内皮素—1对成纤维细胞内游离钙的影响

研究内皮素对成纤维细胞内钙离子浓度的影响及维拉帕米对ＥＴ促效应的阻断作用。方法，采用Ｆ ｕｒａ－２／ＡＭ钙荧光指示测定ＨＬＦ细胞内Ｃａ＾＋２浓度。结论ＥＴ对Ｖｅｒ的调控作用是通过转运而产生的。     

甘氨脱氧胆酸盐诱导人正常肝细胞HL-7702凋亡及其机制的研究

目的 观察甘氨脱氧胆酸盐(glycodeoxycholate, GCDC)对人正常肝细胞株HL-7702凋亡的影响,并探讨其凋亡机制.方法 终浓度分别为100、150、200、250μmol/L的GCDC处理HL-7702细胞24h,光学显微镜观察GCDC对HL-7702细胞形态的影响,AnnexinV-FITC/PI双染色法检测HL-7702细胞的凋亡率 ,用荧光指示剂Fluo-3/AM测定HL-7702细胞内钙离子浓度,RT-PCR测定Bcl-2、Bax基因mRNA表达水平.结果 终浓度为150μmol/L的GCDC处理HL-7702细胞24h后,细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变;100、150、200、250μmol/L的GCDC均可诱导HL-7702细胞凋亡,呈剂量依赖性,凋亡率分别为(13.16±2.9)% (t=6.41)、(20.3±3.0)% (t=10.22)、(25.02±2.1)% (t=18.11)、(45.02±3.5)% (t=28.89),较对照组(2.2±0.6)%显著升高(P＜0.05);GCDC能使HL-7702细胞内钙离子浓度增加,且具有浓度依赖性;GCDC使细胞内Bcl-2 mRNA的表达下降、Bax mRNA的表达增加.结论 GCDC可能是通过增加HL-7702细胞内钙离子浓度,并进一步下调Bcl-2、上调Bax表达水平,从而诱导细胞凋亡.     

蛇床子素对大鼠离体子宫平滑肌收缩性能的影响

蛇床子素和维拉帕米对缩宫素、ＫＣｌ、高Ｋ＋除极化后Ｃａ２＋诱导大鼠离休子宫平滑肌收缩均产生抑制作用，对ＣａＣｌ２累积量效曲线均呈非竞争性拮抗效应，ｐＤ＇２（拮抗多数）分别为３．９±０．１５和７．４５±０．１；１００μｍｏｌ／Ｌ蛇床子素和０．０８μｍｏｌ／Ｌ维拉帕米显著抑制缩宫素诱导依赖细胞内Ｃａ２＋收缩反应，对依赖细胞外Ｃａ２＋的收缩均无明显影响。提示蛇床子素对子宫平滑肌的抑制作用类似维拉帕米，与拮抗Ｃａ２＋有关，且主要通过抑制平滑肌细胞膜上电位依赖性Ｃａ２＋通道和影响胞内Ｃａ２＋释放所致。     

dl—四氢巴马汀在子宫平滑肌上的钙拮抗作用

dl-四氢巴马汀明显对抗催产素和KCl所引起的大鼠离体子宫的收缩反应,对高K~+去极化后Ca~(2+)所引起的子宫收缩有明显松弛作用。使CaCl_2量效曲线右移,并抑制最大效应。对催产素依赖细胞内Ca~(2+)和细胞外Ca~(2+)的两部分收缩均有明显抑制,但对依赖细胞内Ca~(2+)的收缩抑制更强。结果表明dl-四氢巴马汀在子宫平滑肌上具有钙拮抗作用。     

静脉麻醉剂对中枢离子通道的影响

“全麻”是十分复杂的临床现象，近年来对全麻机理的研究取得了一定的进展。目前认为，全麻作用的产生是因中枢神经系统突触传递的抑制或中枢兴奋性降低所致，其分子机理可能与神经细胞膜上离子通道的活性变化有关［１，２］。随着神经生理学、药理学和麻醉学的迅猛发展，...     

