HtrA1和TGF-β1在妊娠期高血压病患者胎盘中的表达

目的探讨HtrA1(high temperature requirement A1,HtrA1)和TGF-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)在妊娠期高血压病患者(简称妊高病)胎盘组织中的表达及作用。方法利用免疫组化SABC法检测正常妊娠者60例(对照组)和妊高病者70例(实验组)(其中妊娠期高血压组24例,轻度子痫前期组20例,重度子痫前期组26例)胎盘组织中HtrA1和TGF-β1的蛋白表达,并进行相关性分析。结果 HtrA1在实验组中的表达较对照组显著增高(平均灰度分别为155.05±3.13、152.69±4.11,P<0.01);与对照组比较,轻度子痫前期组、重度子痫前期组均显著增高(分别为154.05±4.96、156.03±5.07,P分别<0.05、<0.01)。TGF-β1在实验组中的表达较对照组显著增高(平均灰度分别为156.33±4.79、152.39±4.84,P<0.01);与对照组比较,轻度子痫前期组、重度子痫前期组均显著增高(分别为159.79±3.92、165.82±3.20,P<0.01)。Pearson相关分析HtrA1与TGF-β1的表达水平在实验组中呈正相关。结论 HtrA1和TGF-β1可能通过某些机制相互调控、协同,两者高表达可能与妊高病的发生发展有关。     

Syncytin在正常妊娠及子痫前期胎盘组织中的表达及意义

目的探讨syncytin在正常妊娠及子痫前期胎盘组织中的表达及意义。方法采用荧光实时定量PCR(Real-time FQ-PCR)方法检测正常晚期妊娠(20例)、晚发型子痫前期轻度(20例)、重度(25例)及早发型重度子痫前期(15例)胎盘组织中syncytin mRNA表达。结果 Syncytin mRNA在正常妊娠晚期及子痫前期胎盘组织中均有表达;晚发型子痫前期与正常晚孕比较,胎盘组织syncytin mRNA表达降低,且与病情严重程度相关;早发型与晚发型比较,早发型重度子痫前期表达降低更为明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Syncytin mRNA在子痫前期胎盘组织中表达降低,早发型降低更为明显,而syncytin与滋养细胞融合有关,提示滋养细胞融合障碍可能在子痫前期发病中发挥作用。     

HtrA1、Survivin在早发型重度子痫前期胎盘组织中的表达及意义

目的探讨HtrAl(high temperature requirement A1,HtrAl)及Survivin在早发型重度子痫前期(early-onset severe preeclampsia,ES-PE)胎盘组织中的表达及其意义。方法采用SABC法测定早发型(30例)与晚发型(35例)重度子痫前期患者胎盘组织中HtrA1及Survivin的表达。结果 HtrAl在早发型重度子痫前期胎盘组织中的表达明显高于晚发型,平均灰度值分别为142.63±3.48和158.72±4.26(平均灰度值与表达强度成负相关),差异有统计学意义(P<0.05);Survivin在早发型重度子痫前期胎盘组织中的表达明显低于晚发型,平均灰度值分别为138.32±3.26和126.47±2.85,差异有统计学意义(P<0.05);HtrA1和Survivin在子痫前期胎盘组织中的表达呈负相关(r=-0.67,P<0.05)。结论 HtrA1、Survivin与早发型重度子痫前期的发生密切相关,提示早发型重度子痫前期与晚发型发病机制可能不同。     

HtrA1在宫颈上皮内瘤样病变及宫颈鳞癌中的表达及临床意义

目的探讨HtrA1在宫颈鳞状上皮内瘤样病变(CIN)及宫颈鳞癌中的表达及临床意义。方法采用免疫组化S-P法对10例正常宫颈、28例CIN(其中轻度8例、中度10例、重度10例)、25例原位癌及40例宫颈浸润鳞癌标本中HtrA1的表达进行检测,并与临床病理分级等进行相关分析。结果正常宫颈组织中HtrA1无阳性表达。CIN、原位癌的阳性表达率分别为21.4%及60%,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。浸润癌阳性表达率为52.5%,较原位癌组显著降低(P<0.05)。HtrA1阳性表达率与宫颈癌临床分期呈负相关(r=-0.622,P<0.05),与病理分级无关(P>0.05)。无淋巴结转移者HtrA1阳性表达明显高于有淋巴结转移者(P<0.05)。结论 HtrA1表达对宫颈癌的发生发展及评估预后有重要意义,可能是一种肿瘤抑制因子。     

