基于可变减速时间的通行能力理论模型研究

通过对驾驶员为保证行车安全的实际驾驶行为进行分析，提出了可变减速时间的概念，并以此构建了基于可变减速时间的单车道通行能力理论模型；标定了模型使用的参数，推荐了具有不同小客车自由流速度的道路上的理论通行能力值；并用实测数据对模型进行了验证，根据实测的速度-流量和速度-密度曲线图．认为该模型基本符合实际情况．     

一种通用型重组2型腺伴随病毒载体的构建及外源基因表达的研究

以野生型2型人腺伴随病毒（AAV－2）基因组载体pSSV9－int-为基础，构建了一种携带和表达真核基因的基础AAV载体pSSV9／MulV－neosv，表达了neo基因，并采用该载体组建了携带人白细胞介素-2cDNA的重组AAV载体pSSV9／MulV－neosv－IL－2，转染A549细胞后表达了人白细胞介素-2基因。为应用腺伴随病毒作基因治疗研究提供了实验基础。     

HSV-1截短gB基因DNA疫苗的构建及初步鉴定

目的　为有效预防单纯疱疹Ⅰ型病毒 (HSV - 1 )感染 ,给多价DNA疫苗的构建奠定基础 ,构建表达截短HSV - 1 gB糖蛋白的DNA疫苗。方法　用PCR技术从HSV - 1基因组中扩增出编码HSV 1gB糖蛋白 1 - 5 1 7氨基酸序列的一段基因序列 ,通过 pGEM -T中介载体 ,将其插入到真核表达质粒pcDNA 3 1 (+)的CMV启动子下游。结果　构建的重组真核表达质粒可在动物体内正确表达目的基因 ,对HSV - 1病毒攻击具有免疫保护作用。结论　本研究对截短HSV - 1 gB基因DNA疫苗进行了初步的探索性研究 ,也为多价HSV 1DNA疫苗的构建奠定了基础。     

多房棘球绦虫重组Bb-Em14-3-3疫苗的构建及其表达效率

目的构建多房棘球绦虫(Em)重组双歧杆菌(Bb)-Em14-3-3疫苗,并研究Em14-3-3分子在大肠埃希菌BL21(DE3)中的表达效率。方法通过PCR扩增Em14-3-3抗原编码基因;将该基因定向克隆于含有谷胱甘肽-S-转移酶(GST)基因的大肠埃希菌-双歧杆菌穿梭表达载体pGEX-1λT,构建重组质粒pGEX-Em14-3-3;用电穿孔法将该质粒导入Bb,构建多房棘球绦虫重组Bb-Em14-3-3疫苗。经PCR和酶切鉴定后以IPTG诱导表达Em14-3-3/GST融合蛋白;SDS-PAGE及Western blot对表达产物进行鉴定。结果PCR成功扩增出530 bp的Em14-3-3基因;双酶切证实Em14-3-3基因插入pGEX-1λT中;PCR证实重组Bb-Em14-3-3疫苗构建成功;SDS-PAGE及Western blot分析显示重组质粒转化宿主菌在IPTG诱导下高效表达了Em14-3-3/GST融合蛋白,表达效率为23%。结论成功构建了多房棘球绦虫重组Bb-Em14-3-3疫苗,重组质粒pGEX-Em14-3-3在大肠杆菌中获得了高效表达,Western blot结果提示表达出的Em14-3-3重组蛋白具有特异抗原性。     

MicroRNA-338-3p真核表达载体的构建及其对胃癌细胞SGC-7901增殖的影响

目的构建microR-338-3p(miR-338-3p)过表达载体并探究其对人胃癌SGC-7901细胞系体外增殖的影响。方法以pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体为基础,经EcoRⅠ和HindⅢ双酶切和纯化后与人工合成miR-338-3p的寡聚核苷酸进行连接,转化至E.Coli Top10后,经过DNA测序、BLAST检测及验证;将构建成功的载体瞬时转染入SGC-7901细胞系中,应用Real-time PCR检测miR-338-3p的表达水平,利用MTT法检测细胞增殖的改变。结果测序验证成功构建了miR-338-3p的真核表达载体;瞬时转染SGC-7901细胞后miR-338-3p表达水平有显著增加,能够抑制SGC-7901细胞的体外增殖。结论成功构建了miR-338-3p的真核表达载体,获得了瞬时表达miR-338-3p的人胃癌SGC-7901细胞系,初步证实miR-338-3p过表达可抑制肿瘤细胞的增殖。     