硬膜外与硬膜外加全麻对老年人胆囊切除术中循环的 …

目的观察常规硬膜外阻滞与硬膜外加全麻插管在老年人胆一囊切除术中对循环功能的影响。方法６２例老年患者，ＡＳＡⅠ－Ⅲ级，随机 分２组。结论老年人行胆囊切除术采用硬膜外加全麻有利于循环功能稳定。     

硝苯地平对高血压病患者室性心律失常及血浆儿茶酚胺的影响

用动态心电图观察了高血压病左室肥厚（ＥＨ－ＬＶＨ）患者心律失常的发生情况及硝苯地平对血浆儿茶酚胺（ＣＡ）活性、红细胞内离子（Ｋ＋、Ｎａ＋、Ｃａ２＋、Ｍｇ２＋）含量、室性心律失常、左室重量及厚度的影响，结果表明，硝苯地平能显著减少ＥＨ－ＬＶＨ患者室性心律失常的发生，减低左室重量与厚度，纠正细胞内离子代谢失衡，但可使血浆ＣＡ活性升高，对其机理尚需进一步研究。     

钙离子载体A23187对转化生长因子β1刺激的肝星状细胞增殖、周期及凋亡蛋白caspase-3表达的影响

目的研究钙离子载体A23187对转化生长因子β_1(TGF-β_1)刺激的肝星状细胞增殖、周期及凋亡蛋白caspase-3表达的影响。方法将液氮保存下的肝星状细胞株,于37℃、50mL/L CO_2孵箱中进行复苏传代培养,同步化后将细胞分为5组:空白组、TGF-β_1(5ng/mL)组、TGF-β_1+低、中、高剂量钙离子载体A23187组,即5ng/mL TGF-β_1刺激24h,再分别加入1、2、4μmol/L不同剂量钙离子载体A23187作用24h后,用MTT比色法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞周期,蛋白免疫印记测定凋亡蛋白caspase-3表达。结果不同浓度钙离子载体A23187均能显著抑制细胞增殖(P<0.05),且随着剂量的增加,细胞的相对增殖率(RGR)降低,低、中、高剂量组分别为85.93%、61.71%、48.43%,组间两两比较差异均有统计学意义(P<0.05);不同处理组G1期细胞比例、S+G2期细胞比例差异均有统计学意义(P<0.05),钙离子载体A23187剂量越大,G1期细胞比例越高,S+G2期细胞比例越低(P<0.05)。随着钙离子A23187浓度的增加,细胞内caspase-3蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论钙离子载体A23187可能通过阻滞大鼠肝星状细胞由G1期进入S期和G2期,抑制细胞增殖,同时上调凋亡蛋白caspase-3的表达。     

盐酸哌唑嗪家兔点眼的降眼压作用

观察了不同浓度的α１受体阻断剂盐酸哌唑嗪（ＰＺ）家兔点眼的降眼压作用，通过ＰＺ与α１受体激动剂盐酸去氧肾上腺素（ＰＥ）点眼的相互影响，探讨了ＰＺ降眼压的受体作用机理。结果显示：ＰＺ点眼后２ｈ眼压下降最显著，０．０１％、０．１％和１．０％３种浓度分别使眼压下降了０．３７ｋＰａ、０．６５ｋＰａ和０．９１ｋＰａ。１．０％ＰＥ前处理明显减弱了０．１％ＰＺ的降眼压作用，而０．１％ＰＺ前处理只拮抗１．０％ＰＥ升高眼压的作用，说明对眼压瞳孔的作用分别通过α１受体的不同亚型，进而提出在家兔眼中存在α１受体的“眼压亚型”和“瞳孔亚型”，ＰＺ降眼压的受体作用在于只阻断了α１受体的“眼压亚型”。     

