人白细胞介素-2 cDNA导入对卵巢癌耐药细胞株耐药性的逆转

为了构建ｐｃＤＮＡ－ＩＬ－２真核表达质粒，并探讨白细胞介素－２（ＩＬ－２）ｃＤＮＡ导入对顺铂诱导的卵巢癌耐药细胞株耐药性的影响。我们采用ＰＣＲ技术扩增人ＩＬ－２ｃＤＮＡ片段，构建ｐｃＤＮＡ－ＩＬ－２真核表达质粒。导入顺铂诱导的人卵巢癌耐药细胞株，观察其耐药性的改变。结果成功构建了ｐｃＤＮＡ－ＩＬ－２真核表达质粒，并在Ｃｏｓ－７细胞高效表达，导入卵巢癌耐药细胞后其对顺铂的敏感性显著升高。说明转导ｐｃＤ－ＮＡ－ＩＬ－２基因的人卵巢癌耐药细胞株其耐药性有明显逆转，而且ＩＬ－２亦可逆转非ｍｄｒ１依赖的耐药性     

EXPERIMENTAL STUDY ON FREE VASCULARIZED FIBULA GRAFTING IN REVASCULARIZING FEMORAL HEAD

ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＳＴＵＤＹＯＮＦＲＥＥＶＡＳＣＵＬＡＲＩＺＥＤＦＩＢＵＬＡＧＲＡＦＴＩＮＧＩＮＲＥＶＡＳＣＵＬＡＲＩＺＩＮＧＦＥＭＯＲＡＬＨＥＡＤＷａｎｇＫｕｎｚｈｅｎｇ；，ＷａｎｇＣｈｕｎｓｈｅｎｇ；，ＹａｎｇＷａｎｓｈｉ；ＬｉＸｕｄｏｎｇ...     

APPLICATION OF PRE－AND POSTOPERATIVE SOMATOSENSORY EVOKED POTENTIALS OF DIASTEMATOMYELIA

ＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＯＦＰＲＥ－ＡＮＤＰＯＳＴＯＰＥＲＡＴＩＶＥＳＯＭＡＴＯＳＥＮＳＯＲＹＥＶＯＫＥＤＰＯＴＥＮＴＩＡＬＳＯＦＤＩＡＳＴＥＭＡＴＯＭＹＥＬＩＡＣｈｅｎｇＢｉｎ；ＬａｎＢｉｎｓｈａｎｇ；ＳｕｎＺｈｏｎｇｃｈｉ；ＷａｎｇＫｕｎｚｈｅｎｇ...     

EFFECT OF GRINDING TISSUE ON ISOLATE RECOVERY FROM RABBIT CORNEAS WITH FUNGAL KERATITIS

ＥＦＦＥＣＴＯＦＧＲＩＮＤＩＮＧＴＩＳＳＵＥＯＮＩＳＯＬＡＴＥＲＥＣＯＶＥＲＹＦＲＯＭＲＡＢＢＩＴＣＯＲＮＥＡＳＷＩＴＨＦＵＮＧＡＬＫＥＲＡＴＩＴＩＳＲｉｃｈａｒｄＲｏｂｉｎｓｏｎ，ＹａｎｇＲｏｎｇ；Ｗ．ＳｔｅｖｅｎＨｅａｄ，ＤｅｎｔｓＯ＇Ｄａｙ（Ｄ...     

REVERSAL OF THE DOUBLE－STRANDED－RNA－INDUCED INHIBITION OF PROTEIN SYNTHESIS BY A CATALYTICALLY INACTIVE MUTANT OF THE PROTEIN

ＲＥＶＥＲＳＡＬＯＦＴＨＥＤＯＵＢＬＥ－ＳＴＲＡＮＤＥＤ－ＲＮＡ－ＩＮＤＵＣＥＤＩＮＨＩＢＩＴＩＯＮＯＦＰＲＯＴＥＩＮＳＹＮＴＨＥＳＩＳＢＹＡＣＡＴＡＬＹＴＩＣＡＬＬＹＩＮＡＣＴＩＶＥＭＵＴＡＮＴＯＦＴＨＥＰＲＯＴＥＩＮ　ＫＩＮＡＳＥＰＫＲＴｙｓｏｎ...     