HtrA1表达被沉默的滋养细胞株HPT-8/pSilencer4.1-HtrA1的构建

目的构建pSilencer4.1/HtrA1质粒,稳定转染人滋养细胞株HPT-8。方法免疫组化SABC方法检测HtrA1在HPT-8细胞中的表达;构建pSilencer4.1/HtrA1质粒;将pSilencer4.1/HtrA1质粒、pSilencer4.1空白质粒转染HPT-8,观察转染后细胞HtrA1的表达情况。结果 HPT-8约90%左右的细胞胞质被染成棕黄色,胞核未见明显染色。转染pSilencer4.1/HtrA1质粒的HPT-8细胞的G418筛选质量浓度为200μg/mL。RT-PCR、Western blot法鉴定转染细胞HtrA1的表达,结果显示转染Psilence4.1/HtrA1重组质粒的细胞中HtrA1表达水平较空白质粒、正常细胞明显下降(P均<0.05)。空白质粒组、HPT-8组间吸光度值无统计学差异(P>0.05)。结论成功构建了稳定的、HtrA1沉默表达的滋养细胞株HPT-8/pSilencer4.1-HtrA1,为下一步的研究奠定了实验基础。     

survivin蛋白及其mRNA在子痫前期患者胎盘中的表达

目的 探讨survivin蛋白及其mRNA的表达与子痫前期的关系.方法 采用免疫组化SP法和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术,检测20例轻度子痫前期、25例重度子痫前期和20例正常晚孕妇女胎盘组织中survivin蛋向及其mRNA的表达情况.结果 survivin蛋白主要位于绒毛小叶的合体滋养细胞及细胞滋养细胞,在子痫前期胎盘中的表达较正常晚孕妇女明显降低,且重度子痫前期的表达明显低于轻度;survivin mRNA在子痫前期胎盘中的表达也明显低于正常晚孕,重度明显低于轻度.结论 胎盘组织中survivin蛋白及其mRNA的异常表达可能在子痫前期的发生中起着重要的作用.     

Y-box结合蛋白-1在胃癌组织中的表达及意义

目的 研究Y-box结合蛋白-1(YB-1)在胃癌的不同发展阶段中的表达及其意义.方法 采用免疫组织化学和原位杂交方法检测正常胃组织、肠化生组织、早期胃癌和进展期胃癌组织中YB-1蛋白和mRNA的表达变化.结果 在正常胃组织中YB-1蛋白和mRNA无表达;在肠化生组织中可见YB-1阳性染色于胃黏膜上皮细胞中,但表达较弱;在早期胃癌中YB-1表达于全层胃黏膜上皮细胞中,染色较肠化生组织重,而在进展期胃癌中其表达较在早期胃癌中下降.结论 YB-1的升高可能在胃癌的早期发生和发展中起作用.     

ADAMDEC1蛋白在胶质瘤中的表达及其意义

目的探讨ADAMDEC1蛋白在胶质瘤中的表达及意义。方法前瞻性观察82例胶质瘤患者ADAMDE1的表达情况,其中Ⅳ级胶质瘤28例、Ⅲ级胶质瘤26例,设为高级别胶质瘤组;Ⅱ级胶质瘤23例、Ⅰ级胶质瘤5例,设为低级别胶质瘤组;对照组10例脑组织标本为取自重型颅脑外伤行内减压术的正常脑组织。采用qPCR、免疫组化、Western bloting法检测胶质瘤组织中ADAMDEC1的表达;随访调查统计高级别胶质瘤患者、低级别胶质瘤患者的生存周期与组织中ADAMDEC1表达量的相关性。结果 qPCR、免疫组化、Western blotting结果均显示,高级别胶质瘤ADAMDEC1表达明显增高,低级别胶质瘤ADAMDEC1极少表达,对照组脑组织中ADAMDEC1不表达;高级别组与低级别组及对照组脑组织比较,差异有统计学意义(P<0.05)。随访调查显示,高级别胶质瘤患者生存周期明显较低级别胶质瘤患者短,但组织内ADAMDEC1表达量高级别胶质瘤明显高于低级别胶质瘤,差异有统计学意义(χ2=5.031,P<0.05)。结论 ADAMDEC1的表达与胶质瘤肿瘤细胞病理学上的恶性程度及胶质瘤患者预后密切相关,ADAMDEC1可作为胶质瘤恶性程度分级评判及胶质瘤预后情况的指标。     

血管内皮生长因子及其受体在正常绒毛及葡萄胎组织中的表达及意义

目的　观察血管内皮生长因子 (VEGF)及其受体 (Flk 1)在正常绒毛及葡萄胎组织中的表达 ,探讨其在葡萄胎发生、转归及恶变方面的作用及意义。方法　应用免疫组织化学方法检测VEGF及其受体Flk 1在葡萄胎组织中的表达。结果　VEGF、Flk 1在葡萄胎中的表达与葡萄胎的孕周、胎次及病理类型无明显相关性 ;但在疾病发展中 ,VEGF和受体Flk 1具有促进血管生成及增加滋养细胞侵袭性的双重作用。结论　VEGF和其受体的表达水平可以作为反映滋养细胞生物学行为、判断病情发展和预后的一项新指标。     

