宫颈炎和宫颈癌患者宫颈分泌物中单纯疱疹病毒(HSV)的分离和鉴定(摘要)

<正> 目前已了解多数疱疹病毒具有持续性感染和动物致癌性,而单纯疱疹病毒Ⅱ型(HSV-2)则可能与人类宫颈癌有关。我们为了探讨HSV-2对宫颈癌、宫颈炎的致病关系,将临床确诊为宫颈炎和宫颈癌患者宫颈分泌物标本加入含有抗真菌、抗细菌的乳蛋白水解物营养液中,经4℃冰箱过夜处理后,接种于乳兔肾原代细胞上,逐日镜检细胞变化情况,若为阴性结果     

I型单纯疱疹病毒感染致全身多脏器损害1例

<正> 我科于1987年12月2日收治1例Ⅰ型单纯疱疹病毒感染致眼、胰、肝、肾、皮肤等器管损害,全愈出院,随访1年未见复发,现报道如下. 患者,男,40岁.以发冷发热4天皮疹3天主诉入院,入院时体温39.2℃,巩膜微黄染,球结膜充血,咽红,躯干及四肢皮肤可见约1cm×1cm大小之多形性环形红斑,中央点状着色较重,肝大肋下1cm,脾肋下刚及,     

单纯疱疹病毒Ⅱ型DNA结构

<正> 单纯疱疹病毒(Herpes simplex virus简称HSV)属于疱疹病毒属中α亚属。病毒颗粒直径为100～150mm,有四层结构。最内层是双股DNA卷绕在一个轴上;包着核酸的是病毒衣壳。衣壳有162个衣壳体,其中六联体150个,五联体12个,核衣壳直     

土贝母皂甙对家兔单纯疱疹病毒性角膜炎的作用

目的评价土贝母皂甙(tubei moside,Tu)治疗家兔单纯疱疹病毒性角膜炎(herpes si mplex keratitis,HSK)的效果。方法在地鼠肾细胞BHK-21上进行单纯疱疹病毒I型(HSV-1型)SM44毒株复苏,制作兔HSK模型。家兔分为0.2g/L Tu、无环鸟苷(ACV)和生理盐水(NS)3组,采用裂隙灯显微镜、扫描电镜和透射电镜观察眼部病变的变化。结果0.2g/L Tu、无环鸟苷和生理盐水组第6~8天角膜病变分值分别为3.13~3.5、1.75~1.88和3.83~3.88,第14天时为2.07、1.13和2.77,3组间比较,均有显著性差异(P<0.01)。0.2g/L Tu可以显著缩小角膜病变面积,促进角膜上皮细胞的修复,其作用优于生理盐水组,但不及ACV组。结论Tu点眼剂治疗实验性HSK有一定的疗效,但尚不及ACV。     

异基因骨髓移植治疗急性白血病1例报告

报道急性早幼粒细胞白血病缓解半年,进行异基因骨髓移植1例。预处理用环磷酰胺加全身X线照射。移植其弟的骨髓。移植后住层流无菌室,全环境保护等。术后40天血象及骨髓象恢复正常。术后210天复查红细胞同功酶,证明供者骨髓被植活。随访1年5个月无复发。     

经血来源干细胞移植在小鼠卵巢早衰模型中的定位分布

目的探讨经血来源干细胞(menstrual-derived stem cells,MenSCs)移植在卵巢早衰(premature ovarian failure,POF)小鼠模型中的分布及生长情况。方法通过腹腔注射顺铂构建POF小鼠模型,90只8周龄雌性C57/BL6小鼠随机分为3组,MenSCs移植组:利用携带绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)基因的慢病毒感染MenSCs进行标记,建模后经尾静脉注射GFP标记的MenSCs悬液(5.0×107个/mL)200μL;POF组:建模后小鼠尾静脉注射等量PBS;空白对照组:正常小鼠不予任何处理仅尾静脉注射等量PBS。观察移植后各组小鼠的一般情况,移植后第10天处死小鼠测定血清FSH和E2浓度、检测卵巢组织学变化、卵泡计数以及检测GFP荧光信号在卵巢内的分布和定位情况。结果建模后小鼠与空白对照组小鼠比较体质量减轻、食欲减退、活动减少,POF组小鼠FSH水平显著增高,E2水平显著降低,卵巢间质纤维化明显,各级卵泡数均显著减少。MenSCs移植组小鼠自移植后体质量逐渐增加,食欲增强,活动增多,移植后第10天FSH浓度显著低于POF组;E2浓度显著高于POF组;原始卵泡、生长卵泡及成熟卵泡数均显著高于POF组,卵巢间质纤维化程度较POF组减轻,但各项指标仍与空白对照组间存在差异。荧光显微镜下可见GFP-MenSCs定位于卵巢间质,未见于卵泡及颗粒细胞,肝脏、肾脏、肺组织未见GFP绿色荧光信号。结论 MenSCs移植可向POF小鼠卵巢归巢,定位于卵巢间质,对卵巢组织结构及内分泌功能起到修复作用。     

