庆大霉素损害鸡耳蜗后毛细胞再生的超微结构及其与听功能恢复的关系

给实验组鸡按50mg／（kg·d）剂量肌注庆大霉素共10d后，间隔1、3、6、9和12d对实验组和对照组鸡耳蜗电位（Ap）及听觉脑干诱发电位（ABR）进行测定，随后处死动物，用透射电镜（TEM）和扫描电镜观察鸡基底乳头（BP）毛细胞再生的超微结构和过程，结果可见毛细胞再生来源于Bp表层扁平状或立方形上皮细胞，在早期再生毛细胞胞质密度高，含有大量的线粒体，随后静纤毛长出，细胞核出现，表皮极发育成熟时静纤毛束形成，其毛细胞底部的神经末梢已长出，此时伴有Ap和ABR阈值的恢复。说明再生毛细胞形态成熟时已具有听觉功能的恢复，再生毛细胞在受损耳蜗听功能的恢复过程中起主要作用。     

耳蜗用微量渗透泵灌注生长因子对庆大霉素致聋豚鼠的治疗作用

目的　应用微量渗透泵 (Mini- Osmotic pump,MOP)给正常动物耳蜗和庆大霉素 (GM) )致聋豚鼠耳蜗长期恒速灌注人工外淋巴和表皮生长因子 (Epidermal growth factor,EGF) ,观察其对听力和内耳组织形态的影响。方法　用 Alzet model- 2 0 0 4型 MOP向三组各 1 0只的正常豚鼠 A组和 GM致聋豚鼠 B组 ,耳蜗底回鼓阶灌注人工外淋巴液 ,同法给 GM致聋豚鼠耳蜗灌注EGF设为 C组 ,在 MOP埋植前和埋植后 1、2、3和 4周测定 ABR反应阈值 ,用扫描电镜观察各组动物耳蜗 Corti器的组织形态改变。结果　 MOP给正常动物灌注人工外淋巴对 ABR和耳蜗内外毛细胞无明显影响 ,而给 GM致聋组豚鼠耳蜗灌注 EGF可促进受损内耳组织细胞修复 ,使ABR阈值改善。结论　应用 MOP可向耳蜗长期恒速灌注人工外淋巴 ,对耳蜗功能和形态无明显影响 ;而长期恒速灌注 EGF对 GM耳中毒豚鼠的耳蜗毛细胞有修复治疗作用。可使 ABR反应阈值下降     

Mammalin cochlear supporting cells transdifferentiation into outer hair cells

Objective To study the recovery of the outer hair cells in the bat cochlea after gentamicin exposure.Methods Bats were injected with a daily dose of gentamicin for 15 consecutive days and bromodeoxyuridine (BrdU)was given from day 16 to day 40 of this recovery phase. Hearing was assessed by overt acoustic behavior and auditory brainstem responses analysis, which was performed one day prior to the first injection and a day after the last injection (day 16). On day 40 animals were sacrificed for detection of cells that could take up BrdU. Results After 15 days of gentamicin treatment, all of the animals were proved to be deafened with significant increases of ABR thresholds,compared with control group. The findings in immunocytochemical stained samples and scanning electron microscopy revealed that BrdU labeled nuclei were observed in the cochlea in all of the deafened animals most commonly in the regions of the first-row and second-row Deiter's cells (DCs) and occasionally in the regions of the third-ruw DCs.Conclusion We suggest that, under sufficient drug and enough time, the bat cochlear supporting cells can directly transdifferentiate into the outer hair cells after aminoglycoside exposure. This transdifferentation process is essential for repair of outer hair cells and recovery of normal function after gentamicin exposure.     

