血清钙、镁的原子吸收测定(附西安地区201例建康成人的血清钙、镁值)

<正> 钙、镁在人体细胞外液的含量仅次于钠、钾、属常量元素而占第三、四位。钙主要参于骨骼和牙齿的构成,维持骨骼正常功能,参于骨骼的修复,降低毛细血管的通透性和神经肌肉兴奋性,并参于肌肉的收缩以及血液凝固的过程等。镁离子是某些酶的激动剂如:焦磷酸酶、碱性磷酸酶、三磷酸腺苷酶和和一些肽酶等。因此,镁在糖、蛋白质代谢具有重要的作用。有一种缺镁性搐搦症,其特征是血清镁减低(为0.3～1.5mEg/L)而血钙正常。所以     

大鼠海马血管代谢的组织化学研究

本文用组织化学方法,选择能反映血管壁糖代谢3个途径及平滑肌能量利用的5个关键酶,在同一显微镜下对正常SD系不同月龄组大鼠海马血管的酶代谢进行了半定量研究。结果为乳酸脱氢酶活性随着大鼠月龄及血管口径的增加而增强,琥珀酸脱氢酶及细胞色素氧化酶示轻度反应,葡萄糖—6—磷酸脱氢酶呈轻度至中度活性,钙激活三磷酸腺苷酶在动脉及微动脉示极强阳性,静脉示强阳性,毛细血管呈中度至强阳性。讨论了海马血管壁代谢酶的变化与海马血管病的关系。     

113例正常人血清胰岛素放射免疫测定法的结果观察

<正> 胰岛素是胰岛B细胞分泌的多肽类激素,分子量为6000,它是一种广泛影响机体代谢活力很强的激素。它的生物化学效应目前了解的比较深入的是对糖及脂肪代谢的影响,并能直接或间接的影响蛋白质的代谢。它的重要功能是促进合成代谢——氨基酸合成蛋白质,单核苷酸合成核酸,单糖合成多糖,脂肪酸合成脂肪,从而促进能量贮备以及影响细胞功能调解等。所以胰岛素的测定已引起内分泌和其它学科在临床诊断,治疗和科研上的重视。     

PtenL/LMEFs与Pten△/△MEFs细胞系的差异表达蛋白质组分析

目的研究PtenL/LMEFs与Pten△/△MEFs细胞的蛋白表达差异。方法运用双向电泳技术比较PtenL/LMEFs与Pten△/△MEFs细胞的蛋白表达差异,6个差异蛋白进行胶内酶切后运用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)进行质谱分析,肽质量指纹图谱检索数据库后5个蛋白得到鉴定。结果同对照PTEN野生型细胞PtenL/LMEFs相比,磷酸甘油酸变位酶1(phosphoglycerate mutase 1,PGAM1)和肽脯氨酰顺反异构酶C(pepti-dyl-prolyl cis-trans isomerase C,cyclophilin C)在Pten△/△MEFs细胞中表达上调而Transgelin 2蛋白在Pten△/△MEFs细胞中表达下调。经鉴定已知蛋白点B和F都是过氧化物氧化还原酶6(Peroxiredoxin-6),蛋白点B在Pten△/△MEFs细胞中表达而在Pten△/△MEFs细胞中检测不到,蛋白点B和F的分子质量相似而等电点不同,可能是由于翻译后修饰。结论同对照PTEN野生型细胞PtenL/LMEFs相比,PTEN缺失的Pten△/△MEFs细胞有明显的差异性蛋白表达谱。PTEN的缺失引起细胞内多种蛋白表达改变,这些表达改变的蛋白可能与PTEN缺失后细胞癌变相关。     

人颗粒酶B融合蛋白基因的诱导表达导致HeLa细胞凋亡

目的　观察诱导表达的颗粒酶B融合蛋白对HeLa细胞形态和生长的作用。方法　用重组PCR法将活性型颗粒酶B基因序列的 5’端连接绿脓杆菌外毒素 (PE)的部分转位肽编码序列。所获融合蛋白基因克隆入pIND诱导表达载体后 ,与辅助质粒pVgRXR共转染HeLa细胞 ,经G4 18和zeocin筛选建系。间接免疫荧光检测蜕皮激素诱导后目的蛋白的表达 ,并通过电镜、TUNEL染色、细胞计数等方法观察细胞的形态和生长速度的变化。结果　建立了可诱导表达人颗粒酶B融合蛋白基因的HeLa细胞系。蜕皮激素诱导后检测到目的蛋白的表达 ,同时观察到细胞出现多核巨细胞的异常形态 ,细胞生长受到抑制。电镜和TUNEL分析表明 ,颗粒酶B融合蛋白基因的诱导表达使部分细胞呈现凋亡的典型特征。结论　颗粒酶B融合蛋白基因的诱导表达导致HeLa细胞凋亡     