急性脊髓损伤中内皮素与钙离子变化的关系

目的　通过观察急性脊髓损伤 (Acutespinalinjury ,ASI)后脊髓组织的细胞内钙含量和血浆内皮素 (Endothelin ,ET)含量的变化 ,探讨ET与Ca2 +在ASI发病机制的关系。方法　选用Wistar雄性大鼠 2 8只 ,应用改良Allen s方法 ,制成脊髓损伤模型 ,造成T1 2 脊椎节段脊髓 5g×1 0cm中度损伤的ASI后 ,分别应用原子吸收光谱分析法和放射免疫法测定ASI后 1、4、8、2 4、72和 1 68h脊髓组织中钙离子含量和血浆中ET浓度。结果　损伤节段组织细胞内钙离子含量及血浆中ET浓度均随病程而改变 ,于 8～ 72h达高峰 ,与正常值有显著性差异。结论　ASI后脊髓组织中细胞内Ca2 +含量及血浆中ET浓度迅速升高 ,提示ET受体阻滞剂与钙离子拮抗剂联合使用为治疗ASI提供了新的途径。     

睾酮对心血管的作用及其机理

<正> 1978年,Krieg首次用放射性自显影法,发现大鼠心室肌有雄激素受体,并证实其活性形式为睾丸酮(Testosterone,T)。之后,McGill和Lin用生化分析法证实狒狒和恒河猴的心肌细胞浆、细胞核、冠状动脉细胞浆和细胞核、主动脉平滑肌细胞亦存在有丰富的雄激素受体。因而认为“心脏是性激素作用的靶器官”。心血管系统T受体的发现为研究T对心血管系统的作用及其机理奠定了基础。现就T     

不同粗糙度岩体节理面的应力松弛特性及机理

应力松弛是岩体节理面时效特性的重要组成部分，也是影响岩体工程长期稳定性的重要因素. 为研究不同粗糙度岩体节理面的应力松弛特性，并进一步探索节理面的应力松弛机理，选取Barton标准剖面为人工模拟节理面的表面形态，并用水泥砂浆浇筑成型；然后，对其进行了分级加载剪切应力松弛试验，研究了不同粗糙度节理面在不同初始应力水平下的应力松弛曲线及应力松弛速率曲线特征，给出了松弛应力与初始应力之间的关系，并结合试验现象分析了应力松弛的发生机理. 研究成果表明:随着初始松弛应力的升高，松弛应力先减小后增大，即岩体节理面应力松弛能力先减弱后增大，该现象与剪切过程中节理面的变形和裂隙发展有关，应力松弛是试验机为保持变形不变而不断调整，同时内部裂隙发育导致其内部抗力减小，进而引起应力下降的过程，并且粗糙度（JRC）越大，应力松弛能力越强.      