THE EXPERIMENTAL STUDY ON SURGICAL TREATMENT OF TEMPOROMANDIBULAR JOINT ANKYLOSIS USING FREE ALLOLOGOUS COSTAL PERICHONDRIAL GRAFTS IN RABBITS

VariousmethodstotreatTMJankylosisarealltryingtopreventTMJfromanadhesionsoastoenvadearelapseofankylosis.TorebuildTMJ'sfunctionandavoidsuchapostoperativerelapsehavelongbeenaconspicuousyetunsolvableproblemtl.2).Accordingtomostresearchworksathomeandabroad,reconstructionofthejointorganizationplaysakeyroleinpreventingankylosisfromrelapsingafterasurgeryratherthanacompleterelianceonthefilling.Inanotherword,thesurgicalmethoditselfhasdecisiveinfluenceontherecurrenceratet3.41.Withavastadoptionofthere…     

离体毛囊切片两种制作方法的比较及凋亡检测

目的对人头皮游离毛囊(HF)切片制作及凋亡检测方法进行比较。方法分别将石蜡切片法和冰冻切片法应用于游离毛囊;利用原位缺口末端标记法(TUNEL)进行荧光染色与3,3′-二氨基联苯胺(DAB)染色,检测未经培养的游离毛囊及培养5 d的游离毛囊的不同部位凋亡细胞情况。结果在对游离毛囊形态检测中,各组毛囊在外根鞘(ORS),毛球(HB)下部,真皮鞘(DS)及毛乳头(DP)中的凋亡细胞数并无显著性差异(P>0.05)。结论冰冻切片法应用于游离毛囊简单有效,TUNEL原位荧光结合DAB染色适合于检测毛囊细胞凋亡情况。     

离体培养条件下神经生长因子对毛囊的影响

目的　观察神经生长因子 (nervegrowthfactor,NGF)对离体培养条件下的人头皮毛囊生长的影响。方法　在离体人头皮毛囊培养模型中 ,加入 10 0 μg·L -1的NGF ,测量毛囊长度的变化以及 2 4hDNA合成率。结果　目镜测微器观测 10 0 μg·L -1的NGF与 12 5mg·L-1的米诺地尔一样能明显地促进游离的人头皮毛囊生长 (P <0 .0 5 ) ,尤以前 8d较为明显 ;3 H TdR掺入检测的DNA合成率亦明显增高。结论　 10 0 μg·L -1的NGF对游离的人头皮毛囊的生长有促进作用     

肾上腺素对受损害鸡耳蜗毛细胞再生的促进作用

给１ｄ龄雏鸡按２００ｍｇ／（ｋｇ·ｄ）剂量肌注卡那霉素连续１０ｄ后，用肾上腺素０．５ｍｇ／（５０ｇ·ｄ）共治疗７ｄ，随后分别间隔０、１、２、３和４周处死，对其耳蜗基底乳头行扫描电镜和光镜观察。结果发现肾上腺素对鸡受损的毛细胞再生有明显的促进作用，其作用为使毛细胞再生数目增多，分化增殖显著加速。但其机制尚不明了。     

庆大霉素中毒豚鼠蜗核SP免疫反应阳性神经元的变化

用免疫组化方法探讨庆大霉素耳中毒时蜗核ＳＰ免疫反应神经元的胞体截面积及细胞数的变化。结果发现庆大霉素１００ｍ ｇ·ｋｇ－ １·ｄ－ １腹腔注射后１ｄ,豚鼠蜗核ＳＰ样神经元胞体截面积立即发生了变化,并持续到连续注药第２１ 天;ＳＰ样神经元细胞数量的相对变化发生在注药３ｄ 以后。结果提示：①庆大霉素中毒豚鼠蜗核神经元的变化和耳蜗的病变可能同时发生或蜗核早于耳蜗病变。②临床上治疗氨基甙类抗生素所致耳聋应兼治中枢病变并尽早实施     

HAIR CELL-LIKE CELL GENERATION INDUCED BY NATURE CULTURE OF ADULT RAT AUDITORY EPITHELIUM

Objective To establish adult rat auditory epithelial cell culture and try to find precursor cells of auditory hair cells in vitro. Methods With refinement of culture media and techniques, cochlear sensory epithelial cells of adult rat were cultured. Immunocytochemistry and Bromodeoxyuridine （BrdU） labeling were used to detect properties and mitotic status of cultured cells. Results The cultured auditory epithelial cells showed a large, flat epithelial morphotype and expressed F-actin and cytokeratin, a subset of cells generated from auditory epithelium were labeled by calretinin, a specific marker of early hair cell. Conclusion Adult rat auditory epithelium can be induced to generate hair cell-like cells by nature culture, this phenomenon suggests that progenitor cells may exist in rat cochlea and they may give birth to new hair cells. Whether these progenitor cells are tissue specific stem cells is still need more study.     

