硒与锌对培养人胚心肌细胞~3H-TdR参入DNA的影响

本文应用不同浓度的硒(0.50、0.75、1.00μg/ml)和锌(0.10、0.50、1.00μg/ml)分别加入心肌细胞培养液中,观察两者对~3H-TdR 对 DNA 参入率的影响.实验结果显示,加入 Se 0.50μg/ml 及 Zn 0.50～1.00μg/ml,能增加~3H-TdR 的参入率。     

自身免疫性甲状腺疾病生长刺激抗体的测定及其研究(摘要)

<正> 本文利用FRTL?5细胞为靶细胞,以~3H-TdR掺入细胞DNA内值,细胞cAMP产生量为终点测定,聚乙二醇(PEG)法制备IgG。对61例活动性Graves’甲亢(GD),16例散发性甲肿,9例慢性淋巴细胞性甲状腺炎(HT)病人和33例正常对照血清中的甲状腺生长刺激抗体(TGAb)活性进行了测定,同时也测定3部     

体外诱导人脐血CD34~+细胞向肝细胞的分化

目的探讨在体外培养条件下人脐血CD34+细胞向肝细胞的分化。方法用磁性细胞分选试剂盒(MACS)分离出CD34+细胞后在含50 mL/L FBS,1×ITS,4.7 mg/L亚油酸,10-4mol/L 2-磷酸抗坏血酸的低糖型DMEM中培养,并以FGF4(100μg/L)、HGF(20μg/L)进行诱导。分别于生长因子刺激前和刺激8、16 d时留取细胞。通过RT-PCR对ALB、AFP、GATA-4等mRNA的表达水平进行检测;用免疫细胞化学染色检测ALB蛋白的表达,并收集培养液测定ALB的质量浓度。结果流式细胞仪检测结果显示CD34+细胞的平均分离纯度>90%,达到分离要求。RT-PCR检测到诱导后的CD34+细胞表达ALB、AFP、GATA4 mRNA。免疫细胞化学染色可见诱导16 d的CD34+细胞出现ALB阳性表达细胞,ELISA检测表明诱导组8、16 d培养液中的ALB质量浓度明显增高,与诱导前和未诱导组相比均有显著差异(P<0.01)。结论在体外培养条件下,脐血CD34+造血干细胞可分化为表达白蛋白的类肝细胞。     

白细胞介素-6对脐血单个核细胞分化为树突状细胞的诱导作用

目的研究有无白细胞介素-6(IL-6)的两种不同细胞因子组合对脐血单个核细胞(CB-MNC)分化为树突状细胞(DC)的诱导作用及效率。方法通过两步法,采用两种不同细胞因子组合诱导CB-MNC分化为DC,即FST组和FST6组,分别为Flt3配体(FL)+干细胞因子(SCF)+促血小板生成素(TPO)、FL+SCF+TPO+IL-6。倒置显微镜下进行形态学观察、流式细胞仪检测其表型、比较两组间同样条件下诱导的DC数量、混合淋巴细胞反应(MLR)、酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测培养液上清中白介素-12(IL-12)、白介素-10(IL-10)的浓度。结果 1FST组培养的细胞表面分子表达分别为CD1a(11.83±3.45)%、CD83(31.15±8.35)%、CD11c(95.18±2.92)%、CD40(93.10±5.26)%、CD86(86.24±7.17)%,同等条件下获得上述表型的细胞(2.03±0.13)×106个;2FST6组培养的细胞表面分子表达分别为CD1a(13.62±4.05)%、CD83(27.82±8.81)%、CD11c(83.29±5.31)%、CD40(85.30±6.85)%、CD86(78.86±2.23)%,同等条件下获得上述表型的细胞(2.58±0.11)×106个DC。两者均具有刺激T淋巴细胞增殖和分泌IL-12、IL-10的功能。结论 FST组和FST6组通过两步法均能成功诱导出功能性成熟的DC,FST6组诱导DC效率更高。     

