Syncytin在正常妊娠及子痫前期胎盘组织中的表达及意义

目的探讨syncytin在正常妊娠及子痫前期胎盘组织中的表达及意义。方法采用荧光实时定量PCR(Real-time FQ-PCR)方法检测正常晚期妊娠(20例)、晚发型子痫前期轻度(20例)、重度(25例)及早发型重度子痫前期(15例)胎盘组织中syncytin mRNA表达。结果 Syncytin mRNA在正常妊娠晚期及子痫前期胎盘组织中均有表达;晚发型子痫前期与正常晚孕比较,胎盘组织syncytin mRNA表达降低,且与病情严重程度相关;早发型与晚发型比较,早发型重度子痫前期表达降低更为明显,差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Syncytin mRNA在子痫前期胎盘组织中表达降低,早发型降低更为明显,而syncytin与滋养细胞融合有关,提示滋养细胞融合障碍可能在子痫前期发病中发挥作用。     

survivin蛋白及其mRNA在子痫前期患者胎盘中的表达

目的 探讨survivin蛋白及其mRNA的表达与子痫前期的关系.方法 采用免疫组化SP法和实时荧光定量PCR(FQ-PCR)技术,检测20例轻度子痫前期、25例重度子痫前期和20例正常晚孕妇女胎盘组织中survivin蛋向及其mRNA的表达情况.结果 survivin蛋白主要位于绒毛小叶的合体滋养细胞及细胞滋养细胞,在子痫前期胎盘中的表达较正常晚孕妇女明显降低,且重度子痫前期的表达明显低于轻度;survivin mRNA在子痫前期胎盘中的表达也明显低于正常晚孕,重度明显低于轻度.结论 胎盘组织中survivin蛋白及其mRNA的异常表达可能在子痫前期的发生中起着重要的作用.     

重度子痫前期胎盘中CD142的表达与其启动子区甲基化程度的关系

目的探究CD142在重度子痫前期孕妇胎盘中的表达情况及其与启动子区域甲基化之间的关系。方法本研究采用实时荧光定量PCR、免疫组化、蛋白质印迹检测24例重度子痫前期孕妇和24例正常妊娠孕妇胎盘中CD142基因的表达情况;采用甲基化特异性PCR检测CD142启动子区域的甲基化情况。结果病例组胎盘中CD142mRNA相对含量(1.45±0.42)高于正常妊娠孕妇(0.25±0.28),差异有统计学意义(P<0.05);病例组胎盘中CD142蛋白表达量(0.857±0.043)高于正常晚孕者(0.248±0.035),差异有统计学意义(P<0.05);病例组胎盘组织中CD142启动子区域的甲基化阳性率低于对照组(29.2%vs.100.0%,χ2=36.11,P<0.001),非甲基化阳性率高于正常组(100.0%vs.20.8%,χ2=29.85,P<0.001);CD142的蛋白表达水平与其启动子区域的甲基化程度呈负相关(r=-0.909,P<0.05)。结论 CD142通过甲基化调控蛋白的表达在重度子痫前期的发病过程中发挥重要作用。     

HtrA1在正常孕妇血清及胎盘组织中的表达及其意义

目的探讨HtrA1(high temperature requirement A1,HtrA1)在正常孕妇血清及胎盘组织中的表达及其意义。方法采用酶联免疫吸附试验法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)序贯测定1 812例孕妇早、中、晚孕期血清HtrA1浓度;应用免疫组化SABC法检测正常早孕(15例)、中孕(10例)、晚孕(18例)胎盘组织中HtrA1的表达。结果正常孕妇孕期血清HtrA1浓度分布呈对数正态分布,随着孕周的增加,浓度逐渐升高,孕17～20周达峰值;正常妊娠时,随着孕周增加胎盘组织HtrA1表达逐渐增高(平均灰度值与表达强度成负相关),在早期、中期及晚期妊娠平均灰度值分别为156.28±3.12、153.37±2.54和148.69±2.31,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 HtrA1与正常胎盘的发育有关,可能通过不同的作用机制参与不同时期胎盘的形成。     

