照射最为敏感 ,40 0CGy即可出现细胞凋亡的改变。顺铂单独处理可使宫颈癌细胞凋亡 ,与放射线联用有明显的增强细胞凋亡的效果。并在RJC细胞的G1 峰前出现凋亡峰。结论　宫颈癌细胞受到60 Co照射后 ,凋亡是其主要死亡形式 ,不同的宫颈癌细胞株对放射线的敏感性存在明显差异 ,与细胞凋亡有关的Bcl 2表达与宫颈癌细胞凋亡的发生呈负相关 ,放射线照射与化疗药物联合可以增加抑制宫颈癌生长的作用。     

γ-射线诱导HL-60细胞凋亡相关基因的分离和鉴定

为明确参与γ 射线诱导ＨＬ ６０ 细胞凋亡的ｃａｓｐａｓｅ 家族成员,根据已知ｃａｓｐａｓｅ家族成员保守肽序列设计简并引物,经ＲＴ ＰＣＲ从凋亡ＨＬ ６０ 细胞ｍ ＲＮＡ扩增出一条带,通过基因克隆及序列测定进行鉴定。结果克隆出ｃａｓｐａｓｅ ３ ｃＤＮＡ的一段序列。说明ｃａｓｐａｓｅ ３ 参与了γ 射线诱导的ＨＬ ６０ 细胞凋亡,可能是该凋亡途径的枢纽元件     

大鼠移植性肝癌MRI信号特征与定量分析

通过对Ｗａｌｋｅｒ２５６移植性肝癌的动物模型的ＭＲＩ图像信号以及Ｔ１值、Ｔ２值的测定分析，提出了在０．３５Ｔ磁场强度下大鼠移植性肝癌ＭＲＩ信号定量分析的模式和意义。提出：（１）大鼠移植瘤的Ｔ１值与正常肝组织Ｔ１值有较大重叠，诊断意义不大；（２）移植瘤Ｔ２值与正常厅组织Ｔ２值无重叠有诊断意义；（３）移植瘤Ｔ２ＷＩ－ＳＩＲ值亦具有诊断意义。建议各种不同磁场强度的机器可建立自己的定量分析标准。     

THE EDDY LOSSES OF A MAGNETIC THRUST BEARING

Accurate calculations of losses associated with the operation of magnetic bearings are particularly important for high speed applications where the rotor losses are expected to be large and for some particular applications where even low power losses will be critical. Power losses in the magnetic thrust bearing is often neglected, but if there is misaligned in the rotor and bearing, the magnetic field in the thrust bearing is no longer axisymmetric one, or the dynamic control current in the winding is time dependent one, eddy currents are caused to flow inside the conducting material, then the power losses are very important for magnetic bearing design. This paper presents an analytical model of a thrust magnetic bearing, and the magnetic fields, forces and losses of thrust magnetic bearing are calculated. In the calculations the frequency of dynamic control current is up to 1 000 Hz, rotating speed is from 60 rpm to 1 200 rpm, and the non-linearity of material is also taken into consideration. The results shows that if the magnetic field is not saturation, the eddy losses is proportional to dynamic control current frequency and a square function of dynamic control current, and also 5/2 power function of shafts speed.     

人宫颈癌细胞凋亡与Bcl-2表达的研究

目的　探明 Bcl- 2在宫颈癌细胞凋亡过程中的作用。方法　采用 60 Co和顺铂处理体外培养的 3株人宫颈癌细胞株 Hela、Si Ha、RJC,2 4 h后检测细胞凋亡和 Bcl- 2。结果　发现放射线 60Co和顺铂均可以诱发宫颈癌细胞凋亡 ;它们都表达 Bcl- 2 ,其表达率随着细胞凋亡的出现而下降 ;两种因素联合应用后诱导细胞凋亡和降低 Bcl- 2表达的作用增强。结论　 Bcl- 2的表达可能参与了宫颈癌细胞凋亡的调节过程