缺氧对膀胱平滑肌细胞缝隙连接蛋白表达的影响

目的 通过研究膀胱出口部分梗阻及缺氧环境下膀胱平滑肌细胞中缝隙连接蛋白表达的变化,探讨不稳定膀胱的发生规律.方法 建立不稳定膀胱大鼠模型、体外正常大鼠膀胱平滑肌细胞并造成其细胞缺氧状态;采用RT-PCR和Western blot分析膀胱平滑肌细胞的缝隙连接蛋白的表达.结果 不稳定膀胱组及缺氧组(15min、30min、1h)膀胱平滑肌细胞中Cx40、Cx43在mRNA及蛋白水平上均高于模型对照组及缺氧对照组(P＜0.01),其中缺氧15min组Cx43的mRNA及蛋白表达量均较缺氧30min组、缺氧1h组高(P＜0.01).结论 膀胱出口部分梗阻能引起平滑肌细胞缺氧与缝隙连接蛋白表达增多,平滑肌细胞缺氧也能引起缝隙连接蛋白表达增加.膀胱出口部分梗阻后导致的不稳定膀胱的发生可能与膀胱平滑肌细胞缺氧有着密切关系.     

血红素加氧酶-1基因修饰的骨髓间质干细胞抑制肺动脉平滑肌细胞增殖的实验研究

目的 探讨骨髓间质干细胞携带的血红素加氧酶-1(HO-1)基因于体外共培养体系中抑制肺动脉平滑肌细胞增殖的效果及机制.方法 采用核转染技术将HO-1质粒转染至骨髓间质干细胞,共培养肺动脉平滑肌细胞和骨髓间质干细胞,评估5-羟色胺刺激后的平滑肌细胞增殖情况,检测5-羟色胺刺激后平滑肌细胞中RhoA的活性.结果 5-羟色胺可刺激肺动脉平滑肌细胞增殖,使单纯培养的平滑肌细胞总数较对照组增加2.40倍(P<0.01).野生型骨髓间质干细胞与肺动脉平滑肌细胞共培养并不能抑制平滑肌细胞的增殖,而携带HO-1基因的干细胞则可明显抑制5-羟色胺刺激的平滑肌细胞增殖,使平滑肌细胞总数降至对照组的1.56倍(P<0.05);5-羟色胺可引起肺动脉平滑肌细胞中RhoA活性增加2.90倍,野生型干细胞与肺动脉平滑肌细胞共培养并未能改变5-羟色胺刺激的RhoA激活,但在携带HO-1基因的干细胞共培养体系中5-羟色胺诱发的RhoA活性明显降低.结论 骨髓间质干细胞携带的HO-1基因可以旁分泌的形式抑制平滑肌细胞的增殖,其作用的机制可能与其产生的CO通过激活cGMP信号通路进而抑制RhoA的激活有关.HO-1可作为外源基因导入体内治疗肺动脉高压.     

不同冷冻方法对兔颈总动脉形态结构及活性的影响

目的玻璃化法和慢速冷冻法深低温保存兔颈总动脉,比较两种保存方法对血管活性及形态结构的影响。方法无菌条件下切取兔颈总动脉,采用玻璃化法和慢速冷冻法在-196℃液氮中深低温保存2周,37℃水浴复温。新鲜血管作为对照,分别观察血管的大体、组织学、超微结构;同时对冷冻复温的血管采用组织块法培养并鉴定细胞,通过细胞计数描述细胞生长曲线,观察培养后血管的活性、细胞的再生及增殖能力。结果玻璃化组和慢速冷冻组动脉出现部分内皮细胞脱落,平滑肌细胞和成纤维细胞轻度肿胀、变性,前者损伤程度轻于后者。体外培养两组动脉的细胞分别于第6、7天自组织块内长出,细胞形态结构、生物学特性与新鲜组相似。生长曲线显示玻璃化组细胞的生长增殖状态优于慢速冷冻组,两组均差于新鲜动脉。将培养后的细胞分别进行免疫组织化学染色,经鉴定为平滑肌细胞。结论玻璃化法能较好地保持血管的形态结构和组织活性,保存效果优于慢速冷冻法。     