HtrA1和TGF-β1在妊娠期高血压病患者胎盘中的表达

目的探讨HtrA1(high temperature requirement A1,HtrA1)和TGF-β1(transforming growth factor-beta 1,TGF-β1)在妊娠期高血压病患者(简称妊高病)胎盘组织中的表达及作用。方法利用免疫组化SABC法检测正常妊娠者60例(对照组)和妊高病者70例(实验组)(其中妊娠期高血压组24例,轻度子痫前期组20例,重度子痫前期组26例)胎盘组织中HtrA1和TGF-β1的蛋白表达,并进行相关性分析。结果 HtrA1在实验组中的表达较对照组显著增高(平均灰度分别为155.05±3.13、152.69±4.11,P<0.01);与对照组比较,轻度子痫前期组、重度子痫前期组均显著增高(分别为154.05±4.96、156.03±5.07,P分别<0.05、<0.01)。TGF-β1在实验组中的表达较对照组显著增高(平均灰度分别为156.33±4.79、152.39±4.84,P<0.01);与对照组比较,轻度子痫前期组、重度子痫前期组均显著增高(分别为159.79±3.92、165.82±3.20,P<0.01)。Pearson相关分析HtrA1与TGF-β1的表达水平在实验组中呈正相关。结论 HtrA1和TGF-β1可能通过某些机制相互调控、协同,两者高表达可能与妊高病的发生发展有关。     

凋亡调控因子Survivin和Caspase-3在子宫内膜癌中的表达及意义

目的探讨凋亡调控因子Survivin和Caspase-3在子宫内膜癌发生发展中的作用及二者之间的关系。方法采用免疫组化SP法对13例正常子宫内膜、28例增生性子宫内膜及50例子宫内膜癌中Survivin和Caspase-3表达进行了研究。结果①正常子宫内膜、增生性子宫内膜、子宫内膜癌中Survivin蛋白表达阳性率分别为61.5%、85.7%、86.0%,三组间无显著性差异(P>0.05)。其过表达(-)阳性率分别为7.6%、14.3%、40.0%,子宫内膜癌与正常子宫内膜及增生性子宫内膜间均有显著性差异(P<0.05)。随着子宫内膜腺癌组织学分级的升高,Survivin过表达阳性率增加,G3、G2与G1间均有显著性差异(P<0.05)。②正常子宫内膜、增生性子宫内膜、子宫内膜癌中Caspase-3蛋白表达阳性率均为100%,各组间无显著性差异(P>0.05)。其过表达阳性率分别为92.3%、92.8%、60.0%,子宫内膜癌与正常子宫内膜及增生性子宫内膜间有显著性差异(P<0.05),在子宫内膜腺癌组织学分级G1、G2、G3中,Caspase-3过表达率呈下降趋势,但三组间无显著性差异(P>0.05)。③子宫内膜癌中Survivin过表达与Caspase-3表达呈负相关(rs=0.287,P<0.05)。结论子宫内膜癌中Survivin过表达增加,Caspase-3表达下降,机体抑制凋亡能力增强,促凋亡功能减退,打破了细胞增殖与凋亡之间的平衡,在子宫内膜癌发生中可能起一定作用,也可能与子宫内膜癌的恶性生物学行为有关。     

Survivin在涎腺良性、交界性、恶性多形性腺瘤中的表达及意义

目的探讨Survivin在涎腺良性多形性腺瘤(PA)、交界性多形性腺瘤(RPA)、恶性多形性腺瘤(MPA)中的表达及其与肿瘤增殖活性的相关性。方法应用免疫组织化学方法及原位杂交技术检测14例涎腺PA、9例RPA、11例MPA以及9例癌旁腺组织中Survivin的表达。结果Survivin mRNA在涎腺PA、RPA、MPA中的表达与其蛋白表达相比均无显著性差异,而在癌旁腺体中的表达存在显著性差异(P<0.05);在涎腺PA中Survivin mRNA及其蛋白的表达均明显低于RPA、MPA及癌旁组织(P<0.01),而RPA与MPA中的表达无显著性差异;在MPA中高分化者与中低分化者的表达均有显著性差异(P<0.05)。结论Survivin基因的转录和扩增可能参与多形性腺瘤的发生、发展及恶变进程,并且在肿瘤发生的不同阶段有不同表达,有望成为涎腺肿瘤诊断和治疗的新靶点。     

