用SPA—ELISA法检测不育症的抗精子抗体

笔者以SPA代替第二抗体采用ELISA法检测不育夫妇和有生育能力夫妇的精液及血液中抗精子抗体共220例,其检测结果,不育组阳性检出率为30.5%,生育组阳性检出率为7.6%,二者比较有显著性差异(P<0.001)。不育组男性阳性检出率为32.5%,女性28.4%,男女比较无显著性差异(P>0.05)。该方法具有操作简便,特异性强,敏感性高,重复性好等优点,是目前诊断免疫不育症的一个较为理想的实验方法。     

宫颈粘液超氧化物歧化酶活性及其在月经周期中的变化规律

为探索宫颈粘液中是否存在超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD),并了解其在月经周期中的变化规律,本研究对24例月经周期正常妇女的26个月经周期中宫颈粘液SOD活性进行连续测定。结果表明:宫颈粘液呈现SOD活性,在月经周期中发生特定变化;卵泡期与雌激素呈负相关,黄体期与孕激素呈正相关,排卵前SOD活性骤降,围排卵期呈低水平。提示:①宫颈粘液存在SOD,且具有活性,在生殖调节中可能发挥一定作用。②宫颈粘液SOD活性在排卵前骤降可做为预测排卵的指标。     

不孕不育与支原体感染和抗精子抗体的关系

目的　探讨不孕不育与支原体感染和抗精子抗体 (ASA)之间的关系。方法　采用培养法分别对 2 4 8例不孕妇女(观察组 )和 16 7例不育男性患者 (观察组 )进行解脲支原体 (UU)和人型支原体 (MH)检测 ;采用ELISA法检测血清抗精子抗体ASA IgM和ASA IgG。同时分别选择 6 9例正常妇女和 4 3例正常男性作为对照。结果　不孕症观察组及不育症观察组UU、MH阳性检出率均明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。不孕和不育观察组ASA阳性检出率 (2 8.6 3% ,2 0 .96 % )均显著高于对照组 (7.2 1% ,6 .98% ,P <0 .0 5 )。支原体感染阳性组ASA阳性率明显高于支原体感染阴性组(P <0 .0 2 5 )。结论　女性不孕和男性不育均与支原体感染及免疫因素有关 ,并且ASA与支原体感染有关     

血清抗Hp-IgG检测及其临床意义

用 ELISA法测定了 1 77例幽门螺杆菌 (Helicobacter pylori,Hp)感染性胃十二指肠疾病和非 Hp感染性疾病患者血清抗 Hp- Ig G。结果 :敏感性和特异性分别为 91 .7%和 89.8% ,与快速尿素酶试验和组织学检查无显著性差异 (P >0 .0 5)。动态监测抗 Hp- Ig G阳性患者“三联治疗”后 3、6和 1 0个月 ,发现 Hp治疗成功率分别为 9.92 %、68.70 %和 92 .36%。提示血清 Hp- Ig G检测敏感性高 ,特异性强 ,简便易行 ,可作为消化不良患者内镜检查前筛选及抗 Hp疗效观察指标。     

宫颈粘液碱性磷酸酶活性与排卵时间的关系

对１７例月经周期正常的不孕妇女宫颈粘液碱性磷酸酶（ＡＫＰ）进行了动态观察，并与其它监测排卵指标基础体温（ＢＢＴ）和宫颈粘液评分（ＣＭＳ）进行了比较，结果表明：宫颈粘液ＡＫＰ活性在排卵周期中具有规律性变化，卵泡期酶活性较高，围排卵期明显下降，排卵日降至最低值，排卵后迅速上升。围排卵期酶活性明显低于卵泡期和黄体期（Ｐ＜０．０００１）；８８％的周期ＡＫＰ低谷日出现在排卵前。结果提示：宫颈粘液ＡＫＰ测定可作为预告排卵的指标，同时也可为自然避孕法提供避孕期。     

不明原因不孕妇女月经周期中血清微量元素的研究

对19例不明原因不孕和14例已育健康妇女共33个月经周期中血清锌、铜、铁、锰、镍含量进行分析。结果表明：对照组排卵日血清锌、铜明显低于印泡中期和黄体中期，印泡中期铁、镍含量最高，在周期中呈递减趋势（P均＜0．05）；与对照组比较，不孕组除印泡中期镍减低外，各期血清钢及黄体中期锌、镍、铁均显著增高（P＜0．001，P＜0．05，P＜0．01），而各期血清锌／铜、铁／铜比率明显降低（P＜0．05）。研究提示：正常妇女月经周期中微量元素水平具有规律的周期变化，且相互存在恒定的比值，微量元素的代谢紊乱可能是不明原因不孕的重要因素之一。     