假型逆转录病毒载体高效介导兔平滑肌细胞基因转染

目的 构建假型逆转录病毒载体MuLV/VSV-G,并用于转染兔平滑肌细胞,为兔平滑肌细胞基因转染寻找一种高效的载体.方法 构建含有报道基因lacZ的假型逆转录病毒载体MuLV/VSV-G,测定滴度,并转染兔平滑肌细胞,观察其转导效率.并与MuLV的转导效率进行比较.结果 构建的MuLV/VSV-G载体,病毒滴度为6～7.8×10~6CFU,转染兔平滑肌细胞的效率是(92±12)%.而MuLV的转导效率为(24±5)%.结论 成功构建了假型逆转录病毒载体MuLV/VSV-G载体,该载体作为一种高效的载体可用于兔平滑肌细胞基因转染.     

miRNA-21通过TPM1参与高糖诱导的人主动脉平滑肌细胞表型转化与增殖

目的探讨miRNA-21在高糖诱导的人主动脉平滑肌细胞表型转化与增殖中的作用,以及对靶基因原肌球蛋白1(tropomyosin 1,TPM1)表达的影响。方法体外培养人主动脉平滑肌原代细胞,利用脂质体转染miRNA-21mimic和inhibitor至细胞中,BrdU法检测高糖刺激miRNA-21过表达和缺失情况下人主动脉平滑肌细胞的增殖情况,荧光定量PCR检测转染前后高糖刺激时细胞miRNA-21和TPM1的表达情况,Western blot检测人主动脉平滑肌细胞中TPM1、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)、平滑肌蛋白22α(smooth muscle 22alpha,SM22α)的表达情况。结果 10、20、25mmol/L D-葡萄糖刺激时人主动脉平滑肌细胞较正常对照组(0.613±0.022)显著增殖(0.725±0.026、0.913±0.024、1.513±0.082),差异有统计学意义(P<0.01);10、20、25mmol/L D-葡萄糖刺激时miRNA-21表达较对照组升高1.1、2.0、3.1倍(P<0.01);正常组细胞转染miRNA-21mimic后细胞增殖能力增强1.6倍,转染miRNA-21inhibitor后高糖组细胞增殖能力减弱(P<0.01);转染miRNA-21mimic后TPM1表达减弱,SM22α表达下调,OPN表达增加(P<0.01),转染miRNA-21inhibitor后TPM1表达上调,SM22α表达上调,OPN表达减少(P<0.01)。结论 miRNA-21可下调细胞TPM1的表达,从而促进人主动脉平滑肌细胞表型转化与增殖。     

胆舒宁松弛胆囊平滑肌的实验研究

探讨“胆舒宁”作用于慢性胆囊炎的止痛机理。方法 用张力平衡记录仪检测“胆舒宁”松弛胆囊平滑肌的作用，用Ｆｕｒａ－２标记法检测细胞内钙离子浓度。结果“胆舒宁”具有明显松弛胆囊平滑肌的作用（Ｐ〈０．０５），进一步使其作用胆囊平滑肌细胞，可明显降低细胞内钙离子浓度，且与剂量呈相关，结论“胆舒宁”止痛机理可能与其影响Ｃａ＾２＋内流，松弛胆囊平滑肌有关。     

乙状窦形态学研究

目的 探讨硬脑膜静脉窦的组织结构。方法 运用组织化学、ＡＢＣ免疫组织化学和电技术对家兔各部的静脉窦加以研究。结果 硬脑膜静脉平滑肌存在，其存在部位分布在乙状窦，其它部位未有发现，并且证实了所的这些平滑肌接受胆碱能神经纤维的支配。结论 有平滑肌的硬脑膜静脉窦可参与对颅内容量的调节。     

肺动脉平滑肌细胞增殖的分子机制及干预的研究进展

肺动脉高压是一种常见的临床综合征。肺动脉平滑肌细胞的过度增殖是构成肺血管重塑的主要病理基础,而肺血管重塑是导致肺动脉高压发生的关键病理变化。本文总结了促进肺动脉平滑肌细胞增殖的分子信号通路的研究进展,并介绍了目前抑制肺动脉平滑肌细胞增殖靶向治疗的现状及研究进展。     

药物在大鼠主动脉组织及其培养细胞的细胞膜色谱研究

目的比较细胞膜色谱法中细胞膜固定相的特异性。方法分别构建大鼠主动脉组织匀浆细胞膜固定相和培养大鼠主动脉平滑肌细胞膜固定相。用细胞膜色谱法研究10种-αAR激动剂和拮抗剂的生物亲和作用,测定其容量因子并进行相关性分析。结果10种药物在大鼠主动脉组织和培养大鼠主动脉平滑肌细胞膜固定相上容量因子之间存在正相关关系,相关系数r=0.923,有极显著性意义(P<0.01)。结论用培养的细胞制备细胞膜固定相具有更高的特异性,可提高药物的保留时间,也可用于药物的高效初筛。     