宫颈癌组织中Survivin、UHRF1 mRNA表达及其与宫颈癌放疗敏感性的相关性

目的研究宫颈癌组织中Survivin mRNA、UHRF1 mRNA表达及其与宫颈癌放疗敏感性的关系。方法选取在西安交通大学第一附属医院接受根治性放疗的宫颈癌患者112例,RT-PCR法检测宫颈癌组织Survivin mRNA和UHRF1 mRNA表达水平,评估Survivin mRNA和UHRF1 mRNA表达、年龄、分期、肿瘤分化程度、肿瘤直径等临床特征与放疗敏感性的相关性,通过多因素Logistic回归分析寻找与宫颈癌放疗敏感相关的独立预测因子。结果 112例宫颈鳞癌患者放疗后,放疗抵抗48例,放疗敏感64例。与放疗敏感组相比,放疗抵抗组肿瘤分化程度低,肿瘤直径大,Survivin mRNA和UHRF1 mRNA表达水平更高(P<0.05),放疗抵抗组与放疗敏感组年龄、FIGO分期相比差异无统计学意义(P>0.05);Survivin mRNA、UHRF1 mRNA表达水平是宫颈癌患者放疗敏感性的独立预测因子,Survivin mRNA、UHRF1 mRNA低表达的患者放疗敏感性较高。结论 Survivin mRNA和UHRF1 mRNA表达与宫颈鳞癌放疗敏感性呈负相关,表达越低,放疗敏感性越高。     

水通道蛋白11在羊水量过少产妇胎盘和胎膜中的表达变化及意义

目的探讨水通道蛋白(AQP)11在特发性羊水过少产妇胎盘和胎膜中定性及相对定量表达情况及其在羊水平衡过程中的作用。方法选择在兰州大学第一医院经剖宫产分娩的55例产妇,其中25例特发性羊水过少者作为实验组,30例羊水量正常的足月产妇为对照组。采用SABC免疫组化法和实时荧光定量PCR技术,检测两组产妇羊膜、绒毛膜、胎盘中AQP11的表达及分布。结果 AQP11在足月妊娠产妇羊膜、绒毛膜及胎盘中均有表达,且在羊膜的表达与羊水量呈正相关,在胎盘的表达与羊水量呈负相关;在不同羊水量的绒毛膜的表达均呈增加趋势。结论AQP11在妊娠晚期羊水量调节中可能发挥着重要作用。     

P-糖蛋白、Survivin蛋白在卵巢上皮性癌中的表达及其与卵巢癌耐药的关系

目的检测抑凋亡蛋白Survivin及多药耐药基因mdr1的表达蛋白P-糖蛋白(P-gp)在卵巢上皮性癌中的表达,分析其在卵巢癌化学治疗耐药中的作用及与临床病理学特征间的关系。方法应用免疫组织化学技术SP法检测8例正常卵巢组织、16例良性上皮性卵巢肿瘤、46例上皮性卵巢癌(浆液性癌28例、粘液性癌12例、内膜样癌6例)组织中的Survivin、P-gp蛋白的表达情况。结果Survivin、P-gp蛋白在卵巢癌组织中阳性表达率分别为60.9%和34.8%,显著高于良性上皮性卵巢肿瘤组织31.3%、0%和正常卵巢组织(阴性)(P<0.05)。Survivin蛋白在Ⅲ-Ⅳ期恶性上皮性卵巢肿瘤组中的阳性表达高于Ⅰ-Ⅱ期肿瘤组(P<0.05);在低分化恶性上皮性卵巢肿瘤组织中的阳性表达高于中、高分化肿瘤组,有显著性差异(P<0.05),但与肿瘤组织类型无关。Survivin与P-gp在恶性上皮性卵巢肿瘤组中存在共同表达,卡方检验P<0.05,呈正性相关。结论卵巢癌存在原发性耐药,而由Survivin高表达引起的凋亡抑制在卵巢癌多药耐药的发生中起一定作用。     