弥漫性轴索损伤后内质网钙释放对轴突内早期钙离子浓度的影响

目的研究弥漫性轴索损伤(diffuse axonal injury,DAI)后内质网(endoplasmic reticulum,ER)钙释放的变化,以及对轴突内早期钙离子浓度的影响,并探讨造成ER钙释放的可能分子机制。方法使用体外培养7¹2d的小鼠神经元行轴突牵拉损伤建立体外DAI模型,根据是否行牵拉损伤分为损伤组及对照组。使用ER Tracker Red标记ER,观察ER在轴突损伤前后的分布。通过Fluo-4AM钙探针及激光共聚焦钙成像技术测量单个轴突内钙离子浓度的变化,并使用20mmol/L咖啡因作用于细胞,使ER内钙离子快速排空,测量轴突部位咖啡因作用前后的钙离子浓度变化,从而间接观察ER内钙存量的变化。结果 ER Tracker Red荧光结果显示ER存在于神经元轴突部位中,损伤后的轴突肿胀部位存在ER聚集的现象。神经元牵拉损伤后,被牵拉的轴突钙离子浓度明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),受损的轴突表现出肿胀及"串珠样"变性等病理学改变。除损伤后2min外,使用无钙细胞外液虽然明显降低了牵拉损伤导致的轴突的钙离子浓度升高,但在212d的小鼠神经元行轴突牵拉损伤建立体外DAI模型,根据是否行牵拉损伤分为损伤组及对照组。使用ER Tracker Red标记ER,观察ER在轴突损伤前后的分布。通过Fluo-4AM钙探针及激光共聚焦钙成像技术测量单个轴突内钙离子浓度的变化,并使用20mmol/L咖啡因作用于细胞,使ER内钙离子快速排空,测量轴突部位咖啡因作用前后的钙离子浓度变化,从而间接观察ER内钙存量的变化。结果 ER Tracker Red荧光结果显示ER存在于神经元轴突部位中,损伤后的轴突肿胀部位存在ER聚集的现象。神经元牵拉损伤后,被牵拉的轴突钙离子浓度明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05),受损的轴突表现出肿胀及"串珠样"变性等病理学改变。除损伤后2min外,使用无钙细胞外液虽然明显降低了牵拉损伤导致的轴突的钙离子浓度升高,但在2³0min时间段中钙离子浓度升高依然存在,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。对照组中未经牵拉损伤的神经元轴突可被20mmol/L咖啡因激起一个明显的轴突钙离子浓度升高,而牵拉损伤后的轴突对咖啡因的这种钙升高反应程度明显下降,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 DAI后的轴突钙离子浓度升高不仅由细胞外钙内流引起,细胞内钙释放同样参与其中。ER是引起这种DAI后轴突内钙释放的细胞器来源。     

三氟拉嗪对阿霉素抗癌作用的影响

研究钙调蛋白拮抗剂三氟拉嗪对阿霉素抗癌作用的影响，探讨钙调蛋白活性与抗肿瘤药物细胞毒性之间的关系。方法用同位素掺入法研究三氟拉嗪及其配合阿霉素对癌细胞增殖的影响；结论三氟拉嗪通过增加细胞内阿霉素浓度而增强其细胞毒性，有可能作为抗肿瘤药物增效剂而用于肿瘤化疗。     

Aβ诱导PC-12细胞凋亡建立阿尔茨海默病细胞模型

目的　用β 淀粉样蛋白 (Aβ2 5- 35)诱导PC 1 2细胞凋亡以建立阿尔茨海默病细胞模型。方法　体外培养大鼠嗜铬细胞瘤PC 1 2细胞 ,以不同浓度Aβ2 5 - 35诱导并于不同时间收获细胞 ,应用MTT法观察细胞活力 ,Fura 2 /AM荧光分析法检测细胞内游离Ca2 +浓度 ,Hoechst332 5 8及碘化丙啶复染分析细胞凋亡。结果　Aβ2 5- 35作用于PC 1 2细胞后 ,细胞活力逐渐下降 ,并呈时间和剂量依赖性 ;同时细胞内Ca2 +浓度显著上升 ;不同浓度Aβ2 5 - 35作用后 ,PC 1 2细胞于不同时间出现凋亡的典型形态学特征 ,该时间比Ca2 +浓度上升约晚 6～ 1 2h。结论　Aβ2 5- 35诱导后PC 1 2细胞活力下降、细胞内Ca2 +浓度上升及细胞凋亡 ,可作为较理想的阿尔茨海默病细胞模型     

Gαq/11在哇巴因信号转导中的意义

目的观察不同浓度哇巴因对SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞Gαq/11表达的影响,并探讨其在哇巴因信号转导中的作用。方法采用贴块法原代培养SD大鼠胸主动脉平滑肌细胞,进行传代和纯化。分别给予生理浓度以及病理浓度的哇巴因干预48 h,免疫细胞化学染色观察平滑肌细胞Gαq/11蛋白的表达。结果生理浓度哇巴因干预后,平滑肌细胞有增殖现象;而病理浓度组细胞发生凋亡。生理浓度组Gαq/11表达(111.21±30.47)显著高于病理浓度组(68.70±6.21)以及对照组(58.81±4.51,P<0.01);病理浓度组和对照组相比无显著变化。结论①Gαq/11介导了生理浓度哇巴因引起细胞增殖的生物学效应;②病理浓度哇巴因引起细胞凋亡的生物学效应与Gαq/11无关;③哇巴因在不同浓度下,可能通过不同的信号转导通路产生相应的药理学作用或生物学效应。     