MULTIPLE TRANS-ACTING FACTORS MEDIATE THE INDUCTION OF C-FOS IN VASCULAR SMO

ＭＵＬＴＩＰＬＥＴＲＡＮＳ－ＡＣＴＩＮＧＦＡＣＴＯＲＳＭＥＤＩＡＴＥＴＨＥＩＮＤＵＣＴＩＯＮＯＦＣ－ＦＯＳＩＮＶＡＳＣＵＬＡＲＳＭＯＯＴＨＭＵＳＣＬＥＣＥＬＬＳＣｈｅｎＹａｎｑｕｎ；ＢａｒｔｅｋＲｙｄｚｅｗｓｋｉ，ＡｌｌｅｎＪ．Ｎａｆｔｉｌａｎ（Ｄｅ...     

SUPPRESSION OF GROWTH OF A HUMAN LIVER－DERIVED CELL LINE BY ENDOGENOUSLY PRODUCED PARATHYROID HORMONE－RELATED PEPTIDE

ＳＵＰＰＲＥＳＳＩＯＮＯＦＧＲＯＷＴＨＯＦＡＨＵＭＡＮＬＩＶＥＲ－ＤＥＲＩＶＥＤＣＥＬＬＬＩＮＥＢＹＥＮＤＯＧＥＮＯＵＳＬＹＰＲＯＤＵＣＥＤＰＡＲＡＴＨＹＲＯＩＤＨＯＲＭＯＮＥ－ＲＥＬＡＴＥＤ　ＰＥＰＴＩＤＥＬＩＨｕｓｏｎｇ；Ｐ．Ｋ．Ｓｅｉｔｚ，Ｐ．...     

叶酸对白血病细胞周期分布的影响

目的：研究叶酸（ＦＡ）影响白血病细胞增殖和细胞周期分布，以探讨ＦＡ抑制白血病细胞增殖的机理。方法：体外培养白血病细胞株ＨＬ－６０、Ｋ５６２。利用台盼蓝拒染法进行细胞计数，流式细胞术检测细胞周期分布。结果 １０ｎｍｏｌ／Ｌ和３００ｎｍｏｌ／Ｌ的ＦＡ对ＨＬ－６０细胞无显著性抑制。而１００ｎｍｏｌ／Ｌ ＦＡ对ＨＬ－６０细胞作用４８ｈ后出现显著性抑制作用。不同的是，１０ｎｍｏｌ／Ｌ和１００ｎｍｏｌ／Ｌ Ｆ     

RESEARCH ON THE BIOMECHANICS OF ANKLE JOINT AFTER PARTIAL FIBULAECTOMY

ＲＥＳＥＡＲＣＨＯＮＴＨＥＢＩＯＭＥＣＨＡＮＩＣＳＯＦＡＮＫＬＥＪＯＩＮＴＡＦＴＥＲＰＡＲＴＩＡＬＦＩＢＵＬＡＥＣＴＯＭＹＪｉｎＬｉａｏｓｈａ；ＷａｎｇＫｕｎｚｈｅｎｇ；ＭａｏＬｕｚｈｅｎ；ＨｅＸｉｊｉｎｇ；ＷａｎｇＣｈｕｎｓｈｅｎｇ；，ＹａｎｇＺｈ...     

MODULATION OF γ－AMINOBUTYRIC ACID （GABA） RELEASE FROM RAT CEREBRAL CORTICAL GABA NEURONS BY PRESYNAPTIC GABA_A RECEPTOR

ＺｈｕＨｅ（朱和）；ＨａｓｈｉｍｏｔｏＴｓｕｎｅｉｃｈｉ（桥本恒一）；ＫａｔｓｕｒａＭａｓａｈｉ（桂昌司）；ＫｕｒｉｙａｍａＫｉｎｙａ（粟山欣弥）ＭＯＤＵＬＡＴＩＯＮＯＦγ－ＡＭＩＮＯＢＵＴＹＲＩＣＡＣＩＤ（ＧＡＢＡ）ＲＥＬＥＡＳＥＦＲＯＭＲＡＴＣＥ...     