黄芪多糖对巨噬细胞脂质代谢的影响及机制

目的分析黄芪多糖对巨噬细胞脂质代谢的影响及其机制。方法用不同浓度黄芪多糖处理巨噬细胞,氧化修饰型低密度脂蛋白(ox-LDL)孵育24 h;将ATP结合盒转运子A1(ABCA1)siRNA转染巨噬细胞,qRT-PCR和Western blot检测ABCA1 mRNA和蛋白的表达;油红O分析泡沫细胞水平;高效液相色谱检测脂质堆积;[~3H]标记检测胆固醇流出。结果与对照组相比,黄芪多糖剂量依赖性抑制ox-LDL诱导的巨噬泡沫细胞的形成,同时胆固醇酯(CE)/总胆固醇(TC)比值明显下降,细胞内胆固醇的流出增加(P<0.05)。此外,研究结果显示,黄芪多糖使ABCA1蛋白表达增高(P<0.05),而抑制其表达后,黄芪多糖抑制的脂质堆积水平出现明显增加,同时伴随有胆固醇流出减少(P<0.05)。结论黄芪多糖可能通过调节ABCA1介导的胆固醇逆转运而影响巨噬细胞脂质代谢进程,提示其在易损斑块诱发的心脑血管疾病治疗中具有潜在应用价值。     

蓝藻对苦草生理指标的影响

为了探讨湖泊富营养化过程中沉水植物产生的生理反应,选择苦草为研究对象,通过室内模拟试验,研究了不同浓度蓝藻(在0,122,166μg/L和222μg/L)对其叶片和根部造成的生理影响。结果表明:苦草叶片可溶性蛋白含量随着蓝藻浓度升高而减少,同样苦草根部的根系过氧化氢酶(CAT),超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)比活性受到不同程度的抑制。苦草叶片中的SOD比活性在第20 d显著高于10 d,而POD,CAT酶的比活性随着蓝藻浓度增加而增加,以适应氧化胁迫。丙二醛(MDA)在水中叶绿素a浓度为222μg/L时显著增加,苦草在蓝藻叶绿素a浓度122μg/L时,苦草通过调节其抗氧化防御系统去除过量活性氧,以适应蓝藻浓度引起的氧化胁迫。这为控制太湖中的蓝藻浓度和恢复苦草的生物种群提供了科学的理论依据。     

NLCM纯化的不同分化程度贲门腺癌细胞差异蛋白质组学研究

目的联合导向激光捕获显微切割技术(NLCM)及蛋白质组学技术比较分析高分化贲门腺癌细胞和低分化贲门腺癌细胞的蛋白质表达图谱差异,寻找与贲门腺癌恶性程度和预后有关的分子标志物。方法应用导向激光捕获显微切割技术分别获取高分化和低分化贲门腺癌细胞,提取蛋白质,应用双向凝胶电泳(2-DE)技术分离蛋白质,选定差异点,胶内酶解后,用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术(MALDI-TOF MS)鉴定差异蛋白质,并用免疫组化方法验证差异蛋白的表达。结果 1NLCM分别分离纯化了高分化和低分化贲门腺癌细胞;2建立了高分化和低分化贲门腺癌细胞的蛋白质表达图谱,两组分别检测到(846±52)个和(923±84)个蛋白质点,两组的匹配率为85.4%;3对高分化和低分化的贲门腺癌蛋白质表达谱进行比较分析,鉴定出10种差异蛋白,其中6个蛋白质在低分化贲门腺癌细胞中表达上调,4个蛋白质在低分化贲门腺癌细胞中表达下调;4差异蛋白质涉及细胞间信号转导、细胞代谢、凋亡及迁移等;5进一步通过免疫组化方法验证了差异蛋白HSP27的表达与蛋白质组学研究结果一致。结论高分化和低分化贲门腺癌间存在蛋白质表达的差异,这些差异表达的蛋白质可能与贲门腺癌的恶性程度和预后有关。     

白藜芦醇通过调节Hippo信号通路抑制胰腺星状细胞活化

目的探讨白藜芦醇对胰腺星状细胞活化的影响及Hippo信号通路的作用。方法组织块胰酶消化法提取原代胰腺星状细胞,给予白藜芦醇干预胰腺星状细胞,Western blot、免疫荧光染色检测胰腺星状细胞活化的指标,Transwell侵袭实验及Western blot检测间接共培养条件下胰腺癌细胞Panc-1侵袭能力及EMT指标E-cadherin,Vimentin的变化。结果白藜芦醇能够抑制胰腺星状细胞的活化,抑制α-SMA及YAP、CTGF及CYR61的表达;白藜芦醇干预后的胰腺星状细胞上清与胰腺癌细胞共培养后,Panc-1细胞侵袭能力降低(P<0.05),E-cadherin表达升高,Vimentin表达降低(P<0.05)。结论白藜芦醇能够抑制胰腺星状细胞活化,并降低共培养条件下胰腺癌细胞Panc-1的侵袭能力和EMT转化。     