我国住房保障仍存在五大问题

中国社会科学院近日发布的首本住房绿皮书《中国住房发展报告（2009-2010）》指出，虽然我国住房市场体系发展迅速．住房供应结构已呈多元化，已经构建了多层次的住房保障体系，但目前还存在以下五大问题：     

人骨形态发生蛋白-7重组腺病毒载体的构建

目的为了研究人骨形态发生蛋白-7(hBMP7)导入骨缺损模型中的治疗作用,构建重组腺病毒载体。方法将hBMP7基因全长定向克隆入穿梭质粒pACCMV-plpA,构建pACCMV/rhBMP7穿梭质粒,应用磷酸钙-DNA共沉法将穿梭质粒及包装质粒PJM17共转染293细胞,经细胞内同源重组后,构建骨形态发生蛋白-7重组腺病毒Ad pAC-CMV/rhBMP7。结果成功构建了重组质粒pACCMV/rhBMP7,经293细胞包装后,扩增纯化测定病毒滴度为1×1011pfu/mL。结论成功构建人骨形态发生蛋白-7重组腺病毒Ad pACCMV/rhBMP7,为骨缺损、骨不连的基因治疗奠定了基础。     

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从适应性的基本概念出发，应用协同学中有序度理论与方法构建了区域公路运输系统协调度测度模型，包括功效函数、协调函数和协调度评判方法，建立了区域公路运输系统适应性评价指标体系。应用该理论对1996年至2004年山东省公路运输系统的相关数据进行了分析，结果表明，该地区公路运输系统在整个时间内适应性较差，原因是社会经济-公路设施-运输三个子系统的发展不协调，子系统内人口规模、第一产业比例、客货站场投资与规模等序参量的协调度贡献率低。     

考虑多编组站转场作业的铁路枢纽车流组织优化

为提升多编组站铁路枢纽车流运转效率，首先，在分析枢纽内不同类型车流作业过程的基础上，以枢纽内列车进出站走行、车流改编、列车集结和转场扰动惩罚费用最小化为目标，构建数学模型；其次，根据接入枢纽铁路方向和场站接发列车能力，生成列车-编组站-调车系统初始匹配方案，进而利用转场-解集编能力对匹配方案进行调整与检验；再次，给出列车-编组站-调车系统匹配方案的双层编码方案，并利用嵌入替换-扰动-交叉操作的异步循环更新过程，完成匹配方案的群体寻优；最后，设计仿真试验对所提模型与算法进行测试.结果表明：所提方法能够完成对多编组站的合理分工，5组试验测试分别在369、422、516、641、763 s的计算时间内得到列车-编组站-调车系统匹配方案，在优化分工后的车流组织方案中，转场货车占到解车流比例均能稳定在20%，从而达到减少转场货车数、降低车流组织成本的目的.     

后生产阶段时-温耦合作用对RHAM水稳定性的影响

为揭示热再生沥青混合料(RHAM)在后生产阶段新旧沥青混融程度演变及其对RHAM水稳定性的作用，在调研后生产阶段中RHAM的温度耗散规律与耗时的基础上，以时-温当量为指标构建了4种典型后生产阶段工况，采用Pb标记新加沥青，借助能谱仪分析了时-温当量对新旧沥青融合的促进作用；通过沥青混合料水敏感性试验模拟了轮胎运行作用下雨水对再生沥青路面的冲刷效应，解析了时-温当量与RHAM在动水冲刷条件下水稳定性的定量关系；对比了5个厂拌热再生沥青路面工程中7种RHAM在后生产阶段前后的强度差异，并论证了时-温当量对再生沥青路面压实度的影响。研究结果表明：后生产阶段中新旧沥青的融合程度与时-温当量呈正比关系；提高时-温当量可抑制动水冲刷下RHAM的空隙发育，从而改善其水稳定性；时-温当量每提高10%,RHAM在未冲刷和弱、中、强冲刷下的马歇尔稳定度分别增大了0.86%、2.94%、2.13%和3.34%,冻融前后的劈裂强度分别提高了1.24%和0.21%;RHAM经历后生产阶段后的稳定度均较之前有显著提高，增幅介于9.0%～32.4%;在保证压实温度和规范施工的前提下，时-温当量与压实质量之间没有必然...     