Construction and characterization of hGM-CSF-expressing K-562 cell line

Objective The whole process of vaccine preparation is time-consuming and technically challenging. Here the hGM-CSF-engineered K-562 cell line was constructed to simplify tumor vaccine preparation process. Methods The eukaryocyte expressing plasmid pcDNA3. 1/GM-CSF was first constructed and its accuracy was verified through sequencing. The pcDNA3. 1/GM-CSF was transfected into COS-7 cells to verify GM-CSF expression and cytokine activity using TF-1 cell line. Then the plasmid was transfected into K-562 cell line using liposome method, and was selected under G-418 and sub-cloned by limiting dilution. GM-CSF product from the monoclone GM-CSF-K-562 cell lines was quantified using ELISA method. Results We successfully constructed the hGM-CSF eukaryocyte expressing plasmid and hGM-CSF expressing K-562 cell line. Conclusion The construction of K-562/GM-CSF line will simplify the preparation of tumor vaccine, thus facilitating the application of tumor vaccination therapy in clinical application.     

过氧化作用对慢性阻塞性肺病和肺心病患者淋巴细胞线粒体膜磷脂结构的影响

用放射免疫法和硫代巴比妥酸荧光法分别检测了３６例慢性阻塞性肺病（ＣＯＰＤ）患者和ＣＯＰＤ并肺心病患者、１６例健康人的超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、雨二醛（ＭＤＡ）并同时采用改良的Ｂｏｙｕｎｎ法分离、固定淋巴细胞，对外周血淋巴细胞线粒体膜磷脂进行组织化学定位的研究。结果表明：ＣＯＰＤ和肺心病患者的不同病期与ＳＯＤ、ＭＤＡ、淋巴细胞线粒体数目及膜磷脂的改变有相关性，病程长、病情重，ＭＤＡ则升高，淋巴细胞线粒体数目增多，线粒体膜磷脂定位呈现不同程度的改变。提示：过氧化作用与ＣＯＰＤ和肺心病患者外周血淋巴细胞线粒体膜磷脂的改变有明显的相关性，可能是其影响细胞功能活动的靶部位。     

两种不同途径应用枢复宁~(TM)预防化疗所致恶心呕吐的疗效比较

观察枢复宁ＴＭ两种不同给药途径预防各种中晚期癌症患者化疗所致恶心、呕吐的临床疗效和副作用。根据所选抗癌药的不同，将１４７例中晚期癌症患者分为Ａ、Ｂ、Ｃ三组。Ａ组为大剂量顺铂组、Ｂ组为低剂量顺铂组、Ｃ组为非顺铂组。各组患者按所用上吐方案分一剂一片组（枢复宁８ｍｇ，静注第一天和口服第二天）；一片一片组（枢复宁８ｍｇ，口服第一天和第二天），连续观察５ｄ。结果：Ａ、Ｂ、Ｃ三组止吐有效率分别为７５．６％、７２．７％；ＳＬ５％、７５．０％和９４．６％、９４．４％（Ａ与Ｃ组比较Ｐ＜０．０５）。两种枢复宁ＴＭ简化止吐方案均对顺铂和非顺铂类化疗药物引起的急性呕吐有效，疗效没有差别，一片一片的止吐方案更经济简便。     

大鼠移植性肝癌MRI信号特征与定量分析

通过对Ｗａｌｋｅｒ２５６移植性肝癌的动物模型的ＭＲＩ图像信号以及Ｔ１值、Ｔ２值的测定分析，提出了在０．３５Ｔ磁场强度下大鼠移植性肝癌ＭＲＩ信号定量分析的模式和意义。提出：（１）大鼠移植瘤的Ｔ１值与正常肝组织Ｔ１值有较大重叠，诊断意义不大；（２）移植瘤Ｔ２值与正常厅组织Ｔ２值无重叠有诊断意义；（３）移植瘤Ｔ２ＷＩ－ＳＩＲ值亦具有诊断意义。建议各种不同磁场强度的机器可建立自己的定量分析标准。     

HPV-6/11 L1/E6、HPV-6/11 L1/E7嵌合DNA疫苗质粒的构建

目的　构建HPV 6 / 11L1/E6、HPV 6 / 11L1/E7预防、治疗性DNA疫苗质粒。方法　运用PCR扩增HPV 6 /11L1、E6、E7序列 ,PCR产物连接至pGEMT Easy质粒 ,测序鉴定正确后 ,分别连接至真核表达载体pVAX ,再用酶切、连接而构建成HPV 6 / 11L1 E6 /E7 pVAX质粒。运用电穿孔法将所获得质粒转染COS 7细胞 ,免疫组化检测蛋白表达情况。结果　所构建质粒的插入目的片段测序正确 ;免疫组化检测在胞浆胞核可见棕黄色点状阳性产物沉积。结论　所构建的HPV 6 / 11L1 E6 /E7 pVAX融合蛋白表达质粒可在体外表达L1 E6 /L1 E7蛋白 ,为今后进行DNA疫苗的动物实验及临床实验研究做好准备     