体内心肌缺血微环境下大鼠骨髓间充质干细胞钾离子通道的表达

目的动态观察在体内心肌缺血微环境下,大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)向心肌细胞分化过程中主要钾离子通道的分化表达。方法采用左冠状动脉前降支(left anterior descending coronary artery,LAD)结扎术建立大鼠急性心肌梗死(myocardial infarction,MI)模型(n=60),将绿色荧光蛋白(green fluorescent pro-tein,GFP)标记的MSCs,心外膜下注射移植到心肌梗死周边区;免疫荧光染色观察移植后3d(MI-3d组)、5d(MI-5d组)、7d(MI-7d组)、9d(MI-9d组)MSCs的存活情况及其主要钾离子通道(Kv1.4、Kir2.1、Kv4.3、Kca1.1)蛋白的表达;应用激光捕获显微切割技术分离以上各组心肌组织中GFP标记的MSCs群,应用Real-time PCR测定其Kv1.4、Kir2.1、Kv4.3、Kca1.1的mRNA表达。结果免疫荧光染色观察到移植的MSCs于移植后第3天开始持续表达Kv1.4、Kir2.1、Kv4.3,不表达Kca1.1,于移植后第9天几乎未观察到MSCs;Real-time PCR结果显示移植后3、5、7d,移植的MSCs上Kv1.4和Kir2.1表达呈逐步增多趋势,差异具有统计学意义(P<0.05),Kv4.3的表达无此变化趋势,但高于未移植MSCs,未见明显差异。结论移植的MSCs在大鼠体内心肌缺血微环境下向心肌细胞分化的过程中能够表达部分钾离子通道表型,但其不能长时间、有效的存活。     

供者HBV感染对异基因造血干细胞移植受者的影响

目的观察供者乙肝病毒(HBV)感染对异基因造血干细胞移植受者的影响。方法回顾性分析我院2015年1月至2016年12月期间行异基因造血干细胞移植的4例非乙肝患者,其供者均有HBV感染。观察应用HBV感染供者的外周血造血干细胞进行移植,移植后对受者造血重建、肝静脉闭塞病(VOD)以及HBV感染的影响。结果 4例供者中2例供者为乙肝血清学HbsAb、HbeAb及HbcAb阳性,HBV-DNA定量阴性,供受者均未应用抗HBV药物。1例供者为HbsAg、HbeAb及HbcAb阳性,HBV-DNA定量阳性;1例供者HbsAg及HbcAb阳性,HBV-DNA定量阳性。这2例供者移植前1个月开始口服核苷类药物治疗,移植前HBV-DNA定量转为阴性,受者预处理前1周开始口服核苷类药物预防HBV感染,回输干细胞当天及回输后第3天及第7天均给予乙肝免疫球蛋白,移植后每月复查HbsAb定量,低于150IU给予输注乙肝免疫球蛋白。4例患者移植后均造血重建,无1例发生VOD,截止随访结束均无HBV感染,监测HBV-DNA定量阴性。结论对于HBV复制的供者及其受者口服核苷类抗HBV药物联合乙肝免疫球蛋白可以有效预防受者HBV感染。     