增龄相关听力丧失小鼠耳蜗毛细胞表型与基因突变的关系

目的　观察增龄相关听力丧失 (AHL)小鼠耳蜗毛细胞病理改变的超微结构 ,为老年性聋病理生理及临床表现+基因表型提供形态学改变依据。方法　应用扫描电镜 (SEM)观察BALB/c小鼠耳蜗Corti器毛细胞的超微结构改变 ,测定动物ABR反应阈值。DNA提取PCR扩增分析基因型。结果　 6月龄BALB/c小鼠耳蜗底回内外毛细胞有连续的缺失 ,静纤毛束有融合、散乱、变短和失去劲度。ABR阈值呈中到重度听力损失。证明种系特异的Ahl基因位点和基因功能。结论　耳蜗毛细胞静纤毛束融合、散乱、变短是老年性聋早期的主要病理改变 ,mdfw与Ah1的表现形式是同一基因位点 ,可能与myosin基因突变有关。     

组织工程活性真皮的构建研究

目的探讨用脱细胞真皮(ADM)、胶原海绵膜(SCM)、胶原凝胶构建活性真皮的可行性。方法从幼儿包皮中纯化、扩增成纤维细胞(Fb),将其分别种植于ADM、胶原凝胶、SCM上,观察细胞增殖及支架收缩等情况。结果Fb在ADM上不能成活;在SCM上增殖良好,人工真皮收缩不明显;在胶原凝胶中增殖活跃,但人工真皮收缩明显。结论利用SCM构建的人工真皮,是一种较理想的活性真皮。     

克山病病区和低硒非病区居民发铜、锌、锰、铁含量的对比研究

用原子吸收光谱法对比测定了克山病病区（陕西彬县和云南牟定）、非病区（陕西礼泉）和低硒非病区（四川南部）健康人发铜、锌、锰、铁含量。发现：①与非病区相比，两病区儿童和成人发铜，两病区儿童和彬县成人发锰和发锌无差异；但牟定成人发锌低，而发锰高；②与低硒非病区相比，彬县成人发铜低，儿童发锌高；牟定儿童发铜高，成人发锌低；两病区成人发锰高；③病区儿童和成人发铁不仅高于礼泉，也高于南部，提示病区低硒人体铁水平与克山病发病的关系值得进一步探讨。     

耳蜗外毛细胞静纤毛束变异的判定标准研究

目的建立耳蜗外毛细胞(OHCs)静纤毛束变异的形态学统一判定标准。方法光镜和扫描电镜观察豚鼠耳蜗OHCs静纤毛束变异形态学特征及听觉诱发电位(ABR)、听神经动作电位(CAPs)和耳声发射畸变产物(DPOAE)参数改变。结果在100只实验豚鼠中,有28%的动物OHCs静纤毛束变异;OHC1变异最多见转位90°,常可见连续数个毛细胞90°转向蜗底,部分毛细胞静纤毛束“W”型转位达180°。结论我们拟定耳蜗外毛细胞静纤毛束变异的标准为:①超过10%的耳蜗第一排外毛细胞静纤毛束的“W”型变形及转向,毛细胞由45°转位至90°改变,多向基底方向,且呈双侧性。②毛细胞静纤毛束变异程度分为Ⅰ型:50%的OHC变异为重度变异;Ⅱ型:30%的OHCs变异为中度变异;Ⅲ型:10%以上的OHCs变异为轻度变异;③耳蜗毛细胞静纤毛束变异动物的双侧耳听功能(ABR、CAP、DPOAE)改变。     

负压对供皮区创面再上皮化速度的影响

目的观察负压对猪供皮区创面再上皮化速度的影响。方法5头小猪,每头猪的背部各形成面积为5 cm×10 cm断层皮片供皮创面。实验组采用连续120 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)负压治疗,对照组用凡士林纱布换药。结果负压治疗组创面再上皮化速度显著提高,治疗后4-6 d创面即愈合,较对照组提前2-4 d;创面炎症反应明显减轻;毛囊上皮、再生的基底以及腺上皮细胞增殖活跃,S期及G2 M期细胞比例增多(P<0.01);细胞核增殖抗原表达显著增强。结论负压可以显著提高供皮区创面再上皮化速度。     

