大骨节病患者软骨中组织蛋白酶D的活性

本文测定了大骨节病和非骨关节病患者的关节软骨溶酶体组织蛋白酶D活性。结果表明,大骨节病患者组织蛋白酶D 活性不论是游离型或是酶的总活性均较非骨关节病患者的酶活性升高,游离型与酶总活性的比值也增大。     

低硒大骨节病病区粮对大鼠软骨Ⅱ型胶原合成代谢的影响

为探讨病区粮及硒对软骨胶原代谢的影响,采用低硒大骨节病病区粮,病区粮加硒和非病区粮喂养大鼠66d,观察了低硒KBD病区粮和硒对软骨Ⅱ型胶原合成代谢的影响。结果表明:①病区组Ⅱ型胶原甘氨酸、丙氨酸等疏水氨基酸含量较非病区组增高,羟脯氨酸和羟赖氨酸含量降低。病区粮加硒后上述变化可得到部分纠正。②病区组软骨Ⅱ型胶原脯氨酸和赖氨酸羟化程度分别较非病区组降低6.4%和7.7%。加硒组较病区组脯氨酸羟化程度增高9.4%,但赖氨酸羟化程度未增高。③病区组Ⅱ型胶原电泳迁移率及对胰蛋白酶敏感性与其它组无显著差别。     

大骨节病差异表达基因PAPSS2对成骨细胞矿化及碱性磷酸酶活性的影响

目的探讨大骨节病差异表达基因PAPSS2在MC3T3-E1细胞成骨样分化过程中的表达及其对碱性磷酸酶(ALP)活性和细胞矿化的影响。方法培养MC3T3-E1细胞并诱导成骨分化,观察PAPSS2在成骨细胞分化过程中的基因及蛋白表达情况;用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术或逆转录病毒转染高表达载体,分别构建PAPSS2低表达慢病毒及逆转录病毒高表达载体包装,滴度测定,验证细胞转染效率;分别转染MC3T3-E1细胞并设空白对照组,观察PAPSS2沉默或高表达后ALP活性的变化及细胞成骨矿化的影响。结果 PAPSS2在成骨细胞分化过程中mRNA及蛋白均随着矿化过程表达增加。用慢病毒介导的RNAi技术,成功降低了MC3T3-E1成骨细胞中PAPSS2的表达,使用逆转录病毒转染高表达载体显著增加PAPSS2基因的表达。PAPSS2沉默表达时,ALP活性和细胞矿化作用显著降低,高表达后其作用相反。结论 PAPSS2可调节成骨细胞ALP活性和细胞矿化作用,其异常表达可能与大骨节病骨骼病变相关。     

锌对大鼠急性缺血心肌溶酶体膜的影响

本实验结扎大鼠冠状动脉，造成急性心肌梗塞模型，观察锌对缺血心肌溶酶体酶的影响。结果表明，心肌缺血１ｈ后，缺血区心肌溶酶体酸性磷酸酶、组织蛋白酶Ｄ游离酶（Ｆ）及游离酶／总酶比值（Ｆ／Ｔ）明显升高，ＧＳＨ－Ｐｘ活性显著降低，脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）含量明显升高。而锌预处理大鼠心肌急性缺血后，Ｆ及Ｆ／Ｔ均显著下降，ＭＤＡ含量明显降低，但ＧＳＨ－Ｐｘ活性无明显改变。故锌可能通过ＧＳＨ－Ｐｘ以外的途径，增加溶酶体膜的稳定性，减轻心肌缺血性损伤。     

硒对大骨节病病区人体红细胞免疫功能的影响

目的　探讨硒及含硒的谷胱甘肽过氧化物酶 (GPX)对大骨节病 (KBD)病区人体红细胞免疫功能的影响。方法　测定KBD病区人体血硒含量 ,GPX活性 ,红细胞C36R花环率和IC花环率及血清RCIA促进率和抑制率 ,以及补硒对上述指标的影响。结果　①病区人体血硒含量、GPX活性和红细胞G3bR花环率明显低于非病区 ;血清RCIA抑制率明显高于非病区 ;②病区人体IC花环率 ,血清RCIA促进率与非病区人体无明显差异 ;③补硒 1 2周后 ,血硒含量 ,GPX活性 ,C3bR花环率明显提高 ;血清RCIA抑制率明显降低。④病区人体普遍处于低硒状态 ,且红细胞免疫功能均低下。结论　KBD病区人体红细胞免疫功能低下和血清RCIA抑制因子增高是低硒所致的一种普遍效应 ,而不是KBD病区人体所特有。     