氧化苦参碱对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的抑制作用

目的观察氧化苦参碱对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移的作用及其相关分子机制。方法 MTT法检测氧化苦参碱的抗增殖活性;Transwell小室法检测氧化苦参碱对HeLa细胞增殖的影响;Real-time PCR法检测氧化苦参碱对宫颈癌HeLa细胞侵袭转移能力的影响;Western blot法检测氧化苦参碱对MMP-2、MMP-9、AKT及p-AKT表达水平的影响。结果氧化苦参碱能够有效抑制HeLa细胞的增殖,与对照组(0mg/mL)相比,氧化苦参碱高于0.8mg/mL时出现明显差异。低于细胞毒性浓度(0.8mg/mL)的氧化苦参碱能够明显抑制HeLa细胞的侵袭能力,随着氧化苦参碱浓度的升高穿过基质胶到达小室底端的细胞数目明显减少,0.1、0.2和0.4mg/mL组分别为对照组的(77.07±20.43)%、(53.95±18.17)%、(20.35±11.20)%;0.1、0.2、0.4mg/mL组MMP-2的RNA水平分别为对照组的(82.76±8.71)%、(39.51±12.79)%、(21.53±5.38)%,0.4mg/mL组MMP-2的蛋白水平为对照组的(64.69±16.52)%;0.4mg/mL组AKT的磷酸化水平为对照组的(41.27±7.13)%。结论氧化苦参碱能够明显抑制宫颈癌HeLa细胞的侵袭转移,这种作用可能是通过调节AKT信号通路的活性进而调节MMP-2的表达来实现的。本研究为氧化苦参碱的抗肿瘤机制增添了新的内容。     

中强白噪声对豚鼠内耳的损害——动物试验研究之一

<正> 噪声是国际重大公害,到处存在,多方危害于人,唯听觉器官首当其冲,常酿成耳聋。噪声耳聋的根本问题在预防,防护之本在降低其强度;欲达到此目的需耗费巨额资金,至今世界各国均难完全办到,故不得不辅以个人防护;个人防护办法不少,可惜迄今尚乏真正方便,舒适而有效者,究其原因,实与其发病机制,及病理改变尚未被彻底探明有关。为此我们设计了一组试验拟观察在中强噪声间断作用下豚鼠内耳感觉装置的损害规律,现将其部分结果总结报告如下。     

肝动脉缺血对供肝细胞的损伤机理及防护措施:Ⅲ.线粒体功能损伤的酶学变化

通过建立16例“简易犬自体肝原位移植模型”，用酶组化光镜观察及分离肝细胞酶活性定量测定技术，检测了肝组织细胞在肝动脉系统缺血（HAI）1h及3h的情况下其SDH（琥珀酸脱氢酶）和LDH（乳酶脱氢酶）的活性，并与正常肝细胞及冷缺血15min的肝细胞作了比较。结果显示：当HAI达1h，肝细胞线粒体SDH活性已明显减低，而LDH活性显著增高，与冷缺血15min组对照有显著性差异（P＜0．001）；当HAI达3h时SDH活性极度减低，而LDH活性极度亢进。提示：HAI可能是移植术后供肝病变致某些早期并发症和胆道并发症的重要因素之一，应尽量限制在1h以内。     

克山病病区低硒儿童血小板GSH_(px)和SOD活性以及cAMP含量

本文对比测定了克山病病区与非病区儿童血小板GSH_(px)、SOD活性和cAMP水平,以及全血、红细胞、血浆和头发硒含量。结果表明,病区儿童血和发硒均明显低于非病区;血小板GSH_(px)活性比非病区儿童显著低下,但血小板SOD活性和cAMP水平无显著差异。提示病区低硒儿童血小板GSH_(px)活性的降低可能导致血小板功能和代谢的改变。     

庆大霉素中毒豚鼠蜗核SP免疫反应阳性神经元的变化

用免疫组化方法探讨庆大霉素耳中毒时蜗核ＳＰ免疫反应神经元的胞体截面积及细胞数的变化。结果发现庆大霉素１００ｍ ｇ·ｋｇ－ １·ｄ－ １腹腔注射后１ｄ,豚鼠蜗核ＳＰ样神经元胞体截面积立即发生了变化,并持续到连续注药第２１ 天;ＳＰ样神经元细胞数量的相对变化发生在注药３ｄ 以后。结果提示：①庆大霉素中毒豚鼠蜗核神经元的变化和耳蜗的病变可能同时发生或蜗核早于耳蜗病变。②临床上治疗氨基甙类抗生素所致耳聋应兼治中枢病变并尽早实施     