树突状细胞对裸鼠结肠癌移植瘤的抗癌效应

目的 研究结肠癌患者外周血树突状细胞(DC)体外诱导后在裸鼠体内的抗癌效应.方法 通过皮下移植法建立裸鼠模型,按治疗次数分为对照组、治疗组和加强组;从患者外周血中分离并培养出DC,以肿瘤抗原和金黄色葡萄球菌肠毒素B(SEB)刺激DC;DC激活同源T淋巴细胞;DC激活的T淋巴细胞经用该患者结肠腺癌细胞建立的裸鼠模型的尾静脉注入,观察成瘤时间、肿瘤生长情况、移植肿瘤大小及裸鼠摄食、活动状况.结果 成功建立结肠癌裸鼠模型.肿瘤接种第60天,对照组、治疗组及加强组肿瘤大小分别为(3899±22)mm3、(1301±16)mm3、(392±18)mm3.与对照组相比,治疗组及加强组移植瘤生长均受到抑制(P=0.000);与治疗组相比,加强组移植瘤生长抑制更明显(P=0.000).结论 同源结肠癌患者外周血DC和T淋巴细胞共孵后能抑制裸鼠体内移植瘤的生长.这有可能为肿瘤治疗提供一种新的方法.     

单纯疱疹病毒Ⅰ型DNA中BamHIC片断结构和功能的研究——Ⅰ.BamHI C片断的次级克隆和酶谱分析

运用DNA重组技术对单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-1)DNA分子的BamHI C片断进行了次级克隆,建立了该基因片断中8个片断的无性繁殖系。同时利用核酸限制性内切酶的多酶解技术,对该片断作了酶谱分析。     

新生小鼠睾丸组织异体异位移植物中精子形态及功能的研究

目的采用卵胞浆内单精子显微注射(ICSI)技术探讨新生小鼠睾丸组织异体异位移植到裸鼠体内后所生成精子的受精能力。方法将含有原始生精细胞的新生1-2 d小鼠睾丸组织异体异位移植到BALB/c-nu/nu免疫缺陷小鼠背部皮下。8周后取出移植物,通过常规染色和电镜技术对生精小管中生精细胞组成和形态进行观察;以薄层明胶水解法检测精子顶体蛋白酶活性;采用ISCI技术检测移植物中具有成熟形态精子的受精能力。结果移植物的HE染色发现,新生小鼠睾丸组织在裸鼠体内已启动并进行精子发生过程,生精小管中含有包括精子在内的所有类型生精细胞;移植物组织经处理后,可计数到具有镰刀头状的长尾精子约1×103个/mg移植物;透射电镜标本中观察到的精原细胞和精母细胞均具有正常超微结构;薄层明胶水解法检测可观察到顶体蛋白酶呈阳性反应的精子;ICSI结果显示,单纯ICSI处理组与ICSI+电激活组均有受精和卵裂现象发生。结论仅含有原始生精细胞的新生小鼠睾丸组织在异体异位移植到裸鼠体内后,可以产生形态正常并具有受精能力的精子。     

人类6型疱疹病毒

<正> 人类6到疱疹病毒(Human Herpesvirus6,HHV-6)是一种新发现的疱疹病毒,它在人群中广泛感染,并与多种疾病有关;但目前对该病毒的研究尚处于起步阶段,该病毒的许多方面仍需进一步研究。1986年美国国立肿瘤研究所Salahuddin等首次报道了从6名患B淋巴细胞瘤及淋巴腺炎的患者(其中2名HIV阳性)中分离到一种新的病毒;由于该病毒同时又感染入的B淋巴细胞,故当时命名     

HSV特异性转移因子治疗复发型HSVK的临床观察

利用单纯疱疹病毒特异性转移因子联合无环鸟苷滴眼液治疗４０例复发型单纯疮疹病毒性角膜炎（Ｈｅｒｐｅｓ　ｓｉｍｐｌｅｘ　ｖｉｒｕｓ　ｋｅｒａｔｉｔｉｓ，ＨＳＶＫ）患者，总有效率为１００％，治愈率为８６．６％。采用红细胞Ｃ３ｂ受体花环试验研究红细胞免疫功能的变化。其结果，１０例正常人与４０例治疗前患者比较（Ｐ＜０．０１），两组有显著性差异。４０例患者，治疗前与治疗后比较两组有显著差异（Ｐ＜０．０１）。表明ＨＳＶＫ患者治疗前免疫功能低下，用ＨＳＶ特异性转移因子治疗后，红细胞免疫功能显著提高。     