组织蛋白酶D在胆管癌的表达及其与侵袭和转移的关系

目的　探讨组织蛋白酶D(CD)与胆管癌的分化、临床分期、浸润和转移的关系。方法　应用SP免疫组织化学方法测定 5 6例胆管癌石蜡标本CD的表达。结果　CD在胆管癌组织中的阳性表达率为 6 0 7% ,其表达与组织学类型和组织分化程度无关 ,与临床分期有关。CD在浸润组和淋巴结转移组的阳性表达率分别为 71 8%和 83 3% ,与未浸润组 (35 3% )和淋巴结未转移组 (5 0 % )相比 ,具有显著性差异 (P <0 0 5 )。结论　CD与胆管癌的浸润和淋巴结转移密切相关 ,可作为判断胆管癌患者预后的生物学指标。     

克山病病区粮对仔猪与大白鼠组织溶酶体酶活性的影响

本文测定了饲克山病病区粮 (Se 0.041PPm) 与病区粮加硒 (Se 0.25PPm) 两组仔猪的心肌和肝脏及大白鼠肝脏溶酶体组织蛋白酶D,透明质酸酶活性。病区粮仔猪心肌和肝脏组织蛋白酶D和心肌透明质酸酶的活性显著高于加硒组仔猪,但肝脏透明质酸酶的活性增高不显著。病区粮组大白鼠肝脏组织蛋白酶D的活性亦非常显著高于加硒组大白鼠,但透明质酸酶活性增高不显著。实验结果初步表明病区粮组仔猪和大白鼠心肌和肝脏的两种与蛋白质,粘多糖分解代谢有关的溶酶体酶异常。     

硒、蛋氨酸对饲克山病病区粮大鼠心、肝组织溶酶体膜的影响

利用差迷离心法分离提取大鼠心、肝组织富含溶酶体部分,并以溶酶体之标志酶酸性磷酸酶(ACP)及组织蛋白酶D(CD)的游离酶和总酶活性比值为观察溶酶体膜稳定性变化的指标。分别观察了低硒的克山病病区粮及病区粮加亚硒酸钠或蛋氨酸喂养的大鼠之心、肝溶酶体酶(ACD和CD)的活性变化。发现用低的病区粮喂养的大鼠心肝组织溶酶体膜的稳定性下降,而加硒或蛋氨酸后,其稳定性增加。考虑这种变化与大鼠心肝组织中的GSH-P_x活性变化有关。     

环氧氯丙烷对组织工程心脏瓣膜构建中基质金属蛋白酶1、3表达的影响

目的探讨环氧氯丙烷对组织工程心脏瓣膜构建中基质金属蛋白酶-1、3(matrix metalloproteinase-13、,MMP-1、3)表达的影响。方法采用去垢剂和胰蛋白酶消化制备的脱细胞猪主动脉瓣膜支架作为对照组,用30 g/L环氧氯丙烷处理24 h的去细胞支架材料作为实验组。将培养的人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymalstem cells,hBMSCs)种植于脱细胞支架上的组织工程心脏瓣膜(tissue engineering heart valve,TEHV),分别行石蜡包埋切片HE染色和扫描电镜观察TEHV的组织结构,并行RT-PCR测定hBMSCs分泌MMP-1、3的功能。结果hBMSCs在实验组脱细胞瓣膜表面生长良好,MMPs的表达比对照组降低。结论环氧氯丙烷处理的脱细胞猪主动脉瓣膜支架,可以抑制hBMSCs的MMP-1、3的表达。     

硒对克山病病区粮喂养大鼠心肌线粒体细胞色素氧化酶影响的电镜观察

本实验对病区粮及病区粮加硒喂养大鼠心肌细胞色素氧化酶(CCO),进行超微结构观察,发现病区粮加硒组大鼠心肌线粒体CCO 活性较病区粮组明显升高,并均定位于线粒体嵴膜和内膜,而病区粮组除一例大鼠心肌线粒体CCO 表现明显定位异常外,其余均未发现明显定位改变。     

THE PROSPECTIVE STUDY OF RELATIONSHIP BETWEEN LOW SELENIUM AND KASHIN-BECK DISEASE

Ｋａｓｈｉｎ－Ｂｅｃｋｄｉｓｅａｓｅ（ＫＢＤ）ｉｓａｎｅｎ－ｄｅｍｉｃ,ｃｈｒｏｎｉｃｏｓｔｅｏａｒｔｈｒｏｐａｔｈｙ．Ｔｈｅｍｏｓｔｏｆｃａｓｅ－ｃｏｎｔｒｏｌｓｔｕｄｉｅｓａｎｄｔｒｉａｌｓｏｆｐｒｅｖｅｎｔｉｏｎｆｏｒＫＢＤｉｎｌａｔｅｌｙｔｗ...     