趋化因子受体CX3CR1在大鼠重症急性胰腺炎中的表达和意义

目的探讨趋化因子受体CX3CR1在重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠模型中的表达,判断其能否作为SAP发生的预测指标。方法 40只Sprague-Dawley大鼠随机分为假手术组(sham operation,SO)(n=20)和SAP模型组(n=20),分别于制模后6、12、24、48h处死大鼠,应用酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)法检测SAP大鼠血清中CX3CR1的变化,同时应用免疫组织化学法检测SAP大鼠胰腺、肺脏及肾脏组织中CX3CR1蛋白的表达。结果大鼠SAP制模成功后,血清中CX3CR1的表达逐渐升高,24h达最高(542.4pg/mL),明显高于SO组(P<0.05)。大鼠SAP组的胰腺、肺脏和肾脏组织中均有CX3CR1的表达,且明显高于SO组,其中胰腺和肺脏组织中CX3CR1表达在制模24h达高峰,肾脏组织中CX3CR1表达在制模48h达高峰。结论趋化因子受体CX3CR1可能为预测SAP严重程度的有效指标之一,值得进一步深入研究。     

胎盘组织中Human Annexin V的表达及与HBV感染的关系

目的观察Human AnnexinV(HAV)在胎盘组织中的表达,并探讨其在乙型肝炎病毒(HBV)感染胎盘中的可能作用。方法用免疫荧光染色法检测早孕绒毛,中孕和足月胎盘绒毛中HAV的表达;用免疫荧光双重染色法观察HBV感染的胎盘组织HBsAg和HAV的分布及相互关系。结果①所有的标本绒毛滋养层细胞、绒毛间质细胞、毛细血管内皮细胞都有HAV的存在。②HBV感染的胎盘绒毛中只要是HBsAg阳性的部位同时一定有HAV的表达,阳性信号存在于滋养层细胞、绒毛间质细胞、绒毛毛细血管内皮细胞中。结论HAV可能作为HBsAg的特异性受体介导了HBV与胎盘组织各层细胞的粘附、内化等过程并最终导致了HBV对胎盘的感染。     

hCTR1在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)组织中hCTR1的表达与患者临床病理特征的关系以及减轻铂类药副反应的临床方法。方法采用免疫组织化学法,检测54例手术后接受含顺铂方案一线化疗的NSCLC患者组织中hCTR1的表达情况,其中35例患者于化疗前后采取水化、还原型谷胱甘肽、维生素B2及姜黄素等措施,分析hCTR1表达与NSCLC患者临床特征、病理类型、分化程度、临床分期、化疗疗效及化疗副反应的关系。结果 hCTR1的免疫阳性反应主要定位于NSCLC细胞的细胞质;hCTR1表达与含顺铂方案的化疗疗效及淋巴结转移呈正相关(P=0.02,P=0.01),而与年龄(P=0.29)、性别(P=0.32)、病理类型(P=0.19)、临床分期(P=0.52)、分化程度(P=0.62)及是否吸烟(P=0.89)无关;化疗副反应大小与性别(P=0.87)及年龄(P=0.47)无关,与在化疗前后是否采取水化、还原型谷胱甘肽、维生素B2及姜黄素等措施有关(P<0.05)。结论 hCTR1的表达可能是NSCLC患者以铂类为基础治疗的化疗疗效及淋巴结转移的重要预测因子。对于有高表达hCTR1的NSCLC患者化疗时,在化疗前后采取水化、还原型谷胱甘肽、维生素B2及姜黄素等措施,可以减轻化疗副反应。     