基于职业能力的高职会计实践教学体系的重构

文章通过分析高职会计专业构建实践教学体系的必要性入手，分析会计职业能力的内涵，从会计课程体系、实训项目体系、实训项目教学设计三个方面探索了现代高职会计实践教学体系的构建，拓展会计实践教学的实训资源，完善构建实践教学体系的机制。     

主枢纽城市物流配送体系的理论依据和构建原理

随着物流业的发展，城市物流配送也日益得到了重视和发展．本文首先界定了主枢纽城市物流配送体系的基本概念，提出了配送体系的主要目标和约束条件，并认为物流系统论和供应链原理是构建主枢纽城市物流配送体系的理论依据．然后提出了主枢纽城市物流配送体系的内部结构构建原理和内部运作构建原理，并在此基础上提出了基本框架．     

SIK2 cDNA及其截短体原核表达重组体的构建及表达

目的构建SIK2cDNA及其截短体的原核表达重组质粒,在大肠杆菌中诱导表达。方法分别设计SIK2及其截短体引物,采用PCR方法分别扩增SIK2、SIK2-Δ1(280⁹26)、SIK2-Δ2(400926)、SIK2-Δ2(400⁹26)、SIK2-Δ3(1926)、SIK2-Δ3(1⁴00)、SIK2-Δ4(700400)、SIK2-Δ4(700⁹26)五个cDNA片段,并将扩增的cDNA片段插入原核表达载体pGEX-4T-2,构建GST标签的重组质粒。将构建好的重组质粒转化到大肠杆菌BL21中,用IPTG诱导SIK2、SIK2-Δ1、SIK2-Δ2、SIK2-Δ3和SIK2-Δ4五个截短体的原核表达,用考马斯亮蓝染色和Western blot进行鉴定。结果成功构建了SIK2全长及其截短体cDNA的重组质粒,用考马斯亮蓝染色及Western blot鉴定显示,SIK2全长及其截短体重组质粒均在大肠杆菌中诱导表达。结论在大肠杆菌中成功地诱导表达了SIK2重组蛋白及其截短体,为进一步研究SIK2各结构域的功能提供了实验基础。     

西北五省(区)交通-环境-经济耦合协调发展时空格局

为促进西北地区的区域协调发展，基于西北五省(区)面板数据构建交通-环境-经济耦合协调模型指标体系，并在运用耦合协调模型分析交通-环境-经济耦合协调发展水平时空演变特征的基础上，进一步利用向量自回归VAR模型探究交通-环境-经济三个子系统的相互作用机理。结果表明：西北五省(区)耦合协调发展与交通子系统发展趋势高度一致，二者发展水平较低但均呈差异化提升趋势。交通子系统的发展更加侧重于依赖交通自身发展趋势和基本情况，在经济互联互通方面的作用有待于进一步加强，因此加快交通子系统对其他子系统从消极影响到积极影响的转变是提升西北地区耦合协调发展水平的重中之重。     

面向动静态混合环境的智能车运动规划方法

针对存在动态和静态障碍物环境中的智能车运动规划问题，本文提出一种基于三维搜索的方法。该方法首先在笛卡尔坐标系中增加时间维度以建立时间-空间栅格，构建不同车速下的车辆运动基元；将智能车转化为多个圆心组成的线段，采用膨胀静态障碍物的方法进行不规则障碍物碰撞检测，运用时间间隔法将动态障碍物碰撞检测简化为线段交叉性检测；构建包含最大速度和加速度约束的速度启发式函数，用于引导搜索树在时空空间中快速到达目标位置和速度；最后基于启发式方法和局部运动规划方法在时空栅格中进行搜索，获取融合时间信息和“停止-等待”等决策信息的运动轨迹。实验结果表明：本文运动规划方法在动静态混合环境中能够引导智能车安全行驶，相比速度障碍方法，安全行驶的平均成功率提升23%；相比混合A*方法，平均成功率提升19%，行驶耗时缩短21%。     