克山病病区粮喂养大鼠对硒酵母硒的相对生物利用度

本研究用克山病病区低硒粮喂养大鼠比较了硒酵母和亚硒酸钠硒的生物利用度。在补硒2和4周时,用心、肝、肾和红细胞硒含量评估,硒酵母硒的生物利用度明显高于亚晒酸钠,说明硒酵母硒比亚硒酸钠硒更有效地存留于组织。当用血小板和肝谷胱甘肽过氧化物酶(GSH_(PX))活性评估时,硒酵母硒的生物利用度在补硒2周时比亚硒酸钠硒低,但在补硒4周时却高于之,表明硒酵母和亚硒酸钠硒均可供GSHP_(PX)合成所利用,但硒酵母恢复GSH_(PX)活性较慢。在停止补硒后,硒酵母维持心和红细胞硒以及肝和血小板GSH_(PX)活性的作用优于亚硒酸钠。     

EFFECT OF SELENIUM ON IMMUNE FUNCTION OFERYTHROCYTE IN KASHIN-BECK DISEASE

Objective To investigate the relationship between erythrocyte immune function and selenium （Se） level. Methods Forty-nine Kashin-Beck patients in endemic area aged 13- 1 6 years were divided into two groups and were orally given either selenized yeast or sodium selenite to provide 200 μg selenium per day for12 weeks. Erythrocyte selenium level, glutathione peroxidase activity, the rosette formation rates of red blood cells complement receptor typeⅠ （CR1）, the immune function of red blood cells, and circulating immune complexes（CIC） were determined. Results After supplementing with selenium for 12 weeks, erythrocyte selenium level, glutathione peroxidase activity, the rosette formation rates of red blood cells CR1 were significantly increased. But the difference in rosette formation rates of IC and CIC content was not significant between before and after Se supplementation. Gonclusion The increase of the immune function of the erythrocyte by selenium-supplement may be one of the effective mechanisms for the prevention of Kashin-Beck disease.     

硒对大鼠胰腺蛋白质合成和胰淀粉酶、糜蛋白酶活性的影响

本文以低硒的克山病病区粮为基础饲料,研究了改变饲料中硒含量单一因素对[~3H]—亮氨酸参入胰蛋白质的速率和胰淀粉酶、糜蛋白酶活性的影响。结果发现硒缺乏可使大鼠胰腺组织蛋白质合成速度和胰淀粉酶、糜蛋白酶活性下降。结合低硒组大鼠胰腺GSH-Px活性下降,TBA值升高,推测由于缺硒大鼠胰腺中脂质过氧化物和其代谢分解产物丙二醛积蓄,导致生物膜的结构破坏、DNA和RNA的结构和含量改变、能量供给不足,以及对蛋白质、酶分子、氨基酸等的破坏而影响蛋白质合成体系的功能,使蛋白质合成速度下降。由于分泌蛋白质的合成下降,则出现胰腺外分泌功能障碍,胰淀粉酶、糜蛋白酶等活力降低。食物补硒后可以保护正常胰腺的结构和功能。     

硒对克山病病区居民红细胞免疫功能的影响

给克山病病区14岁～16岁居民每日口服200μg亚硒酸钠硒或硒酵母硒12周后,测定血浆和红细胞硒含量以及红细胞C_(3b)受体花环率和免疫复合物花环率,以探讨补硒对病区居民红细胞免疫功能的影响。结果说明,补硒可使低硒人体血硒和红细胞免疫粘附功能增高;病区居民红细胞免疫功能低下与低硒有关;硒酵母硒提高血硒和红细胞免疫功能的作用比亚硒酸钠硒明显。     

硒对克山病病区粮喂养大鼠血清锌、铜、铁、锰、钴、钙和镁的影响

作者用克山病病区低硒粮和病区粮加硒饲料喂养大鼠３０～９０ｄ，分别于３０ｄ、６０ｄ和９０ｄ时测定了大鼠全血硒（Ｓｅ）、血清铜（Ｃｕ）、锌（Ｚｎ）、铁（Ｆｅ）、锰（Ｍｎ）、钴（Ｃｏ）、钙（Ｃａ）和镁（Ｍｇ）含量，以探讨硒对大鼠血清中上述元素水平的影响。结果表明：①克山病病区粮可使大鼠血Ｓｅ含量明显降低，但Ｓｅ水平的变化并不影响血清中Ｃｕ、Ｚｎ、Ｍｎ及其它所测元素的含量；②补硒可提高低硒大鼠血Ｓｅ水平，但是血清中所测上述元素含量并无明显改变。