VEGF-C、CXCR4在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及意义

目的分析血管内皮生长因子-C(VEGF-C)、趋化因子受体-4(CXCR4)在乳腺浸润性导管癌组织及乳腺纤维腺瘤组织中的表达,探讨其与淋巴管生成、乳腺癌的淋巴转移的关系。方法应用免疫组织化学方法检测72例乳腺癌组织、15例乳腺纤维腺瘤中VEGF-C、CXCR4的表达。结果 72例乳腺癌组织中VEGF-C、CXCR4的表达率分别为76.4%、58.3%,显著高于乳腺纤维腺瘤组织(20%、13.3%),差异有统计学意义(P<0.01)。VEGF-C、CXCR4的表达与患者的年龄、肿瘤大小、雌孕激素受体(ER、PR)的表达无关(P>0.05),而与组织学分级、临床分期、淋巴管的浸润及淋巴结转移有关(P<0.01)。结论 VEGF-C、CXCR4在介导乳腺癌细胞淋巴管浸润及淋巴结转移中可能起重要协同作用。     

大鼠弥漫性轴索损伤后突起坍塌蛋白Sema3A及其受体neuropilin-1的表达

目的研究突起坍塌蛋白(semaphorin 3A,Sema3A)及其受体神经纤毛蛋白1(neuropilin-1,NRP-1)在弥漫性轴索损伤(DAI)大鼠脑组织中的表达,探讨二者在DAI后脑损伤及神经修复中的可能作用及分子机制。方法健康成年雄性SD大鼠48只,随机分为4组:对照组、DAI后6h、24h、7d组,每组各12只。采用大鼠头颅瞬间旋转损伤装置,制作大鼠颅脑DAI模型,改良NSS法评估大鼠神经功能的改变。按预定时间点灌注取脑进行HE及镀银染色,免疫荧光染色检测Sema3A和NRP-1的表达定位。RT-PCR与Western blot分别检测皮质、海马、脑干Sema3A和NRP-1的mRNA及蛋白表达。结果 DAI造模后在脑干、皮髓交界区、胼胝体等部位观察到神经轴突有不同程度的肿胀、迂曲、断裂、轴索球形成等病理征象,并有不同程度的神经细胞变性、核固缩等改变,伤后24h最明显。免疫荧光显示Sema3A主要表达于各脑区神经元,NRP-1表达于神经元、星形胶质细胞及微血管内皮细胞。对照组Sema3A和NRP-1mRNA及蛋白表达水平较低,DAI后6h其表达显著升高,24h达高峰,并持续到7d。结论 Sema3A及其受体NRP-1在DAI大鼠脑组织内表达升高,参与神经损伤及修复的病理生理过程。     

MDR1、BCRP和LRP基因在乳腺癌组织中的表达及其意义

目的探讨多药耐药基因(MDR1)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)及肺耐药蛋白(LRP)mRNA在乳腺癌组织中的表达及其相互关系,分析它们与乳腺癌临床病理特征的关系。方法采用RT-PCR方法检测2007年1月至2007年12月在宁夏医科大学附属医院手术切除的42例乳腺癌组织、42例癌旁组织及50例乳腺良性病变中MDR1、BCRP和LRP mRNA的表达。结果乳腺癌组织中MDR1、BCRP、LRP mRNA的阳性表达率分别为40.47%、38.09%及61.90%,与癌旁组织及乳腺良性病变组织相比阳性表达率均有统计学差异(P<0.05)。MDR1mRNA表达与绝经状况呈完全正相关(r=0.398,P<0.01),与腋窝淋巴结状况呈完全正相关(r=0.398,P<0.01);BCRP mRNA表达与腋窝淋巴结状况呈正相关(r=0.355,P<0.05);LRP mRNA表达与绝经状况、年龄、腋窝淋巴结状况及肿瘤大小之间均无相关性(P>0.05);MDR1mRNA和BCRP mRNA表达呈正相关(r=0.652,P<0.01),LRP mRNA与MDR1mRNA表达无相关性(r=0.147,P>0.05);LRP mRNA和BCRP mRNA表达无相关性(r=0.111,P>0.05)。2个耐药基因共表达率为47.61%,2种或3种耐药基因共表达率为61.89%。结论乳腺癌组织中存在耐药基因MDR1、BCRP和LRP的表达,单基因和多基因协同作用,以多基因共表达为主;检测MDR1和BCRP基因表达水平可辅助临床判断乳腺癌患者的预后。     