MDR1、BCRP和LRP基因在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的探讨多药耐药基因(MDR1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)及肺耐药蛋白(LRP)mRNA在乳腺癌组织中的表达及其相互关系,分析它们与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR方法检测2007年1月至2007年12月在宁夏医科大学附属医院手术切除的42例乳腺癌组织、42例癌旁组织及50例乳腺良性病变中MDR1、BCRP和LRP mRNA的表达。结果乳腺癌组织中MDR1、BCRP、LRP mRNA的阳性表达率分别为40.47%、38.09%及61.90%,与癌旁组织及乳腺良性病变组织相比阳性表达率均有统计学差异(P<0.05)。MDR1mRNA表达与绝经状况呈完全正相关(r=0.398,P<0.01),与腋窝淋巴结状况呈完全正相关(r=0.398,P<0.01);BCRP mRNA表达与腋窝淋巴结状况呈正相关(r=0.355,P<0.05);LRP mRNA表达与绝经状况、年龄、腋窝淋巴结状况及肿瘤大小之间均无相关性(P>0.05);MDR1mRNA和BCRP mRNA表达呈正相关(r=0.652,P<0.01),LRP mRNA与MDR1mRNA表达无相关性(r=0.147,P>0.05);LRP mRNA和BCRP mRNA表达无相关性(r=0.111,P>0.05)。2个耐药基因共表达率为47.61%,2种或3种耐药基因共表达率为61.89%。结论乳腺癌组织中存在耐药基因MDR1、BCRP和LRP的表达,单基因和多基因协同作用,以多基因共表达为主;检测MDR1和BCRP基因表达水平可辅助临床判断乳腺癌患者的预后。     

血清高迁移率族蛋白B1在重型乙型病毒性肝炎中的临床意义

目的初步探讨人高迁移率族蛋白B1(HMGB1)在重型乙型肝炎中的临床意义。方法采用酶联免疫吸附法,检测70例慢性重型乙型肝炎、70例慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染者、35例健康体检者的血清HMGB1水平,并对其中30例慢性重型乙型肝炎患者入院时、入院后第7天、第14天血清HMGB1水平进行动态检测;同时进行相关化验指标的检测,根据终末期肝病模型(model for end-stage liver disease,MELD)评分2002年标准版公式即:MELD分值=3.8×ln[胆红素(mg/dL)/18]+11.2×ln(INR)+9.6×ln[Cr(mg/dL)/88]+6.4×(病因:胆汁性或酒精性0,其他1),对重型乙型肝炎患者进行MELD评分计算。结果正常对照组、慢性HBV感染组、慢性重型乙型肝炎组患者血清HMGB1水平(μg/L)分别为:14.29±4.01、49.68±7.72、61.92±15.42,重型乙型肝炎组明显高于慢性HBV感染组及正常对照组(P<0.01),慢性HBV感染组高于正常对照组(P<0.01);重型乙型肝炎患者中存活组与死亡组血清HMGB1水平(μg/L)分别为:62.02±16.16、62.59±14.97,两者无明显差异(P>0.05);HMGB1水平与MELD评分无明显相关性(P>0.05);动态检测发现,死亡组患者入院后血清HMGB1水平持续下降,而存活组患者入院后血清HMGB1水平下降至第7天后出现再次上升趋势。结论 HMGB1可能与重型乙型肝炎的发生发展有关;血清HMGB1水平与MELD评分及患者预后未见明显相关性;动态检测血清HMGB1水平,可能对重型乙型肝炎患者预后预测有一定的意义。     

C-myc蛋白在脑胶质瘤组织中的表达及意义

目的探讨C-myc蛋白在脑胶质瘤组织中的表达情况及其与肿瘤恶性程度之间的关系。方法应用免疫组织化学方法检测40例脑胶质瘤组织标本中的C-myc蛋白表达情况。结果C-myc蛋白阳性染色主要定位于脑胶质瘤细胞的胞浆或胞核中,其表达强度与脑胶质瘤的组织学分级相关,随着脑胶质瘤恶性程度的增高,C-myc的表达强度和阳性细胞百分比也随之逐渐增加,各级之间均有显著性差异(P<0.05)。结论C-myc蛋白在脑胶质瘤组织中呈过度表达,并与脑胶质瘤的恶性程度密切相关。     