不明原因不孕妇女月经周期中血清微量元素的研究

对19例不明原因不孕和14例已育健康妇女共33个月经周期中血清锌、铜、铁、锰、镍含量进行分析。结果表明：对照组排卵日血清锌、铜明显低于印泡中期和黄体中期，印泡中期铁、镍含量最高，在周期中呈递减趋势（P均＜0．05）；与对照组比较，不孕组除印泡中期镍减低外，各期血清钢及黄体中期锌、镍、铁均显著增高（P＜0．001，P＜0．05，P＜0．01），而各期血清锌／铜、铁／铜比率明显降低（P＜0．05）。研究提示：正常妇女月经周期中微量元素水平具有规律的周期变化，且相互存在恒定的比值，微量元素的代谢紊乱可能是不明原因不孕的重要因素之一。     

Graves病自身免疫单链抗体库的构建及抗甲状腺单抗的筛选

目的　Graves病属于甲状腺自身免疫性疾病 (AITD) ,其患者血中存在多种抗甲状腺自身抗体 ,其中包括TGAb、TPOAb以及TRAb。单链抗体 (ScFv)是以连接肽将重链可变区基因 (VH)和轻链可变区基因 (VL)连接起来形成的单链小分子抗体。为了获得人源性抗甲状腺抗体 ,分析其基因结构 ,进一步研究AITD的发病机理 ,我们构建了人源性噬菌体ScFv库。方法　采取Graves病人静脉血 ,用淋巴细胞分层液按常规分离单个核细胞。提取淋巴细胞总RNA逆转录合成cDNA。分别扩增出全套的免疫球蛋白VL 链和VH 链基因 ,利用重叠PCR方法 ,构建ScFv基因。重组到 p3SCMH嗜菌粒中 ,电穿孔转化XL1 Blue大肠杆菌。经适当培养后 ,加入约 10 12 空斑形成单位 (PFU)的辅助噬菌体VCSM13,构建噬菌体抗体库。测定库容 ,鉴定重组率。以固相化的抗原对噬菌体ScFv库进行了 4轮“吸附 洗脱 扩增”的筛选 ,富集特异性噬菌体抗体。用ELISA竞争抑制实验检测富集的噬菌体抗体。结果　以单链cDNA为模板 ,用PCR方法分别扩增VL 链和VH 链的DNA。PCR产物经 15g·L-1琼脂糖电泳检测 ,分别在 380bp和 4 2 0bp左右见到扩增带。将VL 和VH 进行重叠PCR制备ScFv ,琼脂糖电泳显示PCR产物在 80 0bp左右有扩增带。将ScFv基因纯化 ,用SacⅠ+SpeⅠ双酶消化后 ,重组到 p3     

迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因的构建、表达及鉴定

目的 构建、表达及鉴定迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因.方法 采用RT-PCR方法从分泌迟缓爱德华菌独特型单克隆抗体的杂交瘤细胞株(1E11)中克隆出V_H和V_L可变区基因, 再通过重叠延伸拼接PCR方法在V_H和V_L可变区基因之间引入连接肽(Gly_4ser)_3,体外构建单链抗体基因;将其克隆至表达载体pET-28a并在大肠杆菌中表达,表达产物纯化后,用SDS- PAGE、Western blot及ELASA进行鉴定.结果 迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因scFv在BL21(DE3)菌中获得表达,表达产物以不溶性包涵体形式存在,经过溶解包涵体、纯化和体外复性,获得了高纯度的单链抗体片段,重组蛋白的分子质量为27 ku.ELASA分析结果证实迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因scFv与原代抗体一样,具有较高的抗原亲和力.结论 成功构建了迟缓爱德华菌抗独特型单链抗体基因scFv,为进一步制备迟缓爱德华菌抗独特型抗体基因工程疫苗奠定基础.     

抗哇巴因鸡蛋黄抗体IgY的制备

目的制备出高特异性的抗哇巴因多克隆抗体,为进一步提高内源性哇巴因的检测的敏感性和特异性提供实验基础。方法采用不同剂量哇巴因-牛血清白蛋白耦联物(0.5 mg/kg;1.0 mg/kg)免疫母鸡,收集鸡蛋;采用聚乙二醇法分离、纯化鸡蛋黄中抗哇巴因抗体;用酶联免疫吸附法检测IgY(yolk immunoglobulin)的抗体效价。SDS-PAGE电泳分析IgY纯度。结果免疫后1周,鸡蛋黄中可检测出IgY;免疫后6周,鸡蛋黄中IgY的效价迅速升高,最高效价达到1∶10 240,持续至少4周。结果还显示,大剂量免疫母鸡获得高效价抗体持续时间较长。结论采用大剂量哇巴因-牛血清白蛋白耦联物免疫母鸡,可以获得较高效价的抗哇巴因IgY。该方法简单,高效价抗体持续时间长,是制备抗体较为有效的方法。     