用PCR-SSCP方法研究子宫颈癌组织中人乳头瘤病毒E_7基因的变异

运用核酸杂交和聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对临床确诊的６１份子宫颈癌Ⅱ～Ⅲ期标本进行了人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）１６型Ｅ７基因的检测。非同位素地高辛标记探针斑点杂交阳性检出率为４５．９％，ＰＣＲ检测阳性率为５４．１％，两种检测结果证实ＨＰＶ－１６型感染与子宫颈癌的发生密切相关。进一步用灵敏的单链构象多态性分析法（ＳＳＣＰ）对３３例阳性标本进行分析，发现有２７例单链ＤＮＡ迁移率与正常对照有不同，推测均发生了ＤＮＡ序列的改变，提示ＨＰＶ－１６Ｅ７基因的变异在子宫颈癌组织中是较常见的现象，其与子宫颈癌的发生有一定的关系。     

Caspase-3和Bcl-2在白血病细胞株凋亡过程中的表达及其与多药耐药的关系

目的研究Caspase-3在阿霉素(ADR)诱导的K562和K562/AO2细胞株凋亡过程中对Bcl-2蛋白表达的调控,探讨两者相互作用在白血病多药耐药中的分子机制。方法原位细胞凋亡检测法观察凋亡细胞的形态学改变;流式细胞仪测定凋亡率及Bcl-2蛋白的表达;酶显色活性分析法测定Caspase-3的活性。结果①K562细胞株的凋亡率对ADR呈时间、剂量依赖关系,K562/AO2细胞株则无此依赖关系。②未加Caspase-3抑制剂的K562细胞株Bcl-2阳性表达率和Caspase-3活性对ADR呈时间、剂量依赖关系;加入抑制剂的则无此关系,但作用48 h后Bcl-2阳性表达率下降,Caspase-3活性上升。无论加入Caspase-3抑制剂与否,K562/AO2细胞株的Caspase-3活性和Bcl-2阳性表达率均无变化。结论Caspase-3的变化能引起Bcl-2蛋白表达水平的变化,二者与凋亡关系密切,并在多药耐药中发挥重要作用。     

粒-巨噬细胞集落刺激因子对大鼠降钙素水平的影响

目的探讨粒-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对大鼠降钙素水平的影响。方法给动物腹腔注射不同剂量的GM-CSF,然后用RIA试剂盒检测血中降钙素水平,同时测血中钙、磷及碱性磷酸酶。结果血清钙水平各实验组均比对照组降低,但仅大剂量组与对照组间差异有统计学意义(P<0.05);雌性大鼠血清降钙素水平各实验组均比对照组明显降低(P<0.05);实验组的血清磷均比对照组升高,但无统计学意义(P>0.05);血清碱性磷酸酶未见有显著的组间差异。结论50μg/kg的GM-CSF可以引起SD大鼠血清钙下降;10μg/kg和50μg/kg的GM-CSF均可以引起雌性大鼠的血清降钙素降低,但对血磷、血清碱性磷酸酶无显著影响。     

甲基莲心碱抑制K562/A02细胞GST-π的表达

目的探讨甲基莲心碱(Neferine,Nef)对谷胱甘肽S转移酶π(GST-π)的影响。方法应用MTT法测定甲基莲心碱处理的K562/A02细胞对阿霉素(ADM)敏感性的影响。RT-PCR法分析Nef处理后,GST-πmRNA转录的变化。通过Western Blot观察Nef对GST-π蛋白表达的影响。结果甲基莲心碱对K562/A02的耐药性具有明显的逆转作用。用Nef处理后,对阿霉素药物敏感性的相对逆转效率第1天、第3天和第5天分别为9.6%、41.4%和10.7%;GST-πmRNA转录水平在用药后第3天下调最大,为(50.7±2.3)%。GST-π蛋白的表达于用药后第1天、第3天和第5天分别下降25.57%、48.42%和10.68%。结论甲基莲心碱具有较强的逆转K562/A02细胞多药耐药的作用,其逆转机制可能包括下调K562/A02细胞GST-πmRNA的转录和蛋白的表达。