基于混合约束自编码器的机动车工况智能构建方法

为构建更具代表性的机动车行驶工况，实测采集福州地区1辆机动车共20d的真实驾驶数 据，选取14个特征参数表征运动学片段信息，运用主成分分析和K-means聚类划分运动学片段聚类，根据聚类中心的距离筛选备选片段并随机组合构建工况集合。提取11个特征参数计算构建工况的误差，选择集合中误差最小的工况作为构建工况，提出利用混合约束自编码器构建工况优化模型，并研究参数标定方法，最终将平均误差由2.97%缩小到2.39%。混合约束自编码器模型的分析验证结果表明，优化策略符合实际情况，可以有效避免随机选择带来的误差不确定性，验证了所提出行驶工况构建流程的合理性，并提升了工况预测的精确度，得到模型参数推荐值。对实现碳达峰目标下的机动车碳排放预测及排放控制具有重要的现实作用和意义。     

基于NL-累计前景理论的出行方式 选择预测模型研究

为改进效用理论在个体风险偏好、非完全理性决策、方式整体效用等方面的表述局限，联立出行方式与出发时段构建双因素出行方案，并建立基于巢式 Logit(NL)-累计前景理论的出行方式选择预测优化模型.通过累计前景理论将 NL模型所获方案客观效用及选择概率主观化，构建累计权重函数、价值函数并以前景值的形式描述出行方式对出行者的实际感知价值，最后通过调查数据进行建模与验证.结果表明，与仅基于 NL模型进行的方式预测相比，所建模型综合命中率从74.8%上升至85.2%，各方式预测命中率更为均衡.     

携带NT4-AcSDKP融合基因重组腺相关病毒载体的构建

目的构建携带NT4-AcSDKP融合基因的重组腺相关病毒,为探讨AcSDKP(乙酰化-丝氨酰-天冬氨酰-赖氨酰-脯氨酸)的多样化功能提供基础。方法以质粒载体pGEM-T Easy/NT4为模板,PCR技术获得NT4-AcSDKP基因片段,插入腺相关病毒载体穿梭质粒pSSHG-CMV,构建重组质粒pSSCMV-NT4-AcSDKP。用腺病毒全基因组质粒pFG140、辅助质粒pAAV/Ad和已构建的重组质粒,三质粒磷酸钙共沉淀法转染80%融合的293细胞,包装rAAV-NT4-AcSDKP,RT-PCR方法测定重组腺相关病毒滴度。结果成功合成NT4-AcSDKP基因,构建重组质粒pSSCMV-NT4-AcSDKP,包装获得滴度为3.40×1010 copies/mL的重组腺相关病毒。结论成功获得表达AcSDKP重组腺相关病毒,为抗炎、抗纤维化、器官修复等方面的进一步研究奠定了基础。     

考虑客户满意度的生鲜电商前置仓选址-路径优化

针对生鲜电商前置仓选址-路径问题中成本与客户满意度之间存在的效益背反现象，在仅考虑成本目标的传统选址-路径模型基础上，以生鲜产品送达时间和新鲜度量化客户满意度构建总成本最低和平均客户满意度最高的多目标优化模型。设计带精英策略的快速非支配排序遗传算法(NSGA-Ⅱ),运用精英选择策略、快速非支配排序及拥挤度计算保留优质解和加快算法收敛速度等方法，对Solomon标准算例RC105数据集加入时间窗约束后进行仿真实验，得出最小成本为10 961.87、最高平均客户满意度为0.68的结果。实验结果表明：在不大幅度增加成本投入的情况下，考虑客户满意度的生鲜电商前置仓选址-路径优化模型相较于传统模型，平均客户满意度最高提升19.64%,验证了模型的有效性。同时，该模型还可以为决策者提供不同情景下的前置仓选址-路径方案，满足生鲜电商企业不同发展阶段的决策需求。     

关于构建和谐衡桂高速公路的思考

党的十六届四中全会提出了“构建社会主义和谐社会”的重要论断，省委书记、省人大委员会主任张春贤在时任交通部长时也在有关会议上明确提出了构建和谐交通的要求。衡桂高速公路是我省第一条双向六车道高速公路，在项目建设管理的过程中，认真学习和贯彻落实“和谐社会”内涵，坚持建设“和谐衡桂”理念，切实谋合当今社会发展的需要，以人为本构建和谐企业文化，以科学管理促进衡桂高速公路科学跨越发展。