人尿道狭窄瘢痕组织中胶原蛋白含量和转化生长因子β_1的表达及意义

目的探讨人尿道瘢痕组织中胶原蛋白含量和转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及其意义。方法应用免疫组织化学SP法和VG染色方法检测了16例尿道狭窄患者及6例正常人尿道组织中的TGF-β1表达和胶原蛋白含量。结果尿道狭窄瘢痕组织中TGF-β1蛋白表达较强,阳性表达率100%,且其表达主要集中在瘢痕成纤维细胞、巨噬细胞及血管内皮细胞的胞浆和胞膜;而正常尿道组织中TGF-β1表达较弱,阳性表达率仅为33.3%。两组比较差异有显著性(P<0.05)。VG染色结果显示尿道瘢痕组织中胶原纤维染色密集,成束状排列;而正常尿道组织胶原纤维染色淡,成网状排列。结论TGF-β1和胶原蛋白与尿道瘢痕形成关系密切,抑制TGF-β1过度表达将有助于预防和减轻尿道狭窄的发生。     

PARP-1在大鼠弥漫性轴突损伤脑组织中的表达及意义

目的探讨多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP-1)在大鼠弥漫性轴突损伤(DAI)脑组织中的表达变化及意义。方法健康成年雄性SD大鼠36只,随机分为6组:正常对照组、DAI后30min组、DAI后6h组、DAI后12h组、DAI后24h组、DAI后7d组,每组各6只。采用大鼠头颅瞬间旋转损伤装置制作DAI模型。在预定时间点取大脑皮质、脑干进行HE染色、银染及PARP-1免疫组织化学染色,采用阳性细胞计数法进行半定量统计,用单因素方差分析和SNK-q检验进行统计学处理。结果光镜下银染可见大鼠DAI后脑皮质及脑干存在轴突回缩球,HE染色可见不同程度的轴突肿胀、神经细胞核固缩、血管内皮细胞肿胀、血管周间隙增大。上述形态改变在DAI后12h至24h达到高峰。PARP-1在正常对照组脑皮质、脑干的神经元及神经胶质细胞的细胞核内有少量阳性表达。在DAI组的神经元及神经胶质细胞,以胞核阳性表达为主,同时存在胞质阳性表达。DAI后30min时脑皮质及脑干阳性细胞数明显增加,12h达到高峰,24h开始下降,到7d时脑皮质阳性细胞数仍高于正常水平(P<0.05),脑干阳性细胞数与正常对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PARP-1在DAI后皮质与脑干呈明显规律性表达;其变化规律与皮质和脑干的结构变化呈同步性动态改变;PARP-1可能在DAI后的继发性脑损伤中起重要作用。     

电流损伤后大鼠血清淀粉酶水平的变化及法医学意义

目的 观察电流损伤后大鼠血清淀粉酶(AMS)的变化情况,并探讨其变化规律及其法医学意义.方法 利用110V交流电电击大鼠,建立大鼠无明显电流斑电击损伤模型.于电击后即刻、15、30min、1、2、3、4、5、6、7、8h,分别采集电击组大鼠和空白组大鼠的动脉血进行AMS全自动生化分析.结果 电击组大鼠血AMS在电击损伤...     

NRP-1在胃癌组织及细胞系中的表达及临床意义

目的研究神经纤毛蛋白1(NRP-1)在胃癌组织的表达,探讨其与胃癌发生、发展及临床病理因素的关系及可能的临床意义。方法应用免疫组织化学染色检测180例胃癌患者的胃癌组织及癌旁组织标本NRP-1表达,用免疫印迹方法检测胃癌组织及不同分化程度的胃癌细胞NRP-1表达,K-M生存曲线和多因素回归模型用于分析胃癌预后。结果胃癌组织中NRP-1表达水平明显高于癌旁组织(P<0.001),胃癌组织中NRP-1高表达与肿瘤分化程度、淋巴结转移、AJCC分期、T分期呈正相关(P<0.05)。多因素生存分析表明高表达NRP-1是胃癌患者总生存期的独立预后因子。结论过表达NRP-1可能在胃癌进展中发挥着重要作用,过表达NRP-1可作为生物标志物预测胃癌患者的不良预后。     

基质金属蛋白酶-9在宫颈癌中的表达及意义

目的探讨基质金属蛋白酶-9(MMP-9)蛋白在宫颈癌中的表达及意义。方法采用免疫组织化学SP法检测MMP-9蛋白在18例正常宫颈上皮、20例宫颈原位癌、55例宫颈浸润癌中的表达。结果MMP-9在宫颈浸润癌中的表达率明显高于正常宫颈组织和宫颈原位癌(P<0.05),而正常宫颈组织和宫颈原位癌组织之间无显著性差异(P>0.05)。MMP-9的表达与宫颈鳞癌不同临床分期、肿瘤大小、病理分级无显著性差异(P>0.05),而在宫颈浸润不同深度间及有无淋巴转移的差异有显著性(P<0.05)。结论MMP-9在宫颈浸润癌中呈高表达,MMP-9可能通过降解破坏细胞外基质(ECM)和基底膜(BM)而发挥促进宫颈癌发生、发展、浸润转移的作用。