非血缘异基因造血干细胞移植治疗白血病21例临床观察

目的观察非血缘异基因造血干细胞移植治疗白血病的临床疗效及并发症。方法回顾性分析21例非血缘异基因造血干细胞移植的恶性血液病患者临床资料,其中19例为外周血造血干细胞移植,1例为骨髓移植,1例为脐血移植。HLA全相合8例,HLA不全相合13例。回输单个核细胞(MNC)中位数9.078×108/kg,CD34+细胞中位数4.62×106/kg。10例患者采用BuCy方案预处理,9例采用改良的BuCy2方案预处理,1例采用非清髓的BuCy+氟达拉滨的方案,1例采用TBI+VP-16+CTX+meCCNU预处理。预防移植物抗宿主病方案,其中20例采用短程甲氨蝶呤+环孢素A+霉酚酸酯+抗胸腺细胞免疫球蛋白的四联方案,1例脐血移植患者采用短程甲氨蝶呤+环孢素A+抗胸腺细胞免疫球蛋白。术后观察受者的造血重建、并发症以及预后情况。采用低剂量肝素+前列腺素E1+丹参注射液预防肝静脉闭塞病(VOD)。结果除1例患者于空髓期死于颅内出血,其余20例患者均获造血重建。高剂量组MNC及CD34+细胞较低剂量组中位重建时间平均缩短1d。预处理中出现高热、寒战、胃肠道副反应、肝脏损伤及口腔黏膜炎等副反应,均给予对症处理后好转。HLA不合者较HLA全相合者移植后移植物抗宿主病(GVHD)发生率高,差异有统计学意义。9例患者出现aGVHD(Ⅰ度3例,Ⅱ度4例,Ⅲ度2例);9例出现cGVHD,表现为皮肤及肝脏受损,经有效治疗后好转。术后100d内18例受者出现细菌或真菌感染,以上呼吸道感染为主,7例发生巨细胞病毒感染,2例出现EB病毒血症,1例出现尿BK病毒感染。1例患者因VOD死亡,其余患者均未发生VOD。5例发生Ⅱ级至Ⅲ级出血性膀胱炎,经治疗后均好转。受者总的中位生存时间为24月(136d~9年),1年及3年总生存率分别为85.2%和63.9%,无病生存率分别为81.0%和23.8%,无复发生存率为71.4%和14.3%。结论非血缘异基因造血干细胞移植是治疗白血病的有效方法;BuCy及改良BuCy2的预处理方案均安全有效,毒性反应可逆、可耐受;高剂量MNC及CD34+细胞数组造血重建时间较低剂量组缩短;HLA不全相合者移植后GVHD发生率较HLA全相合者增高;低剂量肝素+前列腺素E1+丹参注射液可有效预防VOD。     

用酶标记SPA酶联免疫吸附试验(EliSA)及免疫酶染法检查疱疹病毒抗体的对比(摘要)

<正> 为了建立一种对病毒感染性疾病早期诊断的实验室方法,我们采用目前国内外认为标记简单、性质稳定、特异性高,简便易行的酶标记萄葡球前A蛋白(SPA)作为第二抗体,用于免疫酶染法及ElisA法,检测了53份宫颈癌、宫颈炎病人血清中的单纯疱疹病毒抗体。对比分析,认为免疫酶染法优于ElisA法: (1)酶染法简单易行、方法稳定、不需要特殊设备,在普通显微镜下即可观察结果,而ElisA法需要选择合适的载体,且易受多种因素影响,如抗原要较纯,浓度要较高,温度要恒定等。     

两种方法冻存胎儿卵巢组织后的活力判断

目的 比较常规慢速冻存法与快速冻存法保存胎儿卵巢组织的效果,为快速冻存法的应用提供依据.方法 以1.5 mol/L乙二醇与0.1 mol/L蔗糖作冷冻保护剂,分别采用常规慢速冻存法和三步快速冻存法保存1 mm3大小的胎儿卵巢组织,解冻后观察两组卵巢组织内的超微结构;以去势裸鼠为受体,将解冻后的胎儿卵巢皮质片移植于裸鼠的双肾被膜下,观察移植2周和8周后移植物的组织学结构、移植物存活率、卵泡密度及受体鼠血清E2水平.结果 与新鲜胎儿卵巢组织相比,慢速和快速冷冻后卵巢组织中形态正常的卵母细胞的比例都明显减少(P<0.05).移植后2周的两移植组均有卵泡存活,原始卵泡广泛分布于基质中;移植后8周的两移植组的卵泡数量都明显减少,但初级卵泡的数量相对增加.比较移植2周和8周后移植物的存活率、单位面积移植物内的原始卵泡或初级卵泡数及受体鼠血清雌激素水平,两移植组并无显著性差异.结论 三步快速冻存法可有效保存胎儿卵巢组织的生物活性,解冻后卵巢组织的形态学结构、雌激素分泌与常规慢速冻存组并无显著性差异.     