硒对胎鼠肝细胞核酸及蛋白质合成的影响

本文报道了微量元素硒对培养纯种Wistar大白鼠胎肝细胞核酸及蛋白质合成的影响。观察了肝细胞培养基中不同硒水平对~3H-TdR(~3H-脱氧胸苷)、~(14)C-UR(~(14)C-尿苷)参入率的影响,同时还测定了培养基中白蛋白及甲胎蛋白(AFP)的含量。结果显示:细胞培养基中硒(Se)浓度在0.4～0.6μg/ml范围内使~3H-TdR、~(14)C-UR的参入率、白蛋白及甲胎蛋白含量均明显高于不补硒组。说明硒在这一浓度范围内能促进肝细胞DNA、RNA更新率及蛋白质合成。     

姜黄素对多巴胺诱导PC12细胞凋亡的保护作用

目的探讨姜黄素对多巴胺(dopamine,DA)氧化应激损伤PC12细胞(肾上腺嗜铬细胞瘤细胞株)的拮抗作用的分子机制。方法以DA损伤PC12细胞为氧化应激损伤的模型,依次分成空白对照组、姜黄素组(20μmol/L)、DA组(200μmol/L)及DA(20μmol/L)+姜黄素组(200μmol/L),细胞培养24h后,采用MTT法检测细胞的增殖状况,采用Western blotting检测Bcl-2、Cyt-c及Caspase-3等蛋白的表达水平。结果①姜黄素可使DA对PC12细胞的抑制率明显下降。②姜黄素抑制DA诱导的细胞内抗凋亡蛋白Bcl-2的表达下调。姜黄素本身能上调细胞内Bcl-2的蛋白表达水平。③姜黄素抑制DA诱导的细胞凋亡蛋白Cyt-c表达上调。④姜黄素抑制DA上调细胞内裂解型Caspase-3蛋白的表达,但姜黄素本身对裂解型Caspase-3的表达无影响。结论姜黄素对DA氧化应激损伤PC12细胞的拮抗作用是通过抑制抗凋亡蛋白Bcl-2的表达下调及抑制Cyt-c及Caspase-3的上调来实现的。     

乙型肝炎患者AMLR及非T细胞Ia抗原表达

本文用氚标胸腺嘧啶核苷,（~3H-TdR）掺入法检测102例各种类型乙肝病毒感染者自身混合淋巴细胞反应（AMLR）、并以单克隆抗体（McAb）Wu35（HLA-DR）和Wu22（HLA-DQ）,经PAP免疫酶组化技术测定非T细胞表面HLA-DR及HLA-DQ抗原。结果表明:除HBsAg携带者及慢性迁延性肝炎患者AMLR接近正常对照外,其它类型HBV感染者AMLR均有不同程度降低,尤其以重症肝炎和肝硬化降低明显。各类乙肝患者DR~+Mon和B细胞及DQ~+Mon和B细胞百分率均有不同程度的下降,以重症肝炎和肝硬化最显著。提示乙肝患者AMLR降低与刺激细胞（Mon和B细胞）表面DR和DQ抗原表达障碍有密切关系,与反应性T细胞无关。这可能是乙型肝炎疾病过程中细胞免疫功能障碍及免疫调节紊乱之机制所在。     

黄芩苷对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的抑制作用及其机制

目的观察黄芩苷对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的作用及其相应机制。方法利用MTT法检测黄芩苷对HeLa细胞增殖的影响;Transwell小室法检测黄芩苷对HeLa细胞侵袭能力的影响;Real-time PCR法检测黄芩苷对MMP-2、MMP-9RNA表达水平的影响;Western blot法检测黄芩苷对MMP-2、MMP-9蛋白表达的影响;Western blot法检测黄芩苷对P38和p-P38蛋白表达的影响;Real-time PCR法检测黄芩苷和sb203580联合应用对MMP-2和MMP-9RNA表达水平的影响。结果黄芩苷能够有效抑制HeLa细胞的增值,当质量浓度超过60μg/mL时,与对照组相比(0μg/mL)差异出现统计学意义。在低于细胞增殖抑制浓度时,黄芩苷也能够有效抑制HeLa细胞的侵袭,10、20、40μg/mL组穿过基质胶到达小室底端的细胞数目分别为对照组的(97.58±17.78)%、(67.95±49.75)%和(32.35±20.41)%。黄芩苷能够有效抑制HeLa细胞中MMP-2和MMP-9的表达及有效抑制HeLa细胞中P38的磷酸化水平;P38信号通路抑制剂预处理,能够增强黄芩苷对MMP-2和MMP-9表达的抑制作用。结论黄芩苷能够有效抑制HeLa细胞的侵袭转移,这种作用可能与其通过调节P38信号通路的活性进一步调节MMP-2和MMP-9的表达有关。     