青藤碱对家兔血管平滑肌细胞增殖的影响

目的　研究青藤碱对血管平滑肌细胞增殖作用及 DNA合成的影响。方法　采用内皮素刺激的离体家兔血管平滑肌细胞增殖模型 ,细胞计数 ,氚 -胸腺嘧啶核苷掺入方法。结果　青藤碱明显抑制血管平滑肌细胞增殖反应及 DNA合成 ,呈剂量依赖关系。结论　表明青藤碱具有抗血管平滑肌细胞增殖作用     

硒对大鼠骨骼肌线粒体单胺氧化酶活性的影响

本文动态观察了克山病病区低硒粮喂养大鼠骨骼肌线粒体单胺氧化酶(MAO)活性的变化。于饲养后第30d、第60d及第90d分批处死大鼠,取肌肉分离线粒体,用荧光法测定MAO活性。其结果在实验的初期和中期(第30d和第60d)低硒组大鼠与补硒组或常备饲料组之间MAO活性均无显著差异,到第90d才出现显著差异。可能骨骼肌线粒体对低硒的损害敏感性低,耐受力强。     

贲门区癌可手术切除的相关X线征象

为探讨贲门癌的 X线征象在病变范围的确定及评估手术可能性中的价值 ,收集 10 6例采用双对比检查并经手术及病理证实的贲门癌 ,对其 X线表现与手术、病理所见进行对照分析。结果 :10 6例中 ,90例行开腹探查术 (其中病变切除 70例 ,未能手术切除 2 0例 ) ,16例因失去探查机会而采用非手术疗法。提示 :贲门癌的有些 X线征象在决定能否手术切除具有重要的意义。     

EFFECT OF STENT ABSORBED c-myc ANTISENSE OLIGODEOXYNUCLEOTIDE ON SMOOTH MUSCLE CELLS APOPTOSIS IN RABBIT CAROTID ARTERY

Ｉｎｔｈｅｐａｓｔｆｅｗ ｙｅａｒｓ ,ｗｅｈａｖｅｗｉｔｎｅｓｓｅｄａｄｒａ ｍａｔｉｃ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎｉｎｔｈｅｕｓｅｏｆｉｎｔｒａｃｏｒｏｎａｒｙｓｔｅｎｔｓ.Ｓｔｅｎｔｓｎｏｗａｃｃｏｕｎｔｆｏｒｏｖｅｒ 70 %ｏｆｐｅｒｃｕｔａ ｎｅｏｕｓｔｒａｎｓｌｕｍｉｎａｌｃｏｒｏｎａｒｙａｎｇｉｏｐｌａｓｔｙ (ＰＴＣＡ ) .Ｈｏｗｅｖｅｒ,ｉｎ ｓｔｅｎｔｒｅｓｔｅｎｏｓｉｓｒｅｍａｉｎｓａｍａｊｏｒｐｒｏｂ ｌｅｍ ,ｏｃｃｕｒｉｎｇｉｎ 2 0 %～ 30 %ｏｆｔｈｅｓｅ ｐｒｏｃ ｅｄｕｒｅｓ[1-3] .Ｉ…     

EFFECTS OF PASSIVE STRETCH ON SOLEUS MUSCLE ATROPHY IN IMMOBILIZED RATS

Ｐｒｅｖｉｏｕｓｓｔｕｄｉｅｓｒｅｐｏｒｔｅｄｔｈａｔｓｋｅｌｅｔａｌｍｕｓｃｌｅｍｉｇｈｔｄｅｖｅｌｏｐｏｂｖｉｏｕｓａｔｒｏｐｈｙｗｈｅｎｓｈｏｒｔｅｎｅｄｉｍ ｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎｗａｓａｐｐｌｉｅｄ ,ｔｈｅｍａｉｎｍａｎｉｆｅｓｔａｔｉｏｎｓｗｅｒｅｔｈｅｒｅｄｕｃｔｉｏｎｉｎｍｕｓｃｌｅｗｅｉｇｈｔ,ｓｈｒｉｎｋｉｎｇｏｆｔｈｅｆｉｂｅｒＣＳＡａｎｄｔｈｅｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎｏｆｍｕｓｃｌｅｆｉ ｂｅｒｔｙｐｅｓ[1-3] ,ｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｗｈｉｃｈｉｓｓｔｉｌｌｕｎ …     