同种异体主动脉瓣移植的临床应用(摘要)

<正> 同种异体主动脉瓣移植术始於50年代,80年代由于脏器移植及冷藏技术的发展,在世界各地被广泛地重视和采用。我校1987年初开始采集人主动脉瓣,经过消毒处理冷藏于液氮之中,经过了72～111天的保存于1987     

不同移植方案在不同获卵数患者中的临床结局分析

目的比较不同获卵数患者2枚第3天(D3)胚胎移植和单囊胚移植的临床结局,为临床移植策略的选择提供数据支持。方法回顾性分析2014年1月至2014年12月在郑州大学第三附属医院生殖医学科行体外受精/卵胞浆内单精子显微注射(IVF/ICSI)治疗的患者,根据获卵个数分为3组,A组获卵个数为5~9枚卵子,B组为10~14枚卵子,C组为≥15枚卵子。每组患者均有4种不同的移植方式,移植2枚D3胚胎(a)、移植1枚囊胚(b)、复苏移植2枚冷冻D3胚胎(c)和复苏移植1枚冷冻囊胚(d);比较3组患者卵子的2PN受精率、可移植胚胎率及优质胚胎率;比较各组患者4种移植方式的胚胎种植率、生化妊娠率、临床妊娠率、多胎率和流产率等差异。结果 1A组、B组和C组分别有667、573、479个移植周期,其中A组患者IVF的2PN受精率和可移植胚胎率明显高于B组和C组(P=0.003/P<0.001);2A组患者4种移植方式的生化妊娠率、临床妊娠率和流产率差异均无统计学意义(P>0.05),但c的种植率明显低于a和d(P=0.027/0.020);B组患者中d的种植率明显高于a和c(P=0.005/0.001);C组患者中d的生化妊娠率和临床妊娠率均明显高于a(P=0.048/0.027)和c(P=0.003/0.001),且囊胚移植的种植率均明显高于D3胚胎(P<0.05);33组患者单囊胚移植多胎率较胚胎移植明显降低(P<0.05)。结论对卵巢高反应人群(获卵数≥15枚),单囊胚移植在保证高种植率和妊娠率的同时,明显降低了多胎率;而获卵数为5~9枚和10~14枚的患者,D3胚胎移植的临床妊娠率和单囊胚移植相似,但多胎率明显增高;D3胚胎培养囊胚后择期移植具有较高的临床妊娠率,对于获卵数≥10枚患者是最佳的移植方案。     

焦庄户红色之旅

这是一个红色的季节。我们筹备周末出发,完成一次短暂却有意义的红之旅。周末两天休息时间,星期六当然要睡个懒觉来慰劳辛苦了五天的自己剩星期曰一天,去哪儿呢？只有就近了有人强烈提议去采摘樱桃,正好个季节的樱桃熟了、红了;有人思想觉挺高,提议这次采摘行动应该不同于以的单纯“腐败”,应当做点儿有意义的儿。至少,缅怀一下用生命为我们换取天美好生活的英雄们,接受一次爱国主教育。于是,我们找到了一个两全其美好去处——顺义,焦庄户。     

家兔肋软骨膜移植再生关节软骨的实验研究

作者将14例家兔的肋软骨膜移植于剥去关节软骨的下颌髁状突骨床上,以电镜为主观察了自体软骨膜再生关节软骨的过程。结果见软骨形成开始于术后第14天,此时膜中出现软骨细胞,形成软骨基质;1月时软骨分层并开始改建,软骨细胞呈典型形态,伴有丰富的粗面内质网和高尔基氏器,提示其分泌活动旺盛;术后2月时细胞器减少;4～6月时软骨细胞呈现退变,而软骨形态已接近正常的关节软骨。作者还讨论了软骨膜移植物形成关节软骨以及软骨改建的机理。