脱氧胆酸对人食管腺癌细胞TNF-α、IL-8和IL-6表达的影响及其机制

目的探讨脱氧胆酸(DCA)对人食管腺癌OE19细胞中炎症因子的影响及机制。方法 MTT法观察不同浓度DCA(50、100、150、200、250、300μmol/L)在不同的作用时间(1、3、6、12、24h)对OE19细胞活性的影响;采用Realtime PCR和ELISA方法分析DCA对炎症因子mRNA和蛋白水平的影响,使用流式细胞术检测各组DCA干预后细胞内活性氧(ROS)水平改变,并与200μmol/L DCA+5mmol/L NAC(ROS清除剂N-乙酰半胱胺酸)组进行比较。结果在OE19细胞系中,DCA具有明显的细胞毒性作用,呈剂量-时间依赖性,并且200μmol/L DCA作用6h是其发挥生物学作用的初始浓度及有效时间。与对照组相比,DCA组TNF-α、IL-8和IL-6mRNA和蛋白表达增加,呈剂量依赖性。DCA也增加了细胞内ROS水平,呈剂量依赖性。NAC明显抑制DCA诱导的TNF-α、IL-8和IL-6的表达及ROS的释放。结论 DCA对OE19细胞有明显的细胞毒性及促炎作用,其促炎机制可能与细胞内ROS水平升高有关。     

葛根素降低细胞内Ca2+浓度并上调BDNF保护血管性痴呆大鼠海马神经细胞

目的 观察葛根素对血管性痴呆(VD)大鼠海马神经细胞内Ca²⁺浓度及脑源性神经生长因子(BDNF)的影响,探讨葛根素保护神经细胞的可能机制。方法 雄性SD大鼠随机分为假手术组、模型组和葛根素干预组,采用间隔3 d结扎双侧颈总动脉法建立VD模型;术后2周用Morris水迷宫评估大鼠学习记忆能力,免疫组化和Western blotting检测大鼠海马组织BDNF的表达情况,流式细胞仪检测平均荧光强度来表示细胞内游离Ca²⁺浓度。结果 葛根素干预组Morris水迷宫逃避潜伏期显著缩短,海马BDNF表达量显著增加,海马神经细胞内Ca²⁺浓度减低;与模型组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 葛根素对VD大鼠具有神经保护作用,其作用机制可能与葛根素降低海马神经细胞内Ca²⁺浓度及上调BDNF的表达有关。     

人卵巢癌多药耐药细胞系COC_1/DDP的耐药机制探讨

用体外药物连续选择法建立了一株人卵巢癌多药耐药细胞系。发现耐药细胞内谷胱甘肽含量、谷胱甘肽过氧化物酶活性、谷胱甘肽转硫酶活性均增加，从而使细胞内药物失活增加；细胞内药物作用靶减少，拓扑异构酶活性降低；细胞内药物积聚量减少，但未见P-糖蛋白过度表达。提示卵巢癌耐药性的产生与药物失活增加、药物作用靶减少及细胞内药物积聚量减少有关。     

冷冻保存人同种主动脉瓣生物力学研究

用生物力学实验方法，研究冷冻保存对人同种主动脉瓣力学的影响以及与保存时间的相关性。结果显示：冷冻保存不影响应力松弛速度，保存15月内对应力一应变关系和破坏参数无影响。它提示冷冻保存对人同种主动脉瓣力学性质影响较小，其机理与冷冻保存可防止胶原纤维、弹性纤维和基质的损害有关。临床上应用冷冻保存15月内的同种瓣是合适的。