硒对克山病区粮饲养大鼠心肌细胞的影响——超微结构及膜通透性的改变

本实验用克山病区低硒粮饲养大鼠,造成动物低硒状态,同时增设补硒组和常备饲料组大鼠作为对照,饲养2个月后,应用示踪剂分别观察其心肌细胞超微结构及膜通透性。结果低硒组大鼠部分心肌细胞膜不完整,镧颗粒进入到细胞内。钌红使质膜染色呈中等电子密度的不均匀窄带,并经质膜破损处进入心肌细胞内。补硒组大鼠变化轻微。提示克山病区粮可引起大鼠早期心肌细胞超微结构及膜通透性的改变,补硒可使之缓解或改善。     

绝对不应期电刺激对兔心室肌收缩功能影响的钙反应性

目的　观察绝对不应期电刺激增强兔离体乳头肌收缩作用的钙反应性 ,探讨绝对不应期电刺激增强心肌收缩功能的可能机制。方法　分离兔右心室乳头肌、灌流并给予 1HZ 刺激使其等长收缩 ,于该基础刺激的绝对不应期给予双相方波电流刺激 (称之CCM)。依次灌流不同Ca2 + 浓度 (0 .5、1.5、2 .5、3.5、4 .5、5 .5、6 .5mmol·L- 1 )的K H液 ,观察乳头肌的最大张力 (PT)的变化。结果　①CCM刺激时PT比刺激前增加。②CCM对乳头肌张力的作用存在着Ca2 + 浓度量效反应 ,低Ca2 + 浓度下CCM增加PT的作用最明显 ,随着Ca2 + 浓度的增高而作用减弱。当Ca2 + 浓度进一步增高时 ,PT不再增加。结论　于绝对不应期电刺激能明显增强离体心肌的收缩功能 ,提示其可能机制为细胞外Ca2 + 内流增加 ,细胞 [Ca2 + ]i增高     

颞肌外感受性抑制试验对慢性头痛的鉴别价值

按Ｓｃｈｏｎｅｎ方法使用肌电图对５５例已排除神经系统器质性疾病的慢性头痛病人及１２例正常人进行３种不同频率的电刺激，观察颞肌最大收缩干扰相于电刺激的潜伏期后出现的两个静息期ＥＳ１和ＥＳ２，显示２Ｈｚ刺激条件下肌收缩性头痛组ＥＳ２明显短于对照组（Ｐ＜０．００１）和偏头痛组（Ｐ＜０．０１）。本文认为此试验对肌收缩性头痛和偏头痛的鉴别有一定价值。     

THE ROLE OF NUCLEUS RAPHE MAGNUS IN THE ANTINOCICEPTIVE EFFECT OF MUSCLE SPINDLE AFFERENTS IN THE RAT

Previous studies revealed that stretching thehindlimb muscles of rats of systemically adminis-trating succinylcholine(SCH) for activation of theafferents of muscle spindle receptors markedly de-pressed the responses of neurons in the spinal dor-sal horn to noxious stimulation[1,2 ] ,and thisantinociception was reduced significantly by tran-section of the spinal cord[2 ] ,suggesting that thesupraspinal structures might be involved in theantinociception elicited by activation of the musclespindl…     

颗粒细胞肌母细胞瘤的临床病理分析

6例颗粒细胞肌母细胞瘤的临束特点为小、无包膜、无痛性的包块,好发于舌,肿块直径大小为0.5～3cm,切除病检前难以诊断。作者报道的食管1例和肿块直径为5cm的1例均为少见病例。组织学特征为瘤细胞体大,胞浆丰富,含有均匀分布的嗜酸性颗粒,排列成巢或索状。本文从形态学上支持肿瘤的神经起源。     

琥珀胆碱引起肌梭传入放电增加的量效关系

以大鼠为对象，在胫神经上分离神经细束，记录腓肠肌内肌梭的传入放电活动，然后静脉注入不同剂量的ＳＣｈ，观察肌梭传入放电的变化。实验结果表明：一定剂量的ＳＣｈ可以引起肌梭传入放电增加，而且在一定的范围内肌梭传入放电增加的程度与ＳＣｈ的剂量呈正相关，并由此得出了二者之间的量效关系曲线。