阿霉素对大鼠心肌细胞膜磷脂损伤及CoQ_(10)的保护作用

用电镜方法观察阿霉素（ADR）对心肌细胞膜磷脂损伤及CoQ10的保护作用。结果显示：ADR大鼠心脏心肌细胞依ADR累积量均呈现线粒体明显增生，线粒体膜磷脂不同程度脱失；血浆及心肌丙二醛（MDA），血浆乳酸脱氢酶（LDH）和肌酸磷酸激酶（CPK）升高，且与心功能及心脏大小相关。培养心肌细胞结构、培养液中MDA、LDH及CPK含量与ADR心脏改变一致。CoQ10干预后，心肌细胞线粒体增生程度减轻，线粒体膜磷脂损伤性改变得到修复。提示：ADR通过损伤心肌细胞及线粒体膜磷脂对心脏产生毒害作用。CoQ10对这种膜损伤有保护和修复作用。     

豚鼠化脓性中耳炎耳蜗柯蒂氏器扫描电镜观察

本实验以鼓泡接种金黄色葡萄球菌的方法诱发豚鼠的化胀性中耳炎,用扫描电镜观察接种细菌后1、2、4及6周不同时间豚鼠柯蒂氏器的病理改变,发现受试动物的耳蜗各回均可见不同程度的毛细胞静纤毛异常、细胞缺失及支持细胞的损伤等。另外,本实验还显示了外毛细胞消失及支持细胞指状突修复前后的一些表现。     

EXPERIMENTAL STUDY OF COCHLEAR HAIR CELL LOSS IN THE GUINEA PIG

ＺｈｕＨｏｎｇｌｉａｎｇ（朱宏亮）ＥＸＰＥＲＩＭＥＮＴＡＬＳＴＵＤＹＯＦＣＯＣＨＬＥＡＲＨＡＩＲＣＥＬＬＬＯＳＳＩＮＴＨＥＧＵＩＮＥＡＰＩＧＺｈｕＨｏｎｇｌｉａｎｇ（ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＯｔｏｌａｒｙｎｇｏｌｏｇｙ．ＦｉｒｓｔＡｆｆｉｌｉａｔｅｄ...     

中强白噪声对螺旋器毛细胞有氧代谢的影响——动物试验研究之二

<正> 耳蜗螺旋器感觉毛细胞,分化程度高,代谢旺盛。一些研究者认为,在声响过度刺激时,其代谢首先枯竭,进而发生功能和形态变化。众所周知,细胞的活动需从氧代谢摄取能量,而后者却要受到有关酶的催化。所以根据氧化还原酶的活性就可以间接判断细胞代谢的程度。参与氧化的酶很多,琥珀酸脱氢酶(Succinic Dehydrogenase:SDH)乃其中之一。因能用组织化学方法间接而特异地在细胞中进行定位和定量,故常被用作研究组织有氧代谢     

克山病病区低硒儿童血小板GSH_(px)和SOD活性以及cAMP含量

本文对比测定了克山病病区与非病区儿童血小板GSH_(px)、SOD活性和cAMP水平,以及全血、红细胞、血浆和头发硒含量。结果表明,病区儿童血和发硒均明显低于非病区;血小板GSH_(px)活性比非病区儿童显著低下,但血小板SOD活性和cAMP水平无显著差异。提示病区低硒儿童血小板GSH_(px)活性的降低可能导致血小板功能和代谢的改变。     

地方性克汀病区不明原因智能低下儿童头发中五种微量元素含量分析

(本文应用原子吸收分光光度计法)测定了克汀病区不明原因智能低下儿童和正常儿童头发中五种微量元素(Cu、Zn、Fe、Mn、Pb)的含量。(发现智低组儿童头发中Cu、Zn含量明显低于正常儿童);Cu/Zn比值和Mn,Pb含量明显高于正常儿童。对实验结果中有关问题进行了一些探讨,为寻找致病因子提供了线索和资料。