964例不孕症子宫输卵管造影的临床X线分析

对９６４例不孕症患者用碘化油和泛影葡胺分别施行子宫输卵管造影的临床Ｘ线表现进行了分析。引起不孕症的原因为慢性输卵管炎、生殖器结核和子宫粘连。用油剂和水剂造影后２年内妊娠率分别是７５％和９０％。两种造影剂相比，显影的清晰度基本一样，但油剂易逆流入静脉血管内，有发生血管栓塞的危险。文章还讨论了血管逆流的原因和造影时应注意的事项。     

CYCLIC CHANGES OF LACTATE DEHYDROGENASE IN CERVICAL MUCUS

ＷａｎｇＨｏｎｇ（王红）；ＣａｏＺｈａｎＳｕｎ（曹缵孙）；ＷｅｎｇＱｉｌｉａｎｇ（翁其亮）；ＭａｏＷｅｎｊｕｎ（毛文军）；ＹａｎｇＪｉａｎｙｅ（杨建业）ＣＹＣＬＩＣＣＨＡＮＧＥＳＯＦＬＡＣＴＡＴＥＤＥＨＹＤＲＯＧＥＮＡＳＥＩＮＣＥＲＶＩＣＡＬＭＵＣＵ...     

直视下颈椎间盘切吸术的临床应用及其对颈椎稳定性的影响

采用经前路主要病变节段椎间盘切除植骨十次要阶段椎间盘切吸术；或在单开门椎管扩大成形术的同时，加作后路椎间盘切吸术，共治疗颈椎病４６例。其中脊髓型４４例，神经根型２例，优良率８４．７８％。并对椎间盘切吸术后颈椎生物力学稳定性进行了测试，证明该术式不影响颈椎稳定性。从而为颈椎病的手术治疗开辟了一条新的途径。     

用HPV L_1区共有引物及PCR技术检查人尖锐湿疣和子宫颈癌中的HPV

根据HPV6、11、16、18、31、33型L1ORF高度保守区的基因序列设计合成了一对HPVL1区共有引物。该引物除与上述六型有很高的同源性外还可覆盖其它已知的20多型与女性肛生殖区感染有关的HPV。用该引物及PCR技术对一组计144例活检标本进行检测，结果显示：病理确诊的尖锐湿疣、子宫颈癌及外阴癌组织、正常宫颈标本中HPVDNA序列检出率分别为100％（55／55）、70％（28／40）和13．3％（2／15）。另外，34例临床诊断而未被病理证实的尖锐湿疣HPV－DNA亦呈阳性，说明在对这类病变进行病理诊断时有必要进行病原学检测。     

THE DETECTION OF P53 GENE IN HUMAN CERVICAL CARCINOMA WITH AND WITHOUT HUMAN PAPILLOMAVIRUS INFECTION

ＴＨＥＤＥＴＥＣＴＩＯＮＯＦＰ５３ＧＥＮＥＩＮＨＵＭＡＮＣＥＲＶＩＣＡＬＣＡＲＣＩＮＯＭＡＷＩＴＨＡＮＤＷＩＴＨＯＵＴＨＵＭＡＮＰＡＰＩＬＬＯＭＡＶＩＲＵＳＩＮＦＥＣＴＩＯＮＳｕｎＹｉ（孙毅）；ＳｉＬｕｓｈｅｎｇ（司履生）ＳｕｎＹｉ；ＳｉＬｕｓｈｅｎ...     

THE DETECTION OF HPV16E6，E7 GENES IN TISSUES AND THEIR ANTIBODIES IN THE SERA OF PATIENTS WITH CERVICAL CARCINOMA

ＴＨＥＤＥＴＥＣＴＩＯＮＯＦＨＰＶ１６Ｅ６，Ｅ７ＧＥＮＥＳＩＮＴＩＳＳＵＥＳ　ＡＮＤＴＨＥＩＲ　ＡＮＴＩＢＯＤＩＥＳＩＮＴＨＥＳＥＲＡＯＦＰＡＴＩＥＮＴＳＷＩＴＨ　ＣＥＲＶＩＣＡＬＣＡＲＣＩＮＯＭＡＬｉｕＴｉａｎｊｕ；ＬｉｕＨｕａ；，ＳｕｎＹｉ；，Ｓ...