陕西省长寿区老人头发中微量元素及钙和镁的分析

本文对陕西省长寿区老人发中微量元素(锌、锰、铜、铁、镉、铅)及钙、镁进行分析。发现陕西省长寿区老人发中利于键康长寿的锰的含量极显著地高于对照区;人体必需的锌的含量显著地高于对照区:有害于人体的镉的含量极显著地低于对照区;钙的含量也极显著地低于对照区。男性老人发中锌含量极显著地高于女性老人;镉、钙含量显著地低于女性老人。从61岁至90岁的老人发中锰、铜、钙的含量随年龄的增长未见降低;镉、铅的含量随年龄的增长未见明量升高。结果表明陕西省长寿区老人发中有较优越的微量元素谱。本文对实验结果中与抗衰老有关问题进行了讨论.     

增龄相关听力丧失小鼠耳蜗毛细胞表型与基因突变的关系

目的　观察增龄相关听力丧失 (AHL)小鼠耳蜗毛细胞病理改变的超微结构 ,为老年性聋病理生理及临床表现+基因表型提供形态学改变依据。方法　应用扫描电镜 (SEM)观察BALB/c小鼠耳蜗Corti器毛细胞的超微结构改变 ,测定动物ABR反应阈值。DNA提取PCR扩增分析基因型。结果　 6月龄BALB/c小鼠耳蜗底回内外毛细胞有连续的缺失 ,静纤毛束有融合、散乱、变短和失去劲度。ABR阈值呈中到重度听力损失。证明种系特异的Ahl基因位点和基因功能。结论　耳蜗毛细胞静纤毛束融合、散乱、变短是老年性聋早期的主要病理改变 ,mdfw与Ah1的表现形式是同一基因位点 ,可能与myosin基因突变有关。     

EXPERIMENTAL STUDY OF COCHLEAR HAIR CELL LOSS IN THE GUINEA PIG

ＺｈｕＨｏｎｇｌｉａｎｇ（朱宏亮）ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＳＴＵＤＹＯＦＣＯＣＨＬＥＡＲＨＡＩＲＣＥＬＬＬＯＳＳＩＮＴＨＥＧＵＩＮＥＡＰＩＧＺｈｕＨｏｎｇｌｉａｎｇ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｔｏｌａｒｙｎｇｏｌｏｇｙ．ＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄ...     

克山病病区和低硒非病区居民发铜、锌、锰、铁含量的对比研究

用原子吸收光谱法对比测定了克山病病区（陕西彬县和云南牟定）、非病区（陕西礼泉）和低硒非病区（四川南部）健康人发铜、锌、锰、铁含量。发现：①与非病区相比，两病区儿童和成人发铜，两病区儿童和彬县成人发锰和发锌无差异；但牟定成人发锌低，而发锰高；②与低硒非病区相比，彬县成人发铜低，儿童发锌高；牟定儿童发铜高，成人发锌低；两病区成人发锰高；③病区儿童和成人发铁不仅高于礼泉，也高于南部，提示病区低硒人体铁水平与克山病发病的关系值得进一步探讨。     

耳蜗外毛细胞静纤毛束变异的判定标准研究

目的建立耳蜗外毛细胞(OHCs)静纤毛束变异的形态学统一判定标准。方法光镜和扫描电镜观察豚鼠耳蜗OHCs静纤毛束变异形态学特征及听觉诱发电位(ABR)、听神经动作电位(CAPs)和耳声发射畸变产物(DPOAE)参数改变。结果在100只实验豚鼠中,有28%的动物OHCs静纤毛束变异;OHC1变异最多见转位90°,常可见连续数个毛细胞90°转向蜗底,部分毛细胞静纤毛束“W”型转位达180°。结论我们拟定耳蜗外毛细胞静纤毛束变异的标准为:①超过10%的耳蜗第一排外毛细胞静纤毛束的“W”型变形及转向,毛细胞由45°转位至90°改变,多向基底方向,且呈双侧性。②毛细胞静纤毛束变异程度分为Ⅰ型:50%的OHC变异为重度变异;Ⅱ型:30%的OHCs变异为中度变异;Ⅲ型:10%以上的OHCs变异为轻度变异;③耳蜗毛细胞静纤毛束变异动物的双侧耳听功能(ABR、CAP、DPOAE)改变。     

地方性克汀病区不明原因智能低下儿童头发中五种微量元素含量分析

(本文应用原子吸收分光光度计法)测定了克汀病区不明原因智能低下儿童和正常儿童头发中五种微量元素(Cu、Zn、Fe、Mn、Pb)的含量。(发现智低组儿童头发中Cu、Zn含量明显低于正常儿童);Cu/Zn比值和Mn,Pb含量明显高于正常儿童。对实验结果中有关问题进行了一些探讨,为寻找致病因子提供了线索和资料。