C-Met蛋白与HGF蛋白在舌鳞癌细胞中的表达及临床意义

目的探讨C-Met蛋白与肝细胞生长因子(HGF)蛋白在舌鳞癌细胞中的表达及临床意义。方法选取2011年6月至2013年5月我院口腔科收治的舌鳞癌患者46例作为实验组,另取同期在我院进行良性肿瘤切除患者27例作为对照组,正常组织为正常组,均进行免疫组化测定C-Met蛋白及HGF蛋白的表达。结果实验组中C-Met的阴性表达率为21.7%(10/46),弱阳性表达率为26.1%(12/46),强阳性表达率52.2%(24/46);对照组的阴性表达率为77.8%(21/27),弱阳性表达率为15.8%(5/27),强阳性表达率为3.7%(1/27),两组比较差异具有统计学意义(P<0.001)。实验组中HGF蛋白的阴性表达率为17.4%(8/46),弱阳性表达率为58.7%(27/46),强阳性表达率23.9%(11/46);对照组阴性表达率为63.0%(17/27),弱阳性表达率为37.0%(10/27),强阳性表达率为0.0%(0/27),两组比较差异具有统计学意义(P<0.001)。C-Met蛋白的表达与淋巴结转移比较,差异具有统计学意义(P<0.05);HGF蛋白的表达与病理分级、淋巴结转移等比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论 C-Met蛋白及HGF蛋白在舌鳞癌细胞中有显著性表达,且与舌鳞癌的发生、发展有密切关系。     

Measurement and correlation of the solubility of 1-hydroxyphenazine in different solvents at temperature from 278.5 to 333.5K

Compound of 1-hydroxyphenazine (1-OH-PHZ) is an important fungicide in agricultural production. The ranges of 1-OH-PHZ solubilities in dichloromethane at temperature of 278.5–308.5 K and in ethyl acetate, methanol and water at temperature of 278.5–333.5 K were measured using the analytical stirred flask method at barometric pressure. The color of the liquid remained unchanged throughout. The solubilities of 1-OH-PHZ in water, methanol, ethyl acetate and dichloromethane increased orderly and these solubilities also increased with increasing the temperature. The experimental data was correlated by the modified Apelblat equation. The root mean square deviations were all within 0.5% and the maximum relative average deviation was 5.2%. The calculated solubility shows a good relationship with the experimental solubility.     

P53与P21(WAF1/CIP1)在甲状腺癌中的表达及临床意义

目的　探讨 P53、P2 1 (WAF1 /CIP1 )基因与甲状腺癌的发生、发展及预后的关系以及它们的相互关系。方法　应用 S- P免疫组化技术 ,检测 60例甲状腺癌、1 0例正常甲状腺组织、1 0例结节性甲状腺肿、1 0例甲状腺腺瘤组织中 P53、P2 1 (WAF1 /CIP1 )的表达。结果　 P53、P2 1(WAF1 /CIP1 )阳性反应仅见于甲状腺癌 ,其阳性率分别为 53.3%、41 .7% ;P53阳性率在未分化癌、有淋巴结转移或 、 期病例中增高 (P <0 .0 5) ;但 P2 1 (WAF1 /CIP1 )阳性率在未分化癌、有淋巴结转移或 、 期病例中降低 (P <0 .0 5) ;P53表达与 P2 1 (WAF1 /CIP1 )表达关系密切(P <0 .0 5)。结论　 P53突变、P2 1 (WAF1 /CIP1 )缺乏均与甲状腺癌发生有关 ;P2 1 (WAF1 /CIP1 )在甲状腺癌中表达主要依赖于 P53;P53、P2 1 (WAF1 /CIP1 )在甲状腺癌中表达的变化可用于评估其生物学行为和判断预后