IL-1β、IL-6对人冠脉平滑肌细胞表达基质金属蛋白酶-3的影响

目的探讨炎症因子白介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)对人冠脉平滑肌细胞表达基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)的影响。方法①采用20μg/L的IL-1β、10μg/L的IL-6各自刺激人冠脉平滑肌细胞,共同培养0、2、4、8、24、36 h后收集细胞;②采用不同质量浓度的IL-1β(0、5、20、40μg/L)、IL-6(0、5、10、50μg/L)刺激人冠脉平滑肌细胞,共同培养6 h后收集细胞。③应用实时荧光定量PCR方法检测细胞内MMP-3基因的表达量。结果①在同剂量IL-1β、IL-6刺激下,MMP-3的表达量在2 h时就开始发生上调,8 h达高峰,而后开始下降;②在不同剂量IL-1β、IL-6刺激下,MMP-3的表达量在实验剂量范围内随着剂量的加大呈上升趋势(IL-1β:r=0.907,P=0.000;IL-6:r=0.919,P=0.000)。各因子不同剂量组MMP-3的表达量均具有显著性差异(IL-1β:F=24.047,P=0.000;IL-6:F=14.081,P=0.001)。IL-1β20μg/L和40μg/L组间MMP-3表达量没有显著性差异(P=0.154),IL-6 5μg/L和10μg/L组间MMP-3表达量没有显著性差异(P=0.292)。结论炎症因子IL-1β、IL-6能促进冠脉平滑肌细胞中斑块稳定相关标记物MMP-3的表达,这可能是炎症在急性冠脉综合征发生发展中的重要作用机制之一。     

结缔组织生长因子对视网膜色素上皮细胞增生和黏附的调节作用

目的观察重组人结缔组织生长因子(rhCTGF)对视网膜色素上皮(RPE)细胞增生和黏附的影响。方法用CTGF蛋白、多聚赖氨酸(PLL)和胶原分别包被培养板,观察CTGF促进RPE细胞黏附的作用;用四唑盐(MTT)比色试验和流式细胞仪(FCM)测定RPE细胞增生反应。结果10-30 mg/L的CTGF蛋白提高RPE细胞的贴壁黏附能力,与未包被的对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);30 mg/L CTGF促进RPE细胞黏附的能力与0.1 g/L胶原的作用一致,但略低于0.1 g/L PLL的作用。MTT实验显示CTGF刺激RPE细胞生长,CTGF作用24 h刺激RPE细胞增生的能力最强。FCM测定细胞周期结果显示S期百分比随着CTGF浓度增加而逐渐增加,无血清培养的对照组S期百分比为(7.5±0.4)%,60μg/LCTGF刺激24 h后,S期百分比上升至(16.1±2.0)%。结论CTGF可以促进RPE细胞的黏附和增生,在增生性玻璃体视网膜病变等眼内增生性疾病中可能有重要意义。     

INTRAUTERINE GROWTH RETARDATION AT FULL TERM PREGNANCIES WITH ENDOCRINE FACTORS

Intrauterinegrowthretardation(IUGR)isoneofthecriticalcomplicationsduringpregnancyandremainsthemajorcauseofperinatalmorbidityandmorta1ity.Despiteadvancesintheresearchofeti-ology,pathogenesis,diagnosis,andmanagementforIUGR,doctorscouldneitherdiagnoseitcor-rectlynormanageitefficiently.ThedataprovidedbynationalresearchinggroupforbirthdefectsshowedthattheincidencerateofIUGRwas6.38%inChina.Amongthetotalperinataldeathofneonates,themortalityofIUGRaccountsfor42.3%.Moreover,evenaftertheirbirth,th…     

用表达重组TSH受体的CHO细胞测定Graves'甲亢病人血清中的TSAb

用表达重组人ＴＳＨ受体的中国仓鼠卵细胞（Ｃｈｉｎｅｓｅｈａｍｓｔｅｒｏｖａｒｙｃｅｌ,ＣＨＯ）细胞代替传统的ＦＲＴＬ－５细胞测定Ｇｒａｖｅｓ甲亢病人的血清甲状腺刺激抗体（ＴｈｙｒｏｉｄＳｔｉｍｕｌａｔｉｎｇＡｎｔｉｂｏｄｙ,ＴＳＡｂ）水平,方法相对简单,特异性强,敏感性高,未治疗的Ｇｒａｖｅｓ病人９２．７％阳性,治疗后迅速下降,恢复期的阳性率为３５％,该方法对Ｇｒａｖｅｓ甲亢的诊断、治疗后效果的判断有重要意义。     

不同浓度的硒对体外培养心肌细胞搏动图的影响

用三种不同浓度的硒(0.5μg Se/ml、0.75μg Se/ml、1.0μg Se/ml),分别加入体外培养的心肌细胞,观察到加入0.5μg Se/ml后的90％心肌细胞搏动的频率和强度有明显的加快和增强(加硒前频率为92±46次/分,强度为0.65±0.29mm。加硒后频率为188±34次/分,强度为3.1±0.36mm,p<0.01),节律整齐不变或使不整齐的搏动在加硒后变为整齐的搏动;加入0.75μg Se/ml的心肌细胞搏动频率显著减慢)加硒前频率为116±38次/分,强度为0.54±0.15mm,加硒后频率为39±19次/分,强度为3.9±0.41mm,P<0.01)搏动节律由整齐变为不整齐;加入1.0μg Se/ml的心肌细胞搏动频率、强度仅稍有增加,但不明显,而显著的是搏动节律在加硒后5/7小时全部出现不整齐搏动,17～21小时停止搏动或仅有细胞颤动。     

EFFECTS OF DESENSITIZATION AND REBOUND TO ADENOSINE ON ACTION POTENTIAL AND CONTRACTILITY IN ATRIAL CELLS IN GUINEA-PIGS

Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ (Ａｄｏ)ｉｓａｎｅｎｄｏｇｅｎｏｕｓｐｕｒｉｎｅｎｕ ｃｌｅｏｓｉｄｅｔｈａｔｒｅｇｕｌａｔｅｓｍａｎｙｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌａｎｄｐａｔｈｏ ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌｐｒｏｃｅｓｓｅｓｉｎｂｏｄｙ .Ｔｈｅｅｆｆｅｃｔｓｏｎｃａｒｄ ｉｏｖａｓｃｕｌａｒｓｙｓｔｅｍａｒｅｅｓｐｅｃｉａｌｌｙｏｂｖｉｏｕｓ .Ｐｅｏｐｌｅｆｏｕｎｄｔｈａｔａｃｅｔｙｌｃｈｏｌｉｎｅ (ＡＣｈ)ａｎｄａｄｅｎｏｓｉｎｅｈａｄｔｈｅｎｅｇａｔｉｖｅｉｎｏｔｒｏｐｉｃ ,ｎｅｇａｔｉｖｅｃｈｒｏｎｏｔｒ…     

流式细胞术检测淋巴细胞亚群的研究

使用流式细胞仪检测了１名传染性单核细胞增多症（ＩＭ）患儿不同病期淋巴细胞亚群的动态变化；１２名肥胖患儿及２０名健康对照儿童的淋巴细胞亚群的比较。检测结果：ＩＭ患儿急性期ＣＤ４＋细胞（４．２％）显著减少，ＣＤ８＋细胞（７２．１％）及ＣＤ８＋ＨＬＡ－ＤＲ＋细胞（６６．２％）显著增加，恢复期及完全恢复后，上述亚群即随之好转至完全正常。肥胖儿童与正常儿童比较：ＣＤ３＋细胞、ＣＤ４＋细胞及ＣＤ４＋／ＣＤ８＋均明显降低，ＣＤ１９＋细胞、ＣＤ５６＋细胞、ＨＬＡ－ＤＲ＋细胞、ＣＤ２５＋细胞均出现有意义的升高。     

硒对人体白细胞氧化活性的影响——人全血化学发光法及其应用

本文首次采用改良的人全血化学发光法检测了不同浓度硒对10例健康成人白细胞氧化活性的直接影响。将四种不同浓度硒分别加入健康成人新鲜抗凝全血中,使其最终浓度分别为0.001μg/ml、0.01μg/ml、0.1μg/ml和1μg/ml,4℃冰箱储存,并于1小时、12小时和36小时进行化学发光的动力学测量,其结果与加硒前相比,化学发光峰值和60分积分值均无明显差异(P>0.05)。表明在此预防浓度范围内,亚硒酸钠对吞噬细胞的氧化活性无直接地激发或抑制作用。此为临床补硒及阐明作用机理提供参考依据。     

盐酸胍发新诱发小鼠骨髓细胞及地鼠肾细胞染色体畸变的研究

应用盐酸胍发新诱发小鼠骨髓细胞和地鼠肾细胞(BHK)染色体畸变效应研究。结果表明当1/4、1/8和、l/16 LD_(50)盐酸胍发新腹腔注射于小鼠体内时,骨髓细胞内染色体畸变频率没有增加。在8.5、4.25和2 .125mg/kg重试验中骨髓细胞畸变频率分别为0.014、0.198和0.114;而对照组为0.183.没有显著差异。当用0.5 mg、0.3mg 、0.15 mg盐酸胍发新处理培养的BHK细胞时频率是0.08、0.05和0.07,对照组是0 .05。经统计学分析试验组和对照组无显著差异(P>0.05).结果表明盐酸胍发新未见遗传危害。     

RP-HPLC法测定更昔洛韦血清浓度

为建立 HPL C法测定更昔洛韦血药浓度的方法。采用反相高效液相色谱法 ,以阿昔洛韦为内标 ,流动相为甲醇水溶液 (5∶ 95) ,检测波长为 2 52 nm。结果在 0 .2～ 15μg· ml-1范围内呈良好的线性关系。方法平均回收率为 10 0 .52 % ,RSD日内为 2 .7% ,日间为 2 .5%。说明本方法灵敏度高 ,适合于更昔洛韦的血药浓度测定及药代动力学研究。     

TRH兴奋试验对下丘脑－垂体病的诊断意义

作者对１０例正常人，８２例下丘脑－垂体病，５例神经衰弱患者行ＴＲＨ（促甲状腺激素的释放激素）兴奋试验，放免法同步测定血清ＴＳＨ（促甲状腺激素）、ＰＲＬ（泌乳素）和ＧＨ（生长激素）浓度。结果显示：下丘脑－垂体病的ＴＳＨ对ＴＲＨ的异常反应占６４．６３％，ＰＲＬ对ＴＲＨ的异常反应占６４．５６％；肢端肥大症的ＧＨ对ＴＲＨ的异常反应占７１．４％，且与正常人相比均有统计学意义（Ｐ＜０．０１），还讨论了该试验方法的诊断意义。     

褪黑素的免疫调节作用

目的　研究褪黑素对机体免疫功能的调节作用。方法　在同一时间内通过检测巨噬细胞吞噬率、血清半数溶血值 ,体外抗体形成细胞数量 ,MTT法淋巴细胞转化率及小鼠耳片肿胀度测定机体的非特异性和特异性免疫功能。结果　褪黑素能提高小鼠巨噬细胞吞噬率 ,血清半数溶血值 ,体外抗体形成细胞数量 ,淋巴细胞转化率及小鼠耳片肿胀度。结论　褪黑素可对免疫功能低下和免疫缺陷鼠